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微小分子RNA-508-5p作为抗肿瘤标志物的用途
成熟度:正在研发
技术类型:发明
应用行业:制造业
技术简介
本发明提供一种miRNA‑508‑5p对肝癌和胃癌细胞株新陈代谢的调控作用,很可能成为预防与治疗肿瘤的标志物。越来越多的证据表明,microRNA可作为一种癌基因或抑癌基因,参与调控多种癌症的发生和发展过程。本发明通过构建慢病毒侵染肿瘤细胞模型的实验证明,miRNA‑508‑5p对肿瘤细胞株HepG2和SGC7901的增殖、迁移和侵袭等具有明显抑制作用,并且促进其细胞的凋亡,具有调控细胞周期及新陈代谢的作用,因此miR‑508‑5p很可能成为肿瘤预防与治疗的全新靶点;并且通过靶基因删选软件及双荧光素酶报告系统证实miR‑508‑5p发挥细胞调控作用,是通过特异性靶向抑制癌基因S‑期激酶相关蛋白2基因(Skp2)的表达。
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扶正驱邪中药促进乳腺癌细胞调亡及干预癌基因的实验研究
成熟度:-
技术类型:-
应用行业:卫生和社会工作
技术简介
本课题运用细胞培养技术旨在研究扶正驱邪中药与抗癌剂阿霉素结合对c-erbB-2(HER-2/neu)及变异型P53等癌基因表达的调整作用以及对乳腺癌细胞调亡的影响。通过本课题探讨了扶正驱邪中药抗肿瘤的机理,尤其是对癌细胞生长抑制率,集落抑制率,细胞调亡指数,超微形态学变化,HER-2/neu及P53基因表达影响的观察。从本课题经费到位2003年6月起我们开始进行工作,首先查新,调研国内外有关本课题的研究进展、收集资料,检索论文,绘制实验表格,进行预实验,查缺补漏。因本实验初就遭遇“非典”,致使最初工作进行的不顺利,直至2003年12月才将初步工作进行完成。从2004年1月开始正式进行实验:1.细胞凋亡实验;生长抑制率(IR);集落抑制率的测定。具体操作过程(1)人P53(+),HER-2/ neu (+)乳腺癌细胞原代培养:人乳腺癌细胞株,购自北京中国科学研究院细胞库。(2)中药合剂制备:中药“乳岩宁方”药物组成:人参、黄芪、白术、茯苓、半枝莲、莪术、白花蛇舌草、山慈姑、薏苡仁、浙贝母等十四味中药,购于辽宁中医学院附属医院药局。制备方法:①将上述中药先后用10倍水煎煮1h,8倍水煎煮0.5h,收集两次煎液过滤,药渣弃去。②将滤液浓缩,最终浓度为2.7g/ml。③2000r/min离心30min,取上液,用0.22μm孔径的微孔滤膜滤过除菌。④无菌实验阴性后备用。(3)生长抑制率(IR)分组处理:①空白组:无药物处理;②单纯中药组;③阿霉素处理;④中药加阿霉素处理;采用MTT法进行细胞毒性实验,计算细胞生长抑制。计算细胞增长抑制率:相对存活率(%)=(用药组OD值-无细胞空白组OD值)/(不加药细胞对照组OD值-无细胞空白组OD值)×100%,抑制率(%)=1-相对存活率。2.细胞凋亡实验;流式细胞仪检测;细胞调亡指数;P53蛋白检测: ①空白组:无药物处理;②单纯中药组;③阿霉素处理;④中药加阿霉素处理。采用卵白素-生物素—过氧化物酶法(ABC)法,进行免疫细胞化学方法检测p53蛋白。ABC法即卵白素-生物素—酶复合物法,它是目前最敏感的免疫细胞化学染色法之一。此法不仅灵敏性高而且非特异染色少,背景清晰,对比度极佳。p53蛋白染色以细胞核呈清晰棕色为阳性,单纯胞浆着色或胞核、胞浆均无着色为阴性。3.HER-2/nen基因检测. (1)空白组:无药物处理;(2)单纯中药组;(3)阿霉素处理;4)中药加阿霉素处理。采用地高辛标记的寡核苷酸探针及其原位杂交试剂盒,用原位杂交方法检测HER-2/neu基因。制成切片,在光镜下观察结果。计算平均阳性率,无阳性细胞为失表达,阳性细胞<30%为+,阳性细胞30%-70%为++,阳性细胞>70%为+++。以细胞质内棕黄色颗粒为阳性信号。4.进行光镜及电镜等形态学变化:主要进行检测标本的处理,光镜及电镜的照片观察、采集。相差显微镜动态观察,接种于盖玻片上的对照组和各实验组细胞的形态变化。细胞形态和生长改变与药物作用效应的关系一般可大致分为五个等级。5.数据整理,结题,论文写作及交流,统计学处理:方差分析、q检验,用SPSS10.0统计软件进行统计分析,论文发表。主要进行图像分析与统计学处理:经ABC法染色的乳腺癌细胞,置MIAS300全自动图像分析仪40倍显微镜下分别检测HER-2、p53染色积分,每个视野测定100个细胞,共测5个视野,以所测得的平均染色积分作为染色阳性强度。采用SPSS 10.0软件进行方差分析、q检验。各实验组MTT法检测细胞生长抑制率(%)比较本课题结果:1.各组MTT结果比较乳岩宁煎剂、阿霉素、乳岩宁血清对乳腺癌细胞的增殖均有抑制作用,抑制作用随药物浓度增高而有加强趋势,最高抑制率可达40.00%,且剂量组间有差异(P0.05),阿霉素组乳岩宁血清组乳岩宁煎剂组。2.免疫细胞化学检测p53蛋白比较乳腺癌细胞ABC法染色结果为p53呈细胞核着色,用药组细胞染色强度有不同程度变化,伴形态改变。体外自动图像定量分析结果见表1。经方差分析及q检验,用药组(阿霉素+乳岩宁血清组,阿霉素组)癌细胞p53表达与未用药组比较有差异 (P0.05)。乳岩宁血清组单独用药效果与未用药组比较差异无显著性(P0.05)。表1:免疫细胞化学方法检测各实验组p53 结果(x±s)阿霉素 乳岩宁血清 阿霉素+乳岩宁 阴性对照组 空白对照 (OD值) (OD值) 血清(OD值) (OD值) (OD值)高剂量2.823±0.024 2.948±0.089 2.513±0.023中剂量2.924±0.066 2.962±0.124 2.847±0.049低剂量2.972±0.029 2.984±0.010 2.886±0.108未用药3.012±0.057 0注:高剂量为0.5倍血浆峰值浓度,中剂量为0.2倍血浆峰值浓度,低剂量为0.1倍血浆峰值浓度。单位为mg/L。3.原位杂交方法检测HER-2/neu基因比较原位杂交方法检测结果为HER-2/neu呈细胞膜及胞浆着色,用药组细胞染色强度有不同程度变化,伴形态改变。体外自动图像定量分析结果见表2。经方差分析及q检验用药组(阿霉素+乳岩宁血清组,阿霉素组)癌细胞HER-2/neu表达与未用药组比较有显著性差异 (P0.05)。乳岩宁血清组单独用药效果与未用药组差异无显著性(P0.05)。表2 原位杂交方法检测各实验组HER-2/neu基因结果(x±s)阿霉素 乳岩宁血清 阿霉素+乳岩宁 阴性对照组 空白对照(OD值) (OD值) 血清(OD值) (OD值)(OD值)高剂量2.107±0.011 2.128±0.012 2.058±0.012中剂量2.116±0.010 2.130±0.013 2.103±0.013低剂量2.120±0.013 2.136±0.012 2.114±0.017未用药 2.144±0.013 0 0注:高剂量为0.5倍血浆峰值浓度,中剂量为0.2倍血浆峰值浓度,低剂量为0.1倍血浆峰值浓度。单位为mg/L。4.光镜观察发现用药组出现随着药物浓度增高,其凋亡细胞的发生率随之增高,且凋亡细胞的形态结构越发典型。凋亡细胞体积变小、胞浆膜完整但出现发泡现象、胞浆固缩、染色体浓聚成团块状、核碎裂、细胞变形、胞膜有明显突起,部分细胞膜包裹碎裂核形成凋亡小体,呈现典型凋亡现象。空白对照组未见凋亡细胞,细胞呈现典型的恶性肿瘤细胞特征,细胞大小不等、成梭形或不规则型、细胞核与细胞质比例增大、核内染色之增减、核仁增大、可见多个核仁等,且与HER-2/neu及 p53基因抑制呈正相关。相差显微镜、光镜观察发现,凋亡细胞变化特征有两种:一种为间期凋亡特点,细胞染色质固缩、聚集至核边、胞浆浓缩、有空泡形成;另一种为分裂染色体散乱分布于细胞中、细胞膜出泡、进而染色体聚集成团、形成凋亡小体,到后期凋亡小体及残留的凋亡细胞进行次级坏死。 通过本课题,证明了乳岩宁血清与抗癌剂阿霉素合用通过下调HER-2/neu及突变型p53基因表达而起到促进乳腺癌细胞凋亡的作用。从而揭示扶正驱邪中药治疗乳腺癌的疗效机理,为确立中西医结合治疗HER-2/neu(+)乳腺癌的新方法奠定理论基础。本课题研究成果已在临床肿瘤学杂志(2006年7月)上发表及收录在第十届全国中西医结合肿瘤专业学术大会(2006年)的论文集中。
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多种癌基因在人脑胶质瘤中的联合检测及其表达的临床意义
成熟度:-
技术类型:-
应用行业:卫生和社会工作
技术简介
该项目属脑肿瘤领域的研究。由陕西省卫生厅科研基金(No.1995-4)资助完成。该课题采用ABC和Sp免疫组化法,系列检测脑胶质瘤关键调节位点G1-S期致癌基因产物(p53和CyclinD1蛋白),抑癌基因产物(p27蛋白)和细胞周期调控蛋白(pCNA),Tas-plus全自动图像分析仪(德国)半定量研究,并紧密结合临床资料进行综合分析。结果发现,pCNA、CyclinD1和p53蛋白在脑胶质瘤中均有异常高表达,这些蛋白的表达程度与脑胶质瘤的恶性程度呈正相关。而p27蛋白表达程度则与脑胶质瘤的恶性程度呈负相关。联合检测显示,CyclinD1和p27蛋白表达呈显著负相关。CyclinD1、p53蛋白和pCNA表达增高,以及p27蛋白表达减低,提示脑胶质瘤患者预后不良,尤其是pCNA表达提供了反映患者预后的参考指标。因此本研究结果对脑胶质瘤的临床诊治具有实用价值,为人脑胶质瘤的病理分级和预后评估提供多种客观的分子生物学指标,并进一步丰富和完善了脑胶质瘤发生和发展的分子生物学机理。该课题是基础与临床相结合的研究。已在统计源期刊发表相关文章9篇,并多次参加国内学术交流,研究成果被多家综合性医院所应用。该课题所用ABC和Sp免疫组化法均为公认的成熟方法,简便、经济、实用、重复性好,易于临床普及推广应用。
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一种治疗妇科疾病的密丸
成熟度:正在研发
技术类型:发明
应用行业:农、林、牧、渔业
技术简介
技术投资分析:本发明为祖传,是纯中药治剂,主要功能;防癌.超前检测癌基因.消灭早期癌症.抗治晚期.扩散转移癌症.各种癌症手术后防复发,疗效快;治愈率高.愈后不复后,本药无任何副作用.健康人防癌.服药1-3个月.超前检测全身癌基因1-14天.乳腺癌超前检测癌基因1-7个月,晚期扩散转揿的癌症3-7天止痛.20天固定1-2个月萎缩3个月疗程.连用3-4个疗程.各种癌症手术后预防复后8-12个月.本发明为祖传几代人,属于中药治剂.治疗妇女疾病,疗效快;疗程短愈后不复发.无任何毒副作用.在37年的临床中.主治妇女急性乳腺炎12小时痊愈.妇女急性腺增生30天痊愈.妇女慢性肠粘连60天痊愈,妇女盆腔粘连及妇女更年期综合症等40种疾病加药引疗效可靠.妇女超前检测乳腺癌基因.抗治晚期扩散的妇女癌症.妇女各种肿瘤手术后防复发.技术的应用领域前景分析:治疗妇女疾病,本药品治疗快,.妇女各种肿瘤,反复率低.市场广.效益分析:效益良好.厂房条件建议:无备注:无
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肿瘤病人血清erbB2水平检测试剂盒(条)的研发
成熟度:通过中试
技术类型:-
应用行业:制造业
技术简介
