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专利基本信息
专利名称 一种广谱溶菌酶的高通量筛选方法
专利状态 - 专利号(申请号) CN107164457B
专利申请日期 2017-04-26 专利类型 发明专利
申请公布号 2017102846259 申请公布日 2017-04-26
授权公告号 - 授权公告日 -
发明人 温赛;刘怀然;茅同心
专利权人 北京工商大学
专利摘要 本发明涉及分子生物学技术领域的一种广谱溶菌酶的高通量筛选方法。该方法包括以下步骤:A,将目标溶菌酶的基因突变文库在真核细胞中进行分泌表达,获得含不同活性目标溶菌酶的发酵液;B,将含不同活性目标溶菌酶的发酵液分别加入到反应体系中进行反应,筛选出对革兰氏阴性菌杀菌活性高的溶菌酶;其中,反应体系包括:胞内表达“供体荧光蛋白‑蛋白酶的识别位点‑受体荧光蛋白”的革兰氏阴性菌、蛋白酶和蛋白酶反应缓冲液。本发明所述筛选方法通过FRET荧光蛋白对与位点特异性蛋白酶的级联,显著提高了检测的灵敏度;同时该方法可利用荧光酶标仪和96微孔板实现溶菌酶的高通量检测。
专利价值评估分析
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