肿瘤发生与癌基因过度表达有关,对癌基因表达水平的检测,有助于对肿瘤生物学行为及预后的判断。erbB2 是一个与乳腺癌、胃癌、肺癌等许多肿瘤发生密切相关的癌基因,它的表达水平直接影响到肿瘤病人的化疗效果及五年生存期,针对 erbB2 的人源化抗体 Hercepin 在美国已作为第一个抗肿瘤单抗用于对某些肿瘤的治疗,erbB2水平在国外已作为一个独立指标用于对肿瘤生物学行为的判断。本项目旨在研发具自主知识产权、用于对肿瘤病人血清 erbB2水平检测的诊断试剂盒(条),为临床的肿瘤诊疗服务。
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肿瘤病人血清erbB2水平检测试剂盒(条)研发
成熟度:通过小试
技术类型:-
应用行业:制造业
技术简介
肿瘤发生与癌基因过度表达有关,对癌基因表达水平的检测,有助于对肿瘤生物学行为及预后的判断。erbB2 是一个与乳腺癌、胃癌、肺癌等许多肿瘤发生密切相关的癌基因,它的表达水平直接影响到肿瘤病人的化疗效果及五年生存期,针对erbB2 的人源化抗体 Hercepin 在美国已作为第一个抗肿瘤单抗用于对某些肿瘤的治疗,erbB2水平在国外已作为一个独立指标用于对肿瘤生物学行为的判断。本项目旨在研发具自主知识产权、用于对肿瘤病人血清 erbB2水平检测的诊断试剂盒(条),为临床的肿瘤诊疗服务。本试剂盒技术的应用范围:适用于对所有肿瘤病人血清 erbB2 水平的检测,同时适用于对术后病人肿瘤复发的检测,为临床的肿瘤治疗个体化及准确的预后判断提供依据。本试剂盒技术的优势:本项目所采用的抗体,其特异性和亲和力已达到国际同类产品水平。本试剂盒技术的水平:血清 erbB2 检测盒在国外已有商品化,在国内尚无同类产品。我所具有二十年的抗体研发历史,掌握细胞工程抗体及基因工程抗体的各种制备技术,在各类抗体的研发中,在国内具显著的技术优势,多次获得有关科技成果奖,已有不少抗体获得专利或用于对肿瘤的诊疗实践,在国内具一定影响。
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抑癌基因-细胞同质异能素抗癌药
成熟度:通过小试
技术类型:发明
应用行业:制造业
技术简介
抑癌基因-细胞同质异能素抗癌药(专利号201310246366.2)抑癌基因也称为抗癌基因,是唯一能够抗癌的物质。(物理化学药物抗癌无效,现代药企都企图以化学药物来抗癌,其结果均会以失败而告终。这是癌细胞同位素的特点★)。用可调控生物核反应堆,制造出抑癌基因-细胞同质异能素抗癌药,它们可以是抑癌miRNA、抑癌蛋白质等细胞同质异能素。利用抑癌基因与癌细胞进行混合平衡修复,癌基因激发态量子性、核结合能牢固性才能被彻底清除。抑癌基因-细胞同质异能素抗癌药物研制成功,标志着生物同位素应用世纪的来临。生物治疗是指DC+CIK治疗,第三代生物治疗疗效还没有突破的主要原因是,生物治疗中的体液、免疫细胞抑癌基因丢失(癌基因二维激发态增长)。抑癌基因抗癌药能修复DC+CIK、NK等细胞,切除其中的致癌“干性”物质,能使血液免疫细胞转换成骨髓免疫细胞,抗癌免疫力提高90%。这样的生物免疫学治疗才堪称得上真正的绿色治疗。★癌细胞(放射性)同位素特点,癌细胞核“放射性衰变”的速度不受温度、压力、电磁场等外界条件的影响,也不受细胞所处状态的影响,只和时间有关。
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微小分子RNA-1247-5p作为新型肿瘤治疗分子靶标的用途
成熟度:正在研发
技术类型:发明
应用行业:制造业
技术简介
本发明提供一种小分子miRNA-1247-5p稳定过表达肝癌细胞系的建立方法及其对肝癌细胞株新陈代谢的调控作用,很可能成为预防与治疗肿瘤的标志物。越来越多的证据表明,microRNA可作为一种癌基因或抑癌基因,参与调控多种癌症的发生和发展过程。本发明通过构建慢病毒侵染肿瘤细胞模型的实验证明,miRNA-1247-5p对肿瘤细胞株HepG2增殖、迁移和侵袭等具有明显抑制作用,具有调控细胞周期及新陈代谢的作用,因此miR-1247-5p很可能成为肿瘤预防与治疗的全新靶点;并且通过靶基因预测数据库及双荧光素酶报告系统证实miR-1247-5p发挥细胞调控作用,是通过特异性靶向抑制癌基因无翅型MMTV整合位点家族成员3(WNT3)的表达来实现的。
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微小分子RNA-508-5p作为抗肿瘤标志物的用途
成熟度:正在研发
技术类型:发明
应用行业:制造业
技术简介
本发明提供一种miRNA‑508‑5p对肝癌和胃癌细胞株新陈代谢的调控作用,很可能成为预防与治疗肿瘤的标志物。越来越多的证据表明,microRNA可作为一种癌基因或抑癌基因,参与调控多种癌症的发生和发展过程。本发明通过构建慢病毒侵染肿瘤细胞模型的实验证明,miRNA‑508‑5p对肿瘤细胞株HepG2和SGC7901的增殖、迁移和侵袭等具有明显抑制作用,并且促进其细胞的凋亡,具有调控细胞周期及新陈代谢的作用,因此miR‑508‑5p很可能成为肿瘤预防与治疗的全新靶点;并且通过靶基因删选软件及双荧光素酶报告系统证实miR‑508‑5p发挥细胞调控作用,是通过特异性靶向抑制癌基因S‑期激酶相关蛋白2基因(Skp2)的表达。
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扶正驱邪中药促进乳腺癌细胞调亡及干预癌基因的实验研究
成熟度:-
技术类型:-
应用行业:卫生和社会工作
技术简介
本课题运用细胞培养技术旨在研究扶正驱邪中药与抗癌剂阿霉素结合对c-erbB-2(HER-2/neu)及变异型P53等癌基因表达的调整作用以及对乳腺癌细胞调亡的影响。通过本课题探讨了扶正驱邪中药抗肿瘤的机理,尤其是对癌细胞生长抑制率,集落抑制率,细胞调亡指数,超微形态学变化,HER-2/neu及P53基因表达影响的观察。从本课题经费到位2003年6月起我们开始进行工作,首先查新,调研国内外有关本课题的研究进展、收集资料,检索论文,绘制实验表格,进行预实验,查缺补漏。因本实验初就遭遇“非典”,致使最初工作进行的不顺利,直至2003年12月才将初步工作进行完成。从2004年1月开始正式进行实验:1.细胞凋亡实验;生长抑制率(IR);集落抑制率的测定。具体操作过程(1)人P53(+),HER-2/ neu (+)乳腺癌细胞原代培养:人乳腺癌细胞株,购自北京中国科学研究院细胞库。(2)中药合剂制备:中药“乳岩宁方”药物组成:人参、黄芪、白术、茯苓、半枝莲、莪术、白花蛇舌草、山慈姑、薏苡仁、浙贝母等十四味中药,购于辽宁中医学院附属医院药局。制备方法:①将上述中药先后用10倍水煎煮1h,8倍水煎煮0.5h,收集两次煎液过滤,药渣弃去。②将滤液浓缩,最终浓度为2.7g/ml。③2000r/min离心30min,取上液,用0.22μm孔径的微孔滤膜滤过除菌。④无菌实验阴性后备用。(3)生长抑制率(IR)分组处理:①空白组:无药物处理;②单纯中药组;③阿霉素处理;④中药加阿霉素处理;采用MTT法进行细胞毒性实验,计算细胞生长抑制。计算细胞增长抑制率:相对存活率(%)=(用药组OD值-无细胞空白组OD值)/(不加药细胞对照组OD值-无细胞空白组OD值)×100%,抑制率(%)=1-相对存活率。2.细胞凋亡实验;流式细胞仪检测;细胞调亡指数;P53蛋白检测: ①空白组:无药物处理;②单纯中药组;③阿霉素处理;④中药加阿霉素处理。采用卵白素-生物素—过氧化物酶法(ABC)法,进行免疫细胞化学方法检测p53蛋白。ABC法即卵白素-生物素—酶复合物法,它是目前最敏感的免疫细胞化学染色法之一。此法不仅灵敏性高而且非特异染色少,背景清晰,对比度极佳。p53蛋白染色以细胞核呈清晰棕色为阳性,单纯胞浆着色或胞核、胞浆均无着色为阴性。3.HER-2/nen基因检测. (1)空白组:无药物处理;(2)单纯中药组;(3)阿霉素处理;4)中药加阿霉素处理。采用地高辛标记的寡核苷酸探针及其原位杂交试剂盒,用原位杂交方法检测HER-2/neu基因。制成切片,在光镜下观察结果。计算平均阳性率,无阳性细胞为失表达,阳性细胞<30%为+,阳性细胞30%-70%为++,阳性细胞>70%为+++。以细胞质内棕黄色颗粒为阳性信号。4.进行光镜及电镜等形态学变化:主要进行检测标本的处理,光镜及电镜的照片观察、采集。相差显微镜动态观察,接种于盖玻片上的对照组和各实验组细胞的形态变化。细胞形态和生长改变与药物作用效应的关系一般可大致分为五个等级。5.数据整理,结题,论文写作及交流,统计学处理:方差分析、q检验,用SPSS10.0统计软件进行统计分析,论文发表。主要进行图像分析与统计学处理:经ABC法染色的乳腺癌细胞,置MIAS300全自动图像分析仪40倍显微镜下分别检测HER-2、p53染色积分,每个视野测定100个细胞,共测5个视野,以所测得的平均染色积分作为染色阳性强度。采用SPSS 10.0软件进行方差分析、q检验。各实验组MTT法检测细胞生长抑制率(%)比较本课题结果:1.各组MTT结果比较乳岩宁煎剂、阿霉素、乳岩宁血清对乳腺癌细胞的增殖均有抑制作用,抑制作用随药物浓度增高而有加强趋势,最高抑制率可达40.00%,且剂量组间有差异(P0.05),阿霉素组乳岩宁血清组乳岩宁煎剂组。2.免疫细胞化学检测p53蛋白比较乳腺癌细胞ABC法染色结果为p53呈细胞核着色,用药组细胞染色强度有不同程度变化,伴形态改变。体外自动图像定量分析结果见表1。经方差分析及q检验,用药组(阿霉素+乳岩宁血清组,阿霉素组)癌细胞p53表达与未用药组比较有差异 (P0.05)。乳岩宁血清组单独用药效果与未用药组比较差异无显著性(P0.05)。表1:免疫细胞化学方法检测各实验组p53 结果(x±s)阿霉素 乳岩宁血清 阿霉素+乳岩宁 阴性对照组 空白对照 (OD值) (OD值) 血清(OD值) (OD值) (OD值)高剂量2.823±0.024 2.948±0.089 2.513±0.023中剂量2.924±0.066 2.962±0.124 2.847±0.049低剂量2.972±0.029 2.984±0.010 2.886±0.108未用药3.012±0.057 0注:高剂量为0.5倍血浆峰值浓度,中剂量为0.2倍血浆峰值浓度,低剂量为0.1倍血浆峰值浓度。单位为mg/L。3.原位杂交方法检测HER-2/neu基因比较原位杂交方法检测结果为HER-2/neu呈细胞膜及胞浆着色,用药组细胞染色强度有不同程度变化,伴形态改变。体外自动图像定量分析结果见表2。经方差分析及q检验用药组(阿霉素+乳岩宁血清组,阿霉素组)癌细胞HER-2/neu表达与未用药组比较有显著性差异 (P0.05)。乳岩宁血清组单独用药效果与未用药组差异无显著性(P0.05)。表2 原位杂交方法检测各实验组HER-2/neu基因结果(x±s)阿霉素 乳岩宁血清 阿霉素+乳岩宁 阴性对照组 空白对照(OD值) (OD值) 血清(OD值) (OD值)(OD值)高剂量2.107±0.011 2.128±0.012 2.058±0.012中剂量2.116±0.010 2.130±0.013 2.103±0.013低剂量2.120±0.013 2.136±0.012 2.114±0.017未用药 2.144±0.013 0 0注:高剂量为0.5倍血浆峰值浓度,中剂量为0.2倍血浆峰值浓度,低剂量为0.1倍血浆峰值浓度。单位为mg/L。4.光镜观察发现用药组出现随着药物浓度增高,其凋亡细胞的发生率随之增高,且凋亡细胞的形态结构越发典型。凋亡细胞体积变小、胞浆膜完整但出现发泡现象、胞浆固缩、染色体浓聚成团块状、核碎裂、细胞变形、胞膜有明显突起,部分细胞膜包裹碎裂核形成凋亡小体,呈现典型凋亡现象。空白对照组未见凋亡细胞,细胞呈现典型的恶性肿瘤细胞特征,细胞大小不等、成梭形或不规则型、细胞核与细胞质比例增大、核内染色之增减、核仁增大、可见多个核仁等,且与HER-2/neu及 p53基因抑制呈正相关。相差显微镜、光镜观察发现,凋亡细胞变化特征有两种:一种为间期凋亡特点,细胞染色质固缩、聚集至核边、胞浆浓缩、有空泡形成;另一种为分裂染色体散乱分布于细胞中、细胞膜出泡、进而染色体聚集成团、形成凋亡小体,到后期凋亡小体及残留的凋亡细胞进行次级坏死。 通过本课题,证明了乳岩宁血清与抗癌剂阿霉素合用通过下调HER-2/neu及突变型p53基因表达而起到促进乳腺癌细胞凋亡的作用。从而揭示扶正驱邪中药治疗乳腺癌的疗效机理,为确立中西医结合治疗HER-2/neu(+)乳腺癌的新方法奠定理论基础。本课题研究成果已在临床肿瘤学杂志(2006年7月)上发表及收录在第十届全国中西医结合肿瘤专业学术大会(2006年)的论文集中。
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多种癌基因在人脑胶质瘤中的联合检测及其表达的临床意义
成熟度:-
技术类型:-
应用行业:卫生和社会工作
技术简介
该项目属脑肿瘤领域的研究。由陕西省卫生厅科研基金(No.1995-4)资助完成。该课题采用ABC和Sp免疫组化法,系列检测脑胶质瘤关键调节位点G1-S期致癌基因产物(p53和CyclinD1蛋白),抑癌基因产物(p27蛋白)和细胞周期调控蛋白(pCNA),Tas-plus全自动图像分析仪(德国)半定量研究,并紧密结合临床资料进行综合分析。结果发现,pCNA、CyclinD1和p53蛋白在脑胶质瘤中均有异常高表达,这些蛋白的表达程度与脑胶质瘤的恶性程度呈正相关。而p27蛋白表达程度则与脑胶质瘤的恶性程度呈负相关。联合检测显示,CyclinD1和p27蛋白表达呈显著负相关。CyclinD1、p53蛋白和pCNA表达增高,以及p27蛋白表达减低,提示脑胶质瘤患者预后不良,尤其是pCNA表达提供了反映患者预后的参考指标。因此本研究结果对脑胶质瘤的临床诊治具有实用价值,为人脑胶质瘤的病理分级和预后评估提供多种客观的分子生物学指标,并进一步丰富和完善了脑胶质瘤发生和发展的分子生物学机理。该课题是基础与临床相结合的研究。已在统计源期刊发表相关文章9篇,并多次参加国内学术交流,研究成果被多家综合性医院所应用。该课题所用ABC和Sp免疫组化法均为公认的成熟方法,简便、经济、实用、重复性好,易于临床普及推广应用。
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一种治疗妇科疾病的密丸
成熟度:正在研发
技术类型:发明
应用行业:农、林、牧、渔业
技术简介
技术投资分析:本发明为祖传,是纯中药治剂,主要功能;防癌.超前检测癌基因.消灭早期癌症.抗治晚期.扩散转移癌症.各种癌症手术后防复发,疗效快;治愈率高.愈后不复后,本药无任何副作用.健康人防癌.服药1-3个月.超前检测全身癌基因1-14天.乳腺癌超前检测癌基因1-7个月,晚期扩散转揿的癌症3-7天止痛.20天固定1-2个月萎缩3个月疗程.连用3-4个疗程.各种癌症手术后预防复后8-12个月.本发明为祖传几代人,属于中药治剂.治疗妇女疾病,疗效快;疗程短愈后不复发.无任何毒副作用.在37年的临床中.主治妇女急性乳腺炎12小时痊愈.妇女急性腺增生30天痊愈.妇女慢性肠粘连60天痊愈,妇女盆腔粘连及妇女更年期综合症等40种疾病加药引疗效可靠.妇女超前检测乳腺癌基因.抗治晚期扩散的妇女癌症.妇女各种肿瘤手术后防复发.技术的应用领域前景分析:治疗妇女疾病,本药品治疗快,.妇女各种肿瘤,反复率低.市场广.效益分析:效益良好.厂房条件建议:无备注:无
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肿瘤病人血清erbB2水平检测试剂盒(条)的研发
成熟度:通过中试
技术类型:-
应用行业:制造业
技术简介
肿瘤发生与癌基因过度表达有关,对癌基因表达水平的检测,有助于对肿瘤生物学行为及预后的判断。erbB2 是一个与乳腺癌、胃癌、肺癌等许多肿瘤发生密切相关的癌基因,它的表达水平直接影响到肿瘤病人的化疗效果及五年生存期,针对 erbB2 的人源化抗体 Hercepin 在美国已作为第一个抗肿瘤单抗用于对某些肿瘤的治疗,erbB2水平在国外已作为一个独立指标用于对肿瘤生物学行为的判断。本项目旨在研发具自主知识产权、用于对肿瘤病人血清 erbB2水平检测的诊断试剂盒(条),为临床的肿瘤诊疗服务。
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肿瘤病人血清erbB2水平检测试剂盒(条)研发
成熟度:通过小试
技术类型:-
应用行业:制造业
技术简介
肿瘤发生与癌基因过度表达有关,对癌基因表达水平的检测,有助于对肿瘤生物学行为及预后的判断。erbB2 是一个与乳腺癌、胃癌、肺癌等许多肿瘤发生密切相关的癌基因,它的表达水平直接影响到肿瘤病人的化疗效果及五年生存期,针对erbB2 的人源化抗体 Hercepin 在美国已作为第一个抗肿瘤单抗用于对某些肿瘤的治疗,erbB2水平在国外已作为一个独立指标用于对肿瘤生物学行为的判断。本项目旨在研发具自主知识产权、用于对肿瘤病人血清 erbB2水平检测的诊断试剂盒(条),为临床的肿瘤诊疗服务。本试剂盒技术的应用范围:适用于对所有肿瘤病人血清 erbB2 水平的检测,同时适用于对术后病人肿瘤复发的检测,为临床的肿瘤治疗个体化及准确的预后判断提供依据。本试剂盒技术的优势:本项目所采用的抗体,其特异性和亲和力已达到国际同类产品水平。本试剂盒技术的水平:血清 erbB2 检测盒在国外已有商品化,在国内尚无同类产品。我所具有二十年的抗体研发历史,掌握细胞工程抗体及基因工程抗体的各种制备技术,在各类抗体的研发中,在国内具显著的技术优势,多次获得有关科技成果奖,已有不少抗体获得专利或用于对肿瘤的诊疗实践,在国内具一定影响。
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抑癌基因-细胞同质异能素抗癌药
成熟度:通过小试
技术类型:发明
应用行业:制造业
技术简介
抑癌基因-细胞同质异能素抗癌药(专利号201310246366.2)抑癌基因也称为抗癌基因,是唯一能够抗癌的物质。(物理化学药物抗癌无效,现代药企都企图以化学药物来抗癌,其结果均会以失败而告终。这是癌细胞同位素的特点★)。用可调控生物核反应堆,制造出抑癌基因-细胞同质异能素抗癌药,它们可以是抑癌miRNA、抑癌蛋白质等细胞同质异能素。利用抑癌基因与癌细胞进行混合平衡修复,癌基因激发态量子性、核结合能牢固性才能被彻底清除。抑癌基因-细胞同质异能素抗癌药物研制成功,标志着生物同位素应用世纪的来临。生物治疗是指DC+CIK治疗,第三代生物治疗疗效还没有突破的主要原因是,生物治疗中的体液、免疫细胞抑癌基因丢失(癌基因二维激发态增长)。抑癌基因抗癌药能修复DC+CIK、NK等细胞,切除其中的致癌“干性”物质,能使血液免疫细胞转换成骨髓免疫细胞,抗癌免疫力提高90%。这样的生物免疫学治疗才堪称得上真正的绿色治疗。★癌细胞(放射性)同位素特点,癌细胞核“放射性衰变”的速度不受温度、压力、电磁场等外界条件的影响,也不受细胞所处状态的影响,只和时间有关。
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微小分子RNA-1247-5p作为新型肿瘤治疗分子靶标的用途
成熟度:正在研发
技术类型:发明
应用行业:制造业
技术简介
本发明提供一种小分子miRNA-1247-5p稳定过表达肝癌细胞系的建立方法及其对肝癌细胞株新陈代谢的调控作用,很可能成为预防与治疗肿瘤的标志物。越来越多的证据表明,microRNA可作为一种癌基因或抑癌基因,参与调控多种癌症的发生和发展过程。本发明通过构建慢病毒侵染肿瘤细胞模型的实验证明,miRNA-1247-5p对肿瘤细胞株HepG2增殖、迁移和侵袭等具有明显抑制作用,具有调控细胞周期及新陈代谢的作用,因此miR-1247-5p很可能成为肿瘤预防与治疗的全新靶点;并且通过靶基因预测数据库及双荧光素酶报告系统证实miR-1247-5p发挥细胞调控作用,是通过特异性靶向抑制癌基因无翅型MMTV整合位点家族成员3(WNT3)的表达来实现的。
找到8项技术成果数据。
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微小分子RNA-508-5p作为抗肿瘤标志物的用途
成熟度:正在研发
技术类型:发明
应用行业:制造业
技术简介
本发明提供一种miRNA‑508‑5p对肝癌和胃癌细胞株新陈代谢的调控作用,很可能成为预防与治疗肿瘤的标志物。越来越多的证据表明,microRNA可作为一种癌基因或抑癌基因,参与调控多种癌症的发生和发展过程。本发明通过构建慢病毒侵染肿瘤细胞模型的实验证明,miRNA‑508‑5p对肿瘤细胞株HepG2和SGC7901的增殖、迁移和侵袭等具有明显抑制作用,并且促进其细胞的凋亡,具有调控细胞周期及新陈代谢的作用,因此miR‑508‑5p很可能成为肿瘤预防与治疗的全新靶点;并且通过靶基因删选软件及双荧光素酶报告系统证实miR‑508‑5p发挥细胞调控作用,是通过特异性靶向抑制癌基因S‑期激酶相关蛋白2基因(Skp2)的表达。
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扶正驱邪中药促进乳腺癌细胞调亡及干预癌基因的实验研究
成熟度:-
技术类型:-
应用行业:卫生和社会工作
技术简介
本课题运用细胞培养技术旨在研究扶正驱邪中药与抗癌剂阿霉素结合对c-erbB-2(HER-2/neu)及变异型P53等癌基因表达的调整作用以及对乳腺癌细胞调亡的影响。通过本课题探讨了扶正驱邪中药抗肿瘤的机理,尤其是对癌细胞生长抑制率,集落抑制率,细胞调亡指数,超微形态学变化,HER-2/neu及P53基因表达影响的观察。从本课题经费到位2003年6月起我们开始进行工作,首先查新,调研国内外有关本课题的研究进展、收集资料,检索论文,绘制实验表格,进行预实验,查缺补漏。因本实验初就遭遇“非典”,致使最初工作进行的不顺利,直至2003年12月才将初步工作进行完成。从2004年1月开始正式进行实验:1.细胞凋亡实验;生长抑制率(IR);集落抑制率的测定。具体操作过程(1)人P53(+),HER-2/ neu (+)乳腺癌细胞原代培养:人乳腺癌细胞株,购自北京中国科学研究院细胞库。(2)中药合剂制备:中药“乳岩宁方”药物组成:人参、黄芪、白术、茯苓、半枝莲、莪术、白花蛇舌草、山慈姑、薏苡仁、浙贝母等十四味中药,购于辽宁中医学院附属医院药局。制备方法:①将上述中药先后用10倍水煎煮1h,8倍水煎煮0.5h,收集两次煎液过滤,药渣弃去。②将滤液浓缩,最终浓度为2.7g/ml。③2000r/min离心30min,取上液,用0.22μm孔径的微孔滤膜滤过除菌。④无菌实验阴性后备用。(3)生长抑制率(IR)分组处理:①空白组:无药物处理;②单纯中药组;③阿霉素处理;④中药加阿霉素处理;采用MTT法进行细胞毒性实验,计算细胞生长抑制。计算细胞增长抑制率:相对存活率(%)=(用药组OD值-无细胞空白组OD值)/(不加药细胞对照组OD值-无细胞空白组OD值)×100%,抑制率(%)=1-相对存活率。2.细胞凋亡实验;流式细胞仪检测;细胞调亡指数;P53蛋白检测: ①空白组:无药物处理;②单纯中药组;③阿霉素处理;④中药加阿霉素处理。采用卵白素-生物素—过氧化物酶法(ABC)法,进行免疫细胞化学方法检测p53蛋白。ABC法即卵白素-生物素—酶复合物法,它是目前最敏感的免疫细胞化学染色法之一。此法不仅灵敏性高而且非特异染色少,背景清晰,对比度极佳。p53蛋白染色以细胞核呈清晰棕色为阳性,单纯胞浆着色或胞核、胞浆均无着色为阴性。3.HER-2/nen基因检测. (1)空白组:无药物处理;(2)单纯中药组;(3)阿霉素处理;4)中药加阿霉素处理。采用地高辛标记的寡核苷酸探针及其原位杂交试剂盒,用原位杂交方法检测HER-2/neu基因。制成切片,在光镜下观察结果。计算平均阳性率,无阳性细胞为失表达,阳性细胞<30%为+,阳性细胞30%-70%为++,阳性细胞>70%为+++。以细胞质内棕黄色颗粒为阳性信号。4.进行光镜及电镜等形态学变化:主要进行检测标本的处理,光镜及电镜的照片观察、采集。相差显微镜动态观察,接种于盖玻片上的对照组和各实验组细胞的形态变化。细胞形态和生长改变与药物作用效应的关系一般可大致分为五个等级。5.数据整理,结题,论文写作及交流,统计学处理:方差分析、q检验,用SPSS10.0统计软件进行统计分析,论文发表。主要进行图像分析与统计学处理:经ABC法染色的乳腺癌细胞,置MIAS300全自动图像分析仪40倍显微镜下分别检测HER-2、p53染色积分,每个视野测定100个细胞,共测5个视野,以所测得的平均染色积分作为染色阳性强度。采用SPSS 10.0软件进行方差分析、q检验。各实验组MTT法检测细胞生长抑制率(%)比较本课题结果:1.各组MTT结果比较乳岩宁煎剂、阿霉素、乳岩宁血清对乳腺癌细胞的增殖均有抑制作用,抑制作用随药物浓度增高而有加强趋势,最高抑制率可达40.00%,且剂量组间有差异(P0.05),阿霉素组乳岩宁血清组乳岩宁煎剂组。2.免疫细胞化学检测p53蛋白比较乳腺癌细胞ABC法染色结果为p53呈细胞核着色,用药组细胞染色强度有不同程度变化,伴形态改变。体外自动图像定量分析结果见表1。经方差分析及q检验,用药组(阿霉素+乳岩宁血清组,阿霉素组)癌细胞p53表达与未用药组比较有差异 (P0.05)。乳岩宁血清组单独用药效果与未用药组比较差异无显著性(P0.05)。表1:免疫细胞化学方法检测各实验组p53 结果(x±s)阿霉素 乳岩宁血清 阿霉素+乳岩宁 阴性对照组 空白对照 (OD值) (OD值) 血清(OD值) (OD值) (OD值)高剂量2.823±0.024 2.948±0.089 2.513±0.023中剂量2.924±0.066 2.962±0.124 2.847±0.049低剂量2.972±0.029 2.984±0.010 2.886±0.108未用药3.012±0.057 0注:高剂量为0.5倍血浆峰值浓度,中剂量为0.2倍血浆峰值浓度,低剂量为0.1倍血浆峰值浓度。单位为mg/L。3.原位杂交方法检测HER-2/neu基因比较原位杂交方法检测结果为HER-2/neu呈细胞膜及胞浆着色,用药组细胞染色强度有不同程度变化,伴形态改变。体外自动图像定量分析结果见表2。经方差分析及q检验用药组(阿霉素+乳岩宁血清组,阿霉素组)癌细胞HER-2/neu表达与未用药组比较有显著性差异 (P0.05)。乳岩宁血清组单独用药效果与未用药组差异无显著性(P0.05)。表2 原位杂交方法检测各实验组HER-2/neu基因结果(x±s)阿霉素 乳岩宁血清 阿霉素+乳岩宁 阴性对照组 空白对照(OD值) (OD值) 血清(OD值) (OD值)(OD值)高剂量2.107±0.011 2.128±0.012 2.058±0.012中剂量2.116±0.010 2.130±0.013 2.103±0.013低剂量2.120±0.013 2.136±0.012 2.114±0.017未用药 2.144±0.013 0 0注:高剂量为0.5倍血浆峰值浓度,中剂量为0.2倍血浆峰值浓度,低剂量为0.1倍血浆峰值浓度。单位为mg/L。4.光镜观察发现用药组出现随着药物浓度增高,其凋亡细胞的发生率随之增高,且凋亡细胞的形态结构越发典型。凋亡细胞体积变小、胞浆膜完整但出现发泡现象、胞浆固缩、染色体浓聚成团块状、核碎裂、细胞变形、胞膜有明显突起,部分细胞膜包裹碎裂核形成凋亡小体,呈现典型凋亡现象。空白对照组未见凋亡细胞,细胞呈现典型的恶性肿瘤细胞特征,细胞大小不等、成梭形或不规则型、细胞核与细胞质比例增大、核内染色之增减、核仁增大、可见多个核仁等,且与HER-2/neu及 p53基因抑制呈正相关。相差显微镜、光镜观察发现,凋亡细胞变化特征有两种:一种为间期凋亡特点,细胞染色质固缩、聚集至核边、胞浆浓缩、有空泡形成;另一种为分裂染色体散乱分布于细胞中、细胞膜出泡、进而染色体聚集成团、形成凋亡小体,到后期凋亡小体及残留的凋亡细胞进行次级坏死。 通过本课题,证明了乳岩宁血清与抗癌剂阿霉素合用通过下调HER-2/neu及突变型p53基因表达而起到促进乳腺癌细胞凋亡的作用。从而揭示扶正驱邪中药治疗乳腺癌的疗效机理,为确立中西医结合治疗HER-2/neu(+)乳腺癌的新方法奠定理论基础。本课题研究成果已在临床肿瘤学杂志(2006年7月)上发表及收录在第十届全国中西医结合肿瘤专业学术大会(2006年)的论文集中。
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多种癌基因在人脑胶质瘤中的联合检测及其表达的临床意义
成熟度:-
技术类型:-
应用行业:卫生和社会工作
技术简介
该项目属脑肿瘤领域的研究。由陕西省卫生厅科研基金(No.1995-4)资助完成。该课题采用ABC和Sp免疫组化法,系列检测脑胶质瘤关键调节位点G1-S期致癌基因产物(p53和CyclinD1蛋白),抑癌基因产物(p27蛋白)和细胞周期调控蛋白(pCNA),Tas-plus全自动图像分析仪(德国)半定量研究,并紧密结合临床资料进行综合分析。结果发现,pCNA、CyclinD1和p53蛋白在脑胶质瘤中均有异常高表达,这些蛋白的表达程度与脑胶质瘤的恶性程度呈正相关。而p27蛋白表达程度则与脑胶质瘤的恶性程度呈负相关。联合检测显示,CyclinD1和p27蛋白表达呈显著负相关。CyclinD1、p53蛋白和pCNA表达增高,以及p27蛋白表达减低,提示脑胶质瘤患者预后不良,尤其是pCNA表达提供了反映患者预后的参考指标。因此本研究结果对脑胶质瘤的临床诊治具有实用价值,为人脑胶质瘤的病理分级和预后评估提供多种客观的分子生物学指标,并进一步丰富和完善了脑胶质瘤发生和发展的分子生物学机理。该课题是基础与临床相结合的研究。已在统计源期刊发表相关文章9篇,并多次参加国内学术交流,研究成果被多家综合性医院所应用。该课题所用ABC和Sp免疫组化法均为公认的成熟方法,简便、经济、实用、重复性好,易于临床普及推广应用。
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一种治疗妇科疾病的密丸
成熟度:正在研发
技术类型:发明
应用行业:农、林、牧、渔业
技术简介
技术投资分析:本发明为祖传,是纯中药治剂,主要功能;防癌.超前检测癌基因.消灭早期癌症.抗治晚期.扩散转移癌症.各种癌症手术后防复发,疗效快;治愈率高.愈后不复后,本药无任何副作用.健康人防癌.服药1-3个月.超前检测全身癌基因1-14天.乳腺癌超前检测癌基因1-7个月,晚期扩散转揿的癌症3-7天止痛.20天固定1-2个月萎缩3个月疗程.连用3-4个疗程.各种癌症手术后预防复后8-12个月.本发明为祖传几代人,属于中药治剂.治疗妇女疾病,疗效快;疗程短愈后不复发.无任何毒副作用.在37年的临床中.主治妇女急性乳腺炎12小时痊愈.妇女急性腺增生30天痊愈.妇女慢性肠粘连60天痊愈,妇女盆腔粘连及妇女更年期综合症等40种疾病加药引疗效可靠.妇女超前检测乳腺癌基因.抗治晚期扩散的妇女癌症.妇女各种肿瘤手术后防复发.技术的应用领域前景分析:治疗妇女疾病,本药品治疗快,.妇女各种肿瘤,反复率低.市场广.效益分析:效益良好.厂房条件建议:无备注:无
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肿瘤病人血清erbB2水平检测试剂盒(条)的研发
成熟度:通过中试
技术类型:-
应用行业:制造业
技术简介
肿瘤发生与癌基因过度表达有关,对癌基因表达水平的检测,有助于对肿瘤生物学行为及预后的判断。erbB2 是一个与乳腺癌、胃癌、肺癌等许多肿瘤发生密切相关的癌基因,它的表达水平直接影响到肿瘤病人的化疗效果及五年生存期,针对 erbB2 的人源化抗体 Hercepin 在美国已作为第一个抗肿瘤单抗用于对某些肿瘤的治疗,erbB2水平在国外已作为一个独立指标用于对肿瘤生物学行为的判断。本项目旨在研发具自主知识产权、用于对肿瘤病人血清 erbB2水平检测的诊断试剂盒(条),为临床的肿瘤诊疗服务。
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肿瘤病人血清erbB2水平检测试剂盒(条)研发
成熟度:通过小试
技术类型:-
应用行业:制造业
技术简介
肿瘤发生与癌基因过度表达有关,对癌基因表达水平的检测,有助于对肿瘤生物学行为及预后的判断。erbB2 是一个与乳腺癌、胃癌、肺癌等许多肿瘤发生密切相关的癌基因,它的表达水平直接影响到肿瘤病人的化疗效果及五年生存期,针对erbB2 的人源化抗体 Hercepin 在美国已作为第一个抗肿瘤单抗用于对某些肿瘤的治疗,erbB2水平在国外已作为一个独立指标用于对肿瘤生物学行为的判断。本项目旨在研发具自主知识产权、用于对肿瘤病人血清 erbB2水平检测的诊断试剂盒(条),为临床的肿瘤诊疗服务。本试剂盒技术的应用范围:适用于对所有肿瘤病人血清 erbB2 水平的检测,同时适用于对术后病人肿瘤复发的检测,为临床的肿瘤治疗个体化及准确的预后判断提供依据。本试剂盒技术的优势:本项目所采用的抗体,其特异性和亲和力已达到国际同类产品水平。本试剂盒技术的水平:血清 erbB2 检测盒在国外已有商品化,在国内尚无同类产品。我所具有二十年的抗体研发历史,掌握细胞工程抗体及基因工程抗体的各种制备技术,在各类抗体的研发中,在国内具显著的技术优势,多次获得有关科技成果奖,已有不少抗体获得专利或用于对肿瘤的诊疗实践,在国内具一定影响。
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抑癌基因-细胞同质异能素抗癌药
成熟度:通过小试
技术类型:发明
应用行业:制造业
技术简介
抑癌基因-细胞同质异能素抗癌药(专利号201310246366.2)抑癌基因也称为抗癌基因,是唯一能够抗癌的物质。(物理化学药物抗癌无效,现代药企都企图以化学药物来抗癌,其结果均会以失败而告终。这是癌细胞同位素的特点★)。用可调控生物核反应堆,制造出抑癌基因-细胞同质异能素抗癌药,它们可以是抑癌miRNA、抑癌蛋白质等细胞同质异能素。利用抑癌基因与癌细胞进行混合平衡修复,癌基因激发态量子性、核结合能牢固性才能被彻底清除。抑癌基因-细胞同质异能素抗癌药物研制成功,标志着生物同位素应用世纪的来临。生物治疗是指DC+CIK治疗,第三代生物治疗疗效还没有突破的主要原因是,生物治疗中的体液、免疫细胞抑癌基因丢失(癌基因二维激发态增长)。抑癌基因抗癌药能修复DC+CIK、NK等细胞,切除其中的致癌“干性”物质,能使血液免疫细胞转换成骨髓免疫细胞,抗癌免疫力提高90%。这样的生物免疫学治疗才堪称得上真正的绿色治疗。★癌细胞(放射性)同位素特点,癌细胞核“放射性衰变”的速度不受温度、压力、电磁场等外界条件的影响,也不受细胞所处状态的影响,只和时间有关。
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微小分子RNA-1247-5p作为新型肿瘤治疗分子靶标的用途
成熟度:正在研发
技术类型:发明
应用行业:制造业
技术简介
本发明提供一种小分子miRNA-1247-5p稳定过表达肝癌细胞系的建立方法及其对肝癌细胞株新陈代谢的调控作用,很可能成为预防与治疗肿瘤的标志物。越来越多的证据表明,microRNA可作为一种癌基因或抑癌基因,参与调控多种癌症的发生和发展过程。本发明通过构建慢病毒侵染肿瘤细胞模型的实验证明,miRNA-1247-5p对肿瘤细胞株HepG2增殖、迁移和侵袭等具有明显抑制作用,具有调控细胞周期及新陈代谢的作用,因此miR-1247-5p很可能成为肿瘤预防与治疗的全新靶点;并且通过靶基因预测数据库及双荧光素酶报告系统证实miR-1247-5p发挥细胞调控作用,是通过特异性靶向抑制癌基因无翅型MMTV整合位点家族成员3(WNT3)的表达来实现的。
找到8项技术成果数据。
找技术>-
微小分子RNA-508-5p作为抗肿瘤标志物的用途
成熟度:正在研发
技术类型:发明
应用行业:制造业
技术简介
本发明提供一种miRNA‑508‑5p对肝癌和胃癌细胞株新陈代谢的调控作用,很可能成为预防与治疗肿瘤的标志物。越来越多的证据表明,microRNA可作为一种癌基因或抑癌基因,参与调控多种癌症的发生和发展过程。本发明通过构建慢病毒侵染肿瘤细胞模型的实验证明,miRNA‑508‑5p对肿瘤细胞株HepG2和SGC7901的增殖、迁移和侵袭等具有明显抑制作用,并且促进其细胞的凋亡,具有调控细胞周期及新陈代谢的作用,因此miR‑508‑5p很可能成为肿瘤预防与治疗的全新靶点;并且通过靶基因删选软件及双荧光素酶报告系统证实miR‑508‑5p发挥细胞调控作用,是通过特异性靶向抑制癌基因S‑期激酶相关蛋白2基因(Skp2)的表达。
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扶正驱邪中药促进乳腺癌细胞调亡及干预癌基因的实验研究
成熟度:-
技术类型:-
应用行业:卫生和社会工作
技术简介
本课题运用细胞培养技术旨在研究扶正驱邪中药与抗癌剂阿霉素结合对c-erbB-2(HER-2/neu)及变异型P53等癌基因表达的调整作用以及对乳腺癌细胞调亡的影响。通过本课题探讨了扶正驱邪中药抗肿瘤的机理,尤其是对癌细胞生长抑制率,集落抑制率,细胞调亡指数,超微形态学变化,HER-2/neu及P53基因表达影响的观察。从本课题经费到位2003年6月起我们开始进行工作,首先查新,调研国内外有关本课题的研究进展、收集资料,检索论文,绘制实验表格,进行预实验,查缺补漏。因本实验初就遭遇“非典”,致使最初工作进行的不顺利,直至2003年12月才将初步工作进行完成。从2004年1月开始正式进行实验:1.细胞凋亡实验;生长抑制率(IR);集落抑制率的测定。具体操作过程(1)人P53(+),HER-2/ neu (+)乳腺癌细胞原代培养:人乳腺癌细胞株,购自北京中国科学研究院细胞库。(2)中药合剂制备:中药“乳岩宁方”药物组成:人参、黄芪、白术、茯苓、半枝莲、莪术、白花蛇舌草、山慈姑、薏苡仁、浙贝母等十四味中药,购于辽宁中医学院附属医院药局。制备方法:①将上述中药先后用10倍水煎煮1h,8倍水煎煮0.5h,收集两次煎液过滤,药渣弃去。②将滤液浓缩,最终浓度为2.7g/ml。③2000r/min离心30min,取上液,用0.22μm孔径的微孔滤膜滤过除菌。④无菌实验阴性后备用。(3)生长抑制率(IR)分组处理:①空白组:无药物处理;②单纯中药组;③阿霉素处理;④中药加阿霉素处理;采用MTT法进行细胞毒性实验,计算细胞生长抑制。计算细胞增长抑制率:相对存活率(%)=(用药组OD值-无细胞空白组OD值)/(不加药细胞对照组OD值-无细胞空白组OD值)×100%,抑制率(%)=1-相对存活率。2.细胞凋亡实验;流式细胞仪检测;细胞调亡指数;P53蛋白检测: ①空白组:无药物处理;②单纯中药组;③阿霉素处理;④中药加阿霉素处理。采用卵白素-生物素—过氧化物酶法(ABC)法,进行免疫细胞化学方法检测p53蛋白。ABC法即卵白素-生物素—酶复合物法,它是目前最敏感的免疫细胞化学染色法之一。此法不仅灵敏性高而且非特异染色少,背景清晰,对比度极佳。p53蛋白染色以细胞核呈清晰棕色为阳性,单纯胞浆着色或胞核、胞浆均无着色为阴性。3.HER-2/nen基因检测. (1)空白组:无药物处理;(2)单纯中药组;(3)阿霉素处理;4)中药加阿霉素处理。采用地高辛标记的寡核苷酸探针及其原位杂交试剂盒,用原位杂交方法检测HER-2/neu基因。制成切片,在光镜下观察结果。计算平均阳性率,无阳性细胞为失表达,阳性细胞<30%为+,阳性细胞30%-70%为++,阳性细胞>70%为+++。以细胞质内棕黄色颗粒为阳性信号。4.进行光镜及电镜等形态学变化:主要进行检测标本的处理,光镜及电镜的照片观察、采集。相差显微镜动态观察,接种于盖玻片上的对照组和各实验组细胞的形态变化。细胞形态和生长改变与药物作用效应的关系一般可大致分为五个等级。5.数据整理,结题,论文写作及交流,统计学处理:方差分析、q检验,用SPSS10.0统计软件进行统计分析,论文发表。主要进行图像分析与统计学处理:经ABC法染色的乳腺癌细胞,置MIAS300全自动图像分析仪40倍显微镜下分别检测HER-2、p53染色积分,每个视野测定100个细胞,共测5个视野,以所测得的平均染色积分作为染色阳性强度。采用SPSS 10.0软件进行方差分析、q检验。各实验组MTT法检测细胞生长抑制率(%)比较本课题结果:1.各组MTT结果比较乳岩宁煎剂、阿霉素、乳岩宁血清对乳腺癌细胞的增殖均有抑制作用,抑制作用随药物浓度增高而有加强趋势,最高抑制率可达40.00%,且剂量组间有差异(P0.05),阿霉素组乳岩宁血清组乳岩宁煎剂组。2.免疫细胞化学检测p53蛋白比较乳腺癌细胞ABC法染色结果为p53呈细胞核着色,用药组细胞染色强度有不同程度变化,伴形态改变。体外自动图像定量分析结果见表1。经方差分析及q检验,用药组(阿霉素+乳岩宁血清组,阿霉素组)癌细胞p53表达与未用药组比较有差异 (P0.05)。乳岩宁血清组单独用药效果与未用药组比较差异无显著性(P0.05)。表1:免疫细胞化学方法检测各实验组p53 结果(x±s)阿霉素 乳岩宁血清 阿霉素+乳岩宁 阴性对照组 空白对照 (OD值) (OD值) 血清(OD值) (OD值) (OD值)高剂量2.823±0.024 2.948±0.089 2.513±0.023中剂量2.924±0.066 2.962±0.124 2.847±0.049低剂量2.972±0.029 2.984±0.010 2.886±0.108未用药3.012±0.057 0注:高剂量为0.5倍血浆峰值浓度,中剂量为0.2倍血浆峰值浓度,低剂量为0.1倍血浆峰值浓度。单位为mg/L。3.原位杂交方法检测HER-2/neu基因比较原位杂交方法检测结果为HER-2/neu呈细胞膜及胞浆着色,用药组细胞染色强度有不同程度变化,伴形态改变。体外自动图像定量分析结果见表2。经方差分析及q检验用药组(阿霉素+乳岩宁血清组,阿霉素组)癌细胞HER-2/neu表达与未用药组比较有显著性差异 (P0.05)。乳岩宁血清组单独用药效果与未用药组差异无显著性(P0.05)。表2 原位杂交方法检测各实验组HER-2/neu基因结果(x±s)阿霉素 乳岩宁血清 阿霉素+乳岩宁 阴性对照组 空白对照(OD值) (OD值) 血清(OD值) (OD值)(OD值)高剂量2.107±0.011 2.128±0.012 2.058±0.012中剂量2.116±0.010 2.130±0.013 2.103±0.013低剂量2.120±0.013 2.136±0.012 2.114±0.017未用药 2.144±0.013 0 0注:高剂量为0.5倍血浆峰值浓度,中剂量为0.2倍血浆峰值浓度,低剂量为0.1倍血浆峰值浓度。单位为mg/L。4.光镜观察发现用药组出现随着药物浓度增高,其凋亡细胞的发生率随之增高,且凋亡细胞的形态结构越发典型。凋亡细胞体积变小、胞浆膜完整但出现发泡现象、胞浆固缩、染色体浓聚成团块状、核碎裂、细胞变形、胞膜有明显突起,部分细胞膜包裹碎裂核形成凋亡小体,呈现典型凋亡现象。空白对照组未见凋亡细胞,细胞呈现典型的恶性肿瘤细胞特征,细胞大小不等、成梭形或不规则型、细胞核与细胞质比例增大、核内染色之增减、核仁增大、可见多个核仁等,且与HER-2/neu及 p53基因抑制呈正相关。相差显微镜、光镜观察发现,凋亡细胞变化特征有两种:一种为间期凋亡特点,细胞染色质固缩、聚集至核边、胞浆浓缩、有空泡形成;另一种为分裂染色体散乱分布于细胞中、细胞膜出泡、进而染色体聚集成团、形成凋亡小体,到后期凋亡小体及残留的凋亡细胞进行次级坏死。 通过本课题,证明了乳岩宁血清与抗癌剂阿霉素合用通过下调HER-2/neu及突变型p53基因表达而起到促进乳腺癌细胞凋亡的作用。从而揭示扶正驱邪中药治疗乳腺癌的疗效机理,为确立中西医结合治疗HER-2/neu(+)乳腺癌的新方法奠定理论基础。本课题研究成果已在临床肿瘤学杂志(2006年7月)上发表及收录在第十届全国中西医结合肿瘤专业学术大会(2006年)的论文集中。
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多种癌基因在人脑胶质瘤中的联合检测及其表达的临床意义
成熟度:-
技术类型:-
应用行业:卫生和社会工作
技术简介
该项目属脑肿瘤领域的研究。由陕西省卫生厅科研基金(No.1995-4)资助完成。该课题采用ABC和Sp免疫组化法,系列检测脑胶质瘤关键调节位点G1-S期致癌基因产物(p53和CyclinD1蛋白),抑癌基因产物(p27蛋白)和细胞周期调控蛋白(pCNA),Tas-plus全自动图像分析仪(德国)半定量研究,并紧密结合临床资料进行综合分析。结果发现,pCNA、CyclinD1和p53蛋白在脑胶质瘤中均有异常高表达,这些蛋白的表达程度与脑胶质瘤的恶性程度呈正相关。而p27蛋白表达程度则与脑胶质瘤的恶性程度呈负相关。联合检测显示,CyclinD1和p27蛋白表达呈显著负相关。CyclinD1、p53蛋白和pCNA表达增高,以及p27蛋白表达减低,提示脑胶质瘤患者预后不良,尤其是pCNA表达提供了反映患者预后的参考指标。因此本研究结果对脑胶质瘤的临床诊治具有实用价值,为人脑胶质瘤的病理分级和预后评估提供多种客观的分子生物学指标,并进一步丰富和完善了脑胶质瘤发生和发展的分子生物学机理。该课题是基础与临床相结合的研究。已在统计源期刊发表相关文章9篇,并多次参加国内学术交流,研究成果被多家综合性医院所应用。该课题所用ABC和Sp免疫组化法均为公认的成熟方法,简便、经济、实用、重复性好,易于临床普及推广应用。
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一种治疗妇科疾病的密丸
成熟度:正在研发
技术类型:发明
应用行业:农、林、牧、渔业
技术简介
技术投资分析:本发明为祖传,是纯中药治剂,主要功能;防癌.超前检测癌基因.消灭早期癌症.抗治晚期.扩散转移癌症.各种癌症手术后防复发,疗效快;治愈率高.愈后不复后,本药无任何副作用.健康人防癌.服药1-3个月.超前检测全身癌基因1-14天.乳腺癌超前检测癌基因1-7个月,晚期扩散转揿的癌症3-7天止痛.20天固定1-2个月萎缩3个月疗程.连用3-4个疗程.各种癌症手术后预防复后8-12个月.本发明为祖传几代人,属于中药治剂.治疗妇女疾病,疗效快;疗程短愈后不复发.无任何毒副作用.在37年的临床中.主治妇女急性乳腺炎12小时痊愈.妇女急性腺增生30天痊愈.妇女慢性肠粘连60天痊愈,妇女盆腔粘连及妇女更年期综合症等40种疾病加药引疗效可靠.妇女超前检测乳腺癌基因.抗治晚期扩散的妇女癌症.妇女各种肿瘤手术后防复发.技术的应用领域前景分析:治疗妇女疾病,本药品治疗快,.妇女各种肿瘤,反复率低.市场广.效益分析:效益良好.厂房条件建议:无备注:无
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肿瘤病人血清erbB2水平检测试剂盒(条)的研发
成熟度:通过中试
技术类型:-
应用行业:制造业
技术简介
肿瘤发生与癌基因过度表达有关,对癌基因表达水平的检测,有助于对肿瘤生物学行为及预后的判断。erbB2 是一个与乳腺癌、胃癌、肺癌等许多肿瘤发生密切相关的癌基因,它的表达水平直接影响到肿瘤病人的化疗效果及五年生存期,针对 erbB2 的人源化抗体 Hercepin 在美国已作为第一个抗肿瘤单抗用于对某些肿瘤的治疗,erbB2水平在国外已作为一个独立指标用于对肿瘤生物学行为的判断。本项目旨在研发具自主知识产权、用于对肿瘤病人血清 erbB2水平检测的诊断试剂盒(条),为临床的肿瘤诊疗服务。
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肿瘤病人血清erbB2水平检测试剂盒(条)研发
成熟度:通过小试
技术类型:-
应用行业:制造业
技术简介
肿瘤发生与癌基因过度表达有关,对癌基因表达水平的检测,有助于对肿瘤生物学行为及预后的判断。erbB2 是一个与乳腺癌、胃癌、肺癌等许多肿瘤发生密切相关的癌基因,它的表达水平直接影响到肿瘤病人的化疗效果及五年生存期,针对erbB2 的人源化抗体 Hercepin 在美国已作为第一个抗肿瘤单抗用于对某些肿瘤的治疗,erbB2水平在国外已作为一个独立指标用于对肿瘤生物学行为的判断。本项目旨在研发具自主知识产权、用于对肿瘤病人血清 erbB2水平检测的诊断试剂盒(条),为临床的肿瘤诊疗服务。本试剂盒技术的应用范围:适用于对所有肿瘤病人血清 erbB2 水平的检测,同时适用于对术后病人肿瘤复发的检测,为临床的肿瘤治疗个体化及准确的预后判断提供依据。本试剂盒技术的优势:本项目所采用的抗体,其特异性和亲和力已达到国际同类产品水平。本试剂盒技术的水平:血清 erbB2 检测盒在国外已有商品化,在国内尚无同类产品。我所具有二十年的抗体研发历史,掌握细胞工程抗体及基因工程抗体的各种制备技术,在各类抗体的研发中,在国内具显著的技术优势,多次获得有关科技成果奖,已有不少抗体获得专利或用于对肿瘤的诊疗实践,在国内具一定影响。
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抑癌基因-细胞同质异能素抗癌药
成熟度:通过小试
技术类型:发明
应用行业:制造业
技术简介
抑癌基因-细胞同质异能素抗癌药(专利号201310246366.2)抑癌基因也称为抗癌基因,是唯一能够抗癌的物质。(物理化学药物抗癌无效,现代药企都企图以化学药物来抗癌,其结果均会以失败而告终。这是癌细胞同位素的特点★)。用可调控生物核反应堆,制造出抑癌基因-细胞同质异能素抗癌药,它们可以是抑癌miRNA、抑癌蛋白质等细胞同质异能素。利用抑癌基因与癌细胞进行混合平衡修复,癌基因激发态量子性、核结合能牢固性才能被彻底清除。抑癌基因-细胞同质异能素抗癌药物研制成功,标志着生物同位素应用世纪的来临。生物治疗是指DC+CIK治疗,第三代生物治疗疗效还没有突破的主要原因是,生物治疗中的体液、免疫细胞抑癌基因丢失(癌基因二维激发态增长)。抑癌基因抗癌药能修复DC+CIK、NK等细胞,切除其中的致癌“干性”物质,能使血液免疫细胞转换成骨髓免疫细胞,抗癌免疫力提高90%。这样的生物免疫学治疗才堪称得上真正的绿色治疗。★癌细胞(放射性)同位素特点,癌细胞核“放射性衰变”的速度不受温度、压力、电磁场等外界条件的影响,也不受细胞所处状态的影响,只和时间有关。
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微小分子RNA-1247-5p作为新型肿瘤治疗分子靶标的用途
成熟度:正在研发
技术类型:发明
应用行业:制造业
技术简介
本发明提供一种小分子miRNA-1247-5p稳定过表达肝癌细胞系的建立方法及其对肝癌细胞株新陈代谢的调控作用,很可能成为预防与治疗肿瘤的标志物。越来越多的证据表明,microRNA可作为一种癌基因或抑癌基因,参与调控多种癌症的发生和发展过程。本发明通过构建慢病毒侵染肿瘤细胞模型的实验证明,miRNA-1247-5p对肿瘤细胞株HepG2增殖、迁移和侵袭等具有明显抑制作用,具有调控细胞周期及新陈代谢的作用,因此miR-1247-5p很可能成为肿瘤预防与治疗的全新靶点;并且通过靶基因预测数据库及双荧光素酶报告系统证实miR-1247-5p发挥细胞调控作用,是通过特异性靶向抑制癌基因无翅型MMTV整合位点家族成员3(WNT3)的表达来实现的。
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微小分子RNA-508-5p作为抗肿瘤标志物的用途
成熟度:正在研发
技术类型:发明
应用行业:制造业
技术简介
本发明提供一种miRNA‑508‑5p对肝癌和胃癌细胞株新陈代谢的调控作用,很可能成为预防与治疗肿瘤的标志物。越来越多的证据表明,microRNA可作为一种癌基因或抑癌基因,参与调控多种癌症的发生和发展过程。本发明通过构建慢病毒侵染肿瘤细胞模型的实验证明,miRNA‑508‑5p对肿瘤细胞株HepG2和SGC7901的增殖、迁移和侵袭等具有明显抑制作用,并且促进其细胞的凋亡,具有调控细胞周期及新陈代谢的作用,因此miR‑508‑5p很可能成为肿瘤预防与治疗的全新靶点;并且通过靶基因删选软件及双荧光素酶报告系统证实miR‑508‑5p发挥细胞调控作用,是通过特异性靶向抑制癌基因S‑期激酶相关蛋白2基因(Skp2)的表达。
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扶正驱邪中药促进乳腺癌细胞调亡及干预癌基因的实验研究
成熟度:-
技术类型:-
应用行业:卫生和社会工作
技术简介
本课题运用细胞培养技术旨在研究扶正驱邪中药与抗癌剂阿霉素结合对c-erbB-2(HER-2/neu)及变异型P53等癌基因表达的调整作用以及对乳腺癌细胞调亡的影响。通过本课题探讨了扶正驱邪中药抗肿瘤的机理,尤其是对癌细胞生长抑制率,集落抑制率,细胞调亡指数,超微形态学变化,HER-2/neu及P53基因表达影响的观察。从本课题经费到位2003年6月起我们开始进行工作,首先查新,调研国内外有关本课题的研究进展、收集资料,检索论文,绘制实验表格,进行预实验,查缺补漏。因本实验初就遭遇“非典”,致使最初工作进行的不顺利,直至2003年12月才将初步工作进行完成。从2004年1月开始正式进行实验:1.细胞凋亡实验;生长抑制率(IR);集落抑制率的测定。具体操作过程(1)人P53(+),HER-2/ neu (+)乳腺癌细胞原代培养:人乳腺癌细胞株,购自北京中国科学研究院细胞库。(2)中药合剂制备:中药“乳岩宁方”药物组成:人参、黄芪、白术、茯苓、半枝莲、莪术、白花蛇舌草、山慈姑、薏苡仁、浙贝母等十四味中药,购于辽宁中医学院附属医院药局。制备方法:①将上述中药先后用10倍水煎煮1h,8倍水煎煮0.5h,收集两次煎液过滤,药渣弃去。②将滤液浓缩,最终浓度为2.7g/ml。③2000r/min离心30min,取上液,用0.22μm孔径的微孔滤膜滤过除菌。④无菌实验阴性后备用。(3)生长抑制率(IR)分组处理:①空白组:无药物处理;②单纯中药组;③阿霉素处理;④中药加阿霉素处理;采用MTT法进行细胞毒性实验,计算细胞生长抑制。计算细胞增长抑制率:相对存活率(%)=(用药组OD值-无细胞空白组OD值)/(不加药细胞对照组OD值-无细胞空白组OD值)×100%,抑制率(%)=1-相对存活率。2.细胞凋亡实验;流式细胞仪检测;细胞调亡指数;P53蛋白检测: ①空白组:无药物处理;②单纯中药组;③阿霉素处理;④中药加阿霉素处理。采用卵白素-生物素—过氧化物酶法(ABC)法,进行免疫细胞化学方法检测p53蛋白。ABC法即卵白素-生物素—酶复合物法,它是目前最敏感的免疫细胞化学染色法之一。此法不仅灵敏性高而且非特异染色少,背景清晰,对比度极佳。p53蛋白染色以细胞核呈清晰棕色为阳性,单纯胞浆着色或胞核、胞浆均无着色为阴性。3.HER-2/nen基因检测. (1)空白组:无药物处理;(2)单纯中药组;(3)阿霉素处理;4)中药加阿霉素处理。采用地高辛标记的寡核苷酸探针及其原位杂交试剂盒,用原位杂交方法检测HER-2/neu基因。制成切片,在光镜下观察结果。计算平均阳性率,无阳性细胞为失表达,阳性细胞<30%为+,阳性细胞30%-70%为++,阳性细胞>70%为+++。以细胞质内棕黄色颗粒为阳性信号。4.进行光镜及电镜等形态学变化:主要进行检测标本的处理,光镜及电镜的照片观察、采集。相差显微镜动态观察,接种于盖玻片上的对照组和各实验组细胞的形态变化。细胞形态和生长改变与药物作用效应的关系一般可大致分为五个等级。5.数据整理,结题,论文写作及交流,统计学处理:方差分析、q检验,用SPSS10.0统计软件进行统计分析,论文发表。主要进行图像分析与统计学处理:经ABC法染色的乳腺癌细胞,置MIAS300全自动图像分析仪40倍显微镜下分别检测HER-2、p53染色积分,每个视野测定100个细胞,共测5个视野,以所测得的平均染色积分作为染色阳性强度。采用SPSS 10.0软件进行方差分析、q检验。各实验组MTT法检测细胞生长抑制率(%)比较本课题结果:1.各组MTT结果比较乳岩宁煎剂、阿霉素、乳岩宁血清对乳腺癌细胞的增殖均有抑制作用,抑制作用随药物浓度增高而有加强趋势,最高抑制率可达40.00%,且剂量组间有差异(P0.05),阿霉素组乳岩宁血清组乳岩宁煎剂组。2.免疫细胞化学检测p53蛋白比较乳腺癌细胞ABC法染色结果为p53呈细胞核着色,用药组细胞染色强度有不同程度变化,伴形态改变。体外自动图像定量分析结果见表1。经方差分析及q检验,用药组(阿霉素+乳岩宁血清组,阿霉素组)癌细胞p53表达与未用药组比较有差异 (P0.05)。乳岩宁血清组单独用药效果与未用药组比较差异无显著性(P0.05)。表1:免疫细胞化学方法检测各实验组p53 结果(x±s)阿霉素 乳岩宁血清 阿霉素+乳岩宁 阴性对照组 空白对照 (OD值) (OD值) 血清(OD值) (OD值) (OD值)高剂量2.823±0.024 2.948±0.089 2.513±0.023中剂量2.924±0.066 2.962±0.124 2.847±0.049低剂量2.972±0.029 2.984±0.010 2.886±0.108未用药3.012±0.057 0注:高剂量为0.5倍血浆峰值浓度,中剂量为0.2倍血浆峰值浓度,低剂量为0.1倍血浆峰值浓度。单位为mg/L。3.原位杂交方法检测HER-2/neu基因比较原位杂交方法检测结果为HER-2/neu呈细胞膜及胞浆着色,用药组细胞染色强度有不同程度变化,伴形态改变。体外自动图像定量分析结果见表2。经方差分析及q检验用药组(阿霉素+乳岩宁血清组,阿霉素组)癌细胞HER-2/neu表达与未用药组比较有显著性差异 (P0.05)。乳岩宁血清组单独用药效果与未用药组差异无显著性(P0.05)。表2 原位杂交方法检测各实验组HER-2/neu基因结果(x±s)阿霉素 乳岩宁血清 阿霉素+乳岩宁 阴性对照组 空白对照(OD值) (OD值) 血清(OD值) (OD值)(OD值)高剂量2.107±0.011 2.128±0.012 2.058±0.012中剂量2.116±0.010 2.130±0.013 2.103±0.013低剂量2.120±0.013 2.136±0.012 2.114±0.017未用药 2.144±0.013 0 0注:高剂量为0.5倍血浆峰值浓度,中剂量为0.2倍血浆峰值浓度,低剂量为0.1倍血浆峰值浓度。单位为mg/L。4.光镜观察发现用药组出现随着药物浓度增高,其凋亡细胞的发生率随之增高,且凋亡细胞的形态结构越发典型。凋亡细胞体积变小、胞浆膜完整但出现发泡现象、胞浆固缩、染色体浓聚成团块状、核碎裂、细胞变形、胞膜有明显突起,部分细胞膜包裹碎裂核形成凋亡小体,呈现典型凋亡现象。空白对照组未见凋亡细胞,细胞呈现典型的恶性肿瘤细胞特征,细胞大小不等、成梭形或不规则型、细胞核与细胞质比例增大、核内染色之增减、核仁增大、可见多个核仁等,且与HER-2/neu及 p53基因抑制呈正相关。相差显微镜、光镜观察发现,凋亡细胞变化特征有两种:一种为间期凋亡特点,细胞染色质固缩、聚集至核边、胞浆浓缩、有空泡形成;另一种为分裂染色体散乱分布于细胞中、细胞膜出泡、进而染色体聚集成团、形成凋亡小体,到后期凋亡小体及残留的凋亡细胞进行次级坏死。 通过本课题,证明了乳岩宁血清与抗癌剂阿霉素合用通过下调HER-2/neu及突变型p53基因表达而起到促进乳腺癌细胞凋亡的作用。从而揭示扶正驱邪中药治疗乳腺癌的疗效机理,为确立中西医结合治疗HER-2/neu(+)乳腺癌的新方法奠定理论基础。本课题研究成果已在临床肿瘤学杂志(2006年7月)上发表及收录在第十届全国中西医结合肿瘤专业学术大会(2006年)的论文集中。
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多种癌基因在人脑胶质瘤中的联合检测及其表达的临床意义
成熟度:-
技术类型:-
应用行业:卫生和社会工作
技术简介
该项目属脑肿瘤领域的研究。由陕西省卫生厅科研基金(No.1995-4)资助完成。该课题采用ABC和Sp免疫组化法,系列检测脑胶质瘤关键调节位点G1-S期致癌基因产物(p53和CyclinD1蛋白),抑癌基因产物(p27蛋白)和细胞周期调控蛋白(pCNA),Tas-plus全自动图像分析仪(德国)半定量研究,并紧密结合临床资料进行综合分析。结果发现,pCNA、CyclinD1和p53蛋白在脑胶质瘤中均有异常高表达,这些蛋白的表达程度与脑胶质瘤的恶性程度呈正相关。而p27蛋白表达程度则与脑胶质瘤的恶性程度呈负相关。联合检测显示,CyclinD1和p27蛋白表达呈显著负相关。CyclinD1、p53蛋白和pCNA表达增高,以及p27蛋白表达减低,提示脑胶质瘤患者预后不良,尤其是pCNA表达提供了反映患者预后的参考指标。因此本研究结果对脑胶质瘤的临床诊治具有实用价值,为人脑胶质瘤的病理分级和预后评估提供多种客观的分子生物学指标,并进一步丰富和完善了脑胶质瘤发生和发展的分子生物学机理。该课题是基础与临床相结合的研究。已在统计源期刊发表相关文章9篇,并多次参加国内学术交流,研究成果被多家综合性医院所应用。该课题所用ABC和Sp免疫组化法均为公认的成熟方法,简便、经济、实用、重复性好,易于临床普及推广应用。
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一种治疗妇科疾病的密丸
成熟度:正在研发
技术类型:发明
应用行业:农、林、牧、渔业
技术简介
技术投资分析:本发明为祖传,是纯中药治剂,主要功能;防癌.超前检测癌基因.消灭早期癌症.抗治晚期.扩散转移癌症.各种癌症手术后防复发,疗效快;治愈率高.愈后不复后,本药无任何副作用.健康人防癌.服药1-3个月.超前检测全身癌基因1-14天.乳腺癌超前检测癌基因1-7个月,晚期扩散转揿的癌症3-7天止痛.20天固定1-2个月萎缩3个月疗程.连用3-4个疗程.各种癌症手术后预防复后8-12个月.本发明为祖传几代人,属于中药治剂.治疗妇女疾病,疗效快;疗程短愈后不复发.无任何毒副作用.在37年的临床中.主治妇女急性乳腺炎12小时痊愈.妇女急性腺增生30天痊愈.妇女慢性肠粘连60天痊愈,妇女盆腔粘连及妇女更年期综合症等40种疾病加药引疗效可靠.妇女超前检测乳腺癌基因.抗治晚期扩散的妇女癌症.妇女各种肿瘤手术后防复发.技术的应用领域前景分析:治疗妇女疾病,本药品治疗快,.妇女各种肿瘤,反复率低.市场广.效益分析:效益良好.厂房条件建议:无备注:无
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肿瘤病人血清erbB2水平检测试剂盒(条)的研发
成熟度:通过中试
技术类型:-
应用行业:制造业
技术简介
肿瘤发生与癌基因过度表达有关,对癌基因表达水平的检测,有助于对肿瘤生物学行为及预后的判断。erbB2 是一个与乳腺癌、胃癌、肺癌等许多肿瘤发生密切相关的癌基因,它的表达水平直接影响到肿瘤病人的化疗效果及五年生存期,针对 erbB2 的人源化抗体 Hercepin 在美国已作为第一个抗肿瘤单抗用于对某些肿瘤的治疗,erbB2水平在国外已作为一个独立指标用于对肿瘤生物学行为的判断。本项目旨在研发具自主知识产权、用于对肿瘤病人血清 erbB2水平检测的诊断试剂盒(条),为临床的肿瘤诊疗服务。
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肿瘤病人血清erbB2水平检测试剂盒(条)研发
成熟度:通过小试
技术类型:-
应用行业:制造业
技术简介
肿瘤发生与癌基因过度表达有关,对癌基因表达水平的检测,有助于对肿瘤生物学行为及预后的判断。erbB2 是一个与乳腺癌、胃癌、肺癌等许多肿瘤发生密切相关的癌基因,它的表达水平直接影响到肿瘤病人的化疗效果及五年生存期,针对erbB2 的人源化抗体 Hercepin 在美国已作为第一个抗肿瘤单抗用于对某些肿瘤的治疗,erbB2水平在国外已作为一个独立指标用于对肿瘤生物学行为的判断。本项目旨在研发具自主知识产权、用于对肿瘤病人血清 erbB2水平检测的诊断试剂盒(条),为临床的肿瘤诊疗服务。本试剂盒技术的应用范围:适用于对所有肿瘤病人血清 erbB2 水平的检测,同时适用于对术后病人肿瘤复发的检测,为临床的肿瘤治疗个体化及准确的预后判断提供依据。本试剂盒技术的优势:本项目所采用的抗体,其特异性和亲和力已达到国际同类产品水平。本试剂盒技术的水平:血清 erbB2 检测盒在国外已有商品化,在国内尚无同类产品。我所具有二十年的抗体研发历史,掌握细胞工程抗体及基因工程抗体的各种制备技术,在各类抗体的研发中,在国内具显著的技术优势,多次获得有关科技成果奖,已有不少抗体获得专利或用于对肿瘤的诊疗实践,在国内具一定影响。
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抑癌基因-细胞同质异能素抗癌药
成熟度:通过小试
技术类型:发明
应用行业:制造业
技术简介
抑癌基因-细胞同质异能素抗癌药(专利号201310246366.2)抑癌基因也称为抗癌基因,是唯一能够抗癌的物质。(物理化学药物抗癌无效,现代药企都企图以化学药物来抗癌,其结果均会以失败而告终。这是癌细胞同位素的特点★)。用可调控生物核反应堆,制造出抑癌基因-细胞同质异能素抗癌药,它们可以是抑癌miRNA、抑癌蛋白质等细胞同质异能素。利用抑癌基因与癌细胞进行混合平衡修复,癌基因激发态量子性、核结合能牢固性才能被彻底清除。抑癌基因-细胞同质异能素抗癌药物研制成功,标志着生物同位素应用世纪的来临。生物治疗是指DC+CIK治疗,第三代生物治疗疗效还没有突破的主要原因是,生物治疗中的体液、免疫细胞抑癌基因丢失(癌基因二维激发态增长)。抑癌基因抗癌药能修复DC+CIK、NK等细胞,切除其中的致癌“干性”物质,能使血液免疫细胞转换成骨髓免疫细胞,抗癌免疫力提高90%。这样的生物免疫学治疗才堪称得上真正的绿色治疗。★癌细胞(放射性)同位素特点,癌细胞核“放射性衰变”的速度不受温度、压力、电磁场等外界条件的影响,也不受细胞所处状态的影响,只和时间有关。
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微小分子RNA-1247-5p作为新型肿瘤治疗分子靶标的用途
成熟度:正在研发
技术类型:发明
应用行业:制造业
技术简介
本发明提供一种小分子miRNA-1247-5p稳定过表达肝癌细胞系的建立方法及其对肝癌细胞株新陈代谢的调控作用,很可能成为预防与治疗肿瘤的标志物。越来越多的证据表明,microRNA可作为一种癌基因或抑癌基因,参与调控多种癌症的发生和发展过程。本发明通过构建慢病毒侵染肿瘤细胞模型的实验证明,miRNA-1247-5p对肿瘤细胞株HepG2增殖、迁移和侵袭等具有明显抑制作用,具有调控细胞周期及新陈代谢的作用,因此miR-1247-5p很可能成为肿瘤预防与治疗的全新靶点;并且通过靶基因预测数据库及双荧光素酶报告系统证实miR-1247-5p发挥细胞调控作用,是通过特异性靶向抑制癌基因无翅型MMTV整合位点家族成员3(WNT3)的表达来实现的。
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微小分子RNA-508-5p作为抗肿瘤标志物的用途
成熟度:正在研发
技术类型:发明
应用行业:制造业
技术简介
本发明提供一种miRNA‑508‑5p对肝癌和胃癌细胞株新陈代谢的调控作用,很可能成为预防与治疗肿瘤的标志物。越来越多的证据表明,microRNA可作为一种癌基因或抑癌基因,参与调控多种癌症的发生和发展过程。本发明通过构建慢病毒侵染肿瘤细胞模型的实验证明,miRNA‑508‑5p对肿瘤细胞株HepG2和SGC7901的增殖、迁移和侵袭等具有明显抑制作用,并且促进其细胞的凋亡,具有调控细胞周期及新陈代谢的作用,因此miR‑508‑5p很可能成为肿瘤预防与治疗的全新靶点;并且通过靶基因删选软件及双荧光素酶报告系统证实miR‑508‑5p发挥细胞调控作用,是通过特异性靶向抑制癌基因S‑期激酶相关蛋白2基因(Skp2)的表达。
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扶正驱邪中药促进乳腺癌细胞调亡及干预癌基因的实验研究
成熟度:-
技术类型:-
应用行业:卫生和社会工作
技术简介
本课题运用细胞培养技术旨在研究扶正驱邪中药与抗癌剂阿霉素结合对c-erbB-2(HER-2/neu)及变异型P53等癌基因表达的调整作用以及对乳腺癌细胞调亡的影响。通过本课题探讨了扶正驱邪中药抗肿瘤的机理,尤其是对癌细胞生长抑制率,集落抑制率,细胞调亡指数,超微形态学变化,HER-2/neu及P53基因表达影响的观察。从本课题经费到位2003年6月起我们开始进行工作,首先查新,调研国内外有关本课题的研究进展、收集资料,检索论文,绘制实验表格,进行预实验,查缺补漏。因本实验初就遭遇“非典”,致使最初工作进行的不顺利,直至2003年12月才将初步工作进行完成。从2004年1月开始正式进行实验:1.细胞凋亡实验;生长抑制率(IR);集落抑制率的测定。具体操作过程(1)人P53(+),HER-2/ neu (+)乳腺癌细胞原代培养:人乳腺癌细胞株,购自北京中国科学研究院细胞库。(2)中药合剂制备:中药“乳岩宁方”药物组成:人参、黄芪、白术、茯苓、半枝莲、莪术、白花蛇舌草、山慈姑、薏苡仁、浙贝母等十四味中药,购于辽宁中医学院附属医院药局。制备方法:①将上述中药先后用10倍水煎煮1h,8倍水煎煮0.5h,收集两次煎液过滤,药渣弃去。②将滤液浓缩,最终浓度为2.7g/ml。③2000r/min离心30min,取上液,用0.22μm孔径的微孔滤膜滤过除菌。④无菌实验阴性后备用。(3)生长抑制率(IR)分组处理:①空白组:无药物处理;②单纯中药组;③阿霉素处理;④中药加阿霉素处理;采用MTT法进行细胞毒性实验,计算细胞生长抑制。计算细胞增长抑制率:相对存活率(%)=(用药组OD值-无细胞空白组OD值)/(不加药细胞对照组OD值-无细胞空白组OD值)×100%,抑制率(%)=1-相对存活率。2.细胞凋亡实验;流式细胞仪检测;细胞调亡指数;P53蛋白检测: ①空白组:无药物处理;②单纯中药组;③阿霉素处理;④中药加阿霉素处理。采用卵白素-生物素—过氧化物酶法(ABC)法,进行免疫细胞化学方法检测p53蛋白。ABC法即卵白素-生物素—酶复合物法,它是目前最敏感的免疫细胞化学染色法之一。此法不仅灵敏性高而且非特异染色少,背景清晰,对比度极佳。p53蛋白染色以细胞核呈清晰棕色为阳性,单纯胞浆着色或胞核、胞浆均无着色为阴性。3.HER-2/nen基因检测. (1)空白组:无药物处理;(2)单纯中药组;(3)阿霉素处理;4)中药加阿霉素处理。采用地高辛标记的寡核苷酸探针及其原位杂交试剂盒,用原位杂交方法检测HER-2/neu基因。制成切片,在光镜下观察结果。计算平均阳性率,无阳性细胞为失表达,阳性细胞<30%为+,阳性细胞30%-70%为++,阳性细胞>70%为+++。以细胞质内棕黄色颗粒为阳性信号。4.进行光镜及电镜等形态学变化:主要进行检测标本的处理,光镜及电镜的照片观察、采集。相差显微镜动态观察,接种于盖玻片上的对照组和各实验组细胞的形态变化。细胞形态和生长改变与药物作用效应的关系一般可大致分为五个等级。5.数据整理,结题,论文写作及交流,统计学处理:方差分析、q检验,用SPSS10.0统计软件进行统计分析,论文发表。主要进行图像分析与统计学处理:经ABC法染色的乳腺癌细胞,置MIAS300全自动图像分析仪40倍显微镜下分别检测HER-2、p53染色积分,每个视野测定100个细胞,共测5个视野,以所测得的平均染色积分作为染色阳性强度。采用SPSS 10.0软件进行方差分析、q检验。各实验组MTT法检测细胞生长抑制率(%)比较本课题结果:1.各组MTT结果比较乳岩宁煎剂、阿霉素、乳岩宁血清对乳腺癌细胞的增殖均有抑制作用,抑制作用随药物浓度增高而有加强趋势,最高抑制率可达40.00%,且剂量组间有差异(P0.05),阿霉素组乳岩宁血清组乳岩宁煎剂组。2.免疫细胞化学检测p53蛋白比较乳腺癌细胞ABC法染色结果为p53呈细胞核着色,用药组细胞染色强度有不同程度变化,伴形态改变。体外自动图像定量分析结果见表1。经方差分析及q检验,用药组(阿霉素+乳岩宁血清组,阿霉素组)癌细胞p53表达与未用药组比较有差异 (P0.05)。乳岩宁血清组单独用药效果与未用药组比较差异无显著性(P0.05)。表1:免疫细胞化学方法检测各实验组p53 结果(x±s)阿霉素 乳岩宁血清 阿霉素+乳岩宁 阴性对照组 空白对照 (OD值) (OD值) 血清(OD值) (OD值) (OD值)高剂量2.823±0.024 2.948±0.089 2.513±0.023中剂量2.924±0.066 2.962±0.124 2.847±0.049低剂量2.972±0.029 2.984±0.010 2.886±0.108未用药3.012±0.057 0注:高剂量为0.5倍血浆峰值浓度,中剂量为0.2倍血浆峰值浓度,低剂量为0.1倍血浆峰值浓度。单位为mg/L。3.原位杂交方法检测HER-2/neu基因比较原位杂交方法检测结果为HER-2/neu呈细胞膜及胞浆着色,用药组细胞染色强度有不同程度变化,伴形态改变。体外自动图像定量分析结果见表2。经方差分析及q检验用药组(阿霉素+乳岩宁血清组,阿霉素组)癌细胞HER-2/neu表达与未用药组比较有显著性差异 (P0.05)。乳岩宁血清组单独用药效果与未用药组差异无显著性(P0.05)。表2 原位杂交方法检测各实验组HER-2/neu基因结果(x±s)阿霉素 乳岩宁血清 阿霉素+乳岩宁 阴性对照组 空白对照(OD值) (OD值) 血清(OD值) (OD值)(OD值)高剂量2.107±0.011 2.128±0.012 2.058±0.012中剂量2.116±0.010 2.130±0.013 2.103±0.013低剂量2.120±0.013 2.136±0.012 2.114±0.017未用药 2.144±0.013 0 0注:高剂量为0.5倍血浆峰值浓度,中剂量为0.2倍血浆峰值浓度,低剂量为0.1倍血浆峰值浓度。单位为mg/L。4.光镜观察发现用药组出现随着药物浓度增高,其凋亡细胞的发生率随之增高,且凋亡细胞的形态结构越发典型。凋亡细胞体积变小、胞浆膜完整但出现发泡现象、胞浆固缩、染色体浓聚成团块状、核碎裂、细胞变形、胞膜有明显突起,部分细胞膜包裹碎裂核形成凋亡小体,呈现典型凋亡现象。空白对照组未见凋亡细胞,细胞呈现典型的恶性肿瘤细胞特征,细胞大小不等、成梭形或不规则型、细胞核与细胞质比例增大、核内染色之增减、核仁增大、可见多个核仁等,且与HER-2/neu及 p53基因抑制呈正相关。相差显微镜、光镜观察发现,凋亡细胞变化特征有两种:一种为间期凋亡特点,细胞染色质固缩、聚集至核边、胞浆浓缩、有空泡形成;另一种为分裂染色体散乱分布于细胞中、细胞膜出泡、进而染色体聚集成团、形成凋亡小体,到后期凋亡小体及残留的凋亡细胞进行次级坏死。 通过本课题,证明了乳岩宁血清与抗癌剂阿霉素合用通过下调HER-2/neu及突变型p53基因表达而起到促进乳腺癌细胞凋亡的作用。从而揭示扶正驱邪中药治疗乳腺癌的疗效机理,为确立中西医结合治疗HER-2/neu(+)乳腺癌的新方法奠定理论基础。本课题研究成果已在临床肿瘤学杂志(2006年7月)上发表及收录在第十届全国中西医结合肿瘤专业学术大会(2006年)的论文集中。
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多种癌基因在人脑胶质瘤中的联合检测及其表达的临床意义
成熟度:-
技术类型:-
应用行业:卫生和社会工作
技术简介
该项目属脑肿瘤领域的研究。由陕西省卫生厅科研基金(No.1995-4)资助完成。该课题采用ABC和Sp免疫组化法,系列检测脑胶质瘤关键调节位点G1-S期致癌基因产物(p53和CyclinD1蛋白),抑癌基因产物(p27蛋白)和细胞周期调控蛋白(pCNA),Tas-plus全自动图像分析仪(德国)半定量研究,并紧密结合临床资料进行综合分析。结果发现,pCNA、CyclinD1和p53蛋白在脑胶质瘤中均有异常高表达,这些蛋白的表达程度与脑胶质瘤的恶性程度呈正相关。而p27蛋白表达程度则与脑胶质瘤的恶性程度呈负相关。联合检测显示,CyclinD1和p27蛋白表达呈显著负相关。CyclinD1、p53蛋白和pCNA表达增高,以及p27蛋白表达减低,提示脑胶质瘤患者预后不良,尤其是pCNA表达提供了反映患者预后的参考指标。因此本研究结果对脑胶质瘤的临床诊治具有实用价值,为人脑胶质瘤的病理分级和预后评估提供多种客观的分子生物学指标,并进一步丰富和完善了脑胶质瘤发生和发展的分子生物学机理。该课题是基础与临床相结合的研究。已在统计源期刊发表相关文章9篇,并多次参加国内学术交流,研究成果被多家综合性医院所应用。该课题所用ABC和Sp免疫组化法均为公认的成熟方法,简便、经济、实用、重复性好,易于临床普及推广应用。
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一种治疗妇科疾病的密丸
成熟度:正在研发
技术类型:发明
应用行业:农、林、牧、渔业
技术简介
技术投资分析:本发明为祖传,是纯中药治剂,主要功能;防癌.超前检测癌基因.消灭早期癌症.抗治晚期.扩散转移癌症.各种癌症手术后防复发,疗效快;治愈率高.愈后不复后,本药无任何副作用.健康人防癌.服药1-3个月.超前检测全身癌基因1-14天.乳腺癌超前检测癌基因1-7个月,晚期扩散转揿的癌症3-7天止痛.20天固定1-2个月萎缩3个月疗程.连用3-4个疗程.各种癌症手术后预防复后8-12个月.本发明为祖传几代人,属于中药治剂.治疗妇女疾病,疗效快;疗程短愈后不复发.无任何毒副作用.在37年的临床中.主治妇女急性乳腺炎12小时痊愈.妇女急性腺增生30天痊愈.妇女慢性肠粘连60天痊愈,妇女盆腔粘连及妇女更年期综合症等40种疾病加药引疗效可靠.妇女超前检测乳腺癌基因.抗治晚期扩散的妇女癌症.妇女各种肿瘤手术后防复发.技术的应用领域前景分析:治疗妇女疾病,本药品治疗快,.妇女各种肿瘤,反复率低.市场广.效益分析:效益良好.厂房条件建议:无备注:无
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肿瘤病人血清erbB2水平检测试剂盒(条)的研发
成熟度:通过中试
技术类型:-
应用行业:制造业
技术简介
肿瘤发生与癌基因过度表达有关,对癌基因表达水平的检测,有助于对肿瘤生物学行为及预后的判断。erbB2 是一个与乳腺癌、胃癌、肺癌等许多肿瘤发生密切相关的癌基因,它的表达水平直接影响到肿瘤病人的化疗效果及五年生存期,针对 erbB2 的人源化抗体 Hercepin 在美国已作为第一个抗肿瘤单抗用于对某些肿瘤的治疗,erbB2水平在国外已作为一个独立指标用于对肿瘤生物学行为的判断。本项目旨在研发具自主知识产权、用于对肿瘤病人血清 erbB2水平检测的诊断试剂盒(条),为临床的肿瘤诊疗服务。
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肿瘤病人血清erbB2水平检测试剂盒(条)研发
成熟度:通过小试
技术类型:-
应用行业:制造业
技术简介
肿瘤发生与癌基因过度表达有关,对癌基因表达水平的检测,有助于对肿瘤生物学行为及预后的判断。erbB2 是一个与乳腺癌、胃癌、肺癌等许多肿瘤发生密切相关的癌基因,它的表达水平直接影响到肿瘤病人的化疗效果及五年生存期,针对erbB2 的人源化抗体 Hercepin 在美国已作为第一个抗肿瘤单抗用于对某些肿瘤的治疗,erbB2水平在国外已作为一个独立指标用于对肿瘤生物学行为的判断。本项目旨在研发具自主知识产权、用于对肿瘤病人血清 erbB2水平检测的诊断试剂盒(条),为临床的肿瘤诊疗服务。本试剂盒技术的应用范围:适用于对所有肿瘤病人血清 erbB2 水平的检测,同时适用于对术后病人肿瘤复发的检测,为临床的肿瘤治疗个体化及准确的预后判断提供依据。本试剂盒技术的优势:本项目所采用的抗体,其特异性和亲和力已达到国际同类产品水平。本试剂盒技术的水平:血清 erbB2 检测盒在国外已有商品化,在国内尚无同类产品。我所具有二十年的抗体研发历史,掌握细胞工程抗体及基因工程抗体的各种制备技术,在各类抗体的研发中,在国内具显著的技术优势,多次获得有关科技成果奖,已有不少抗体获得专利或用于对肿瘤的诊疗实践,在国内具一定影响。
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抑癌基因-细胞同质异能素抗癌药
成熟度:通过小试
技术类型:发明
应用行业:制造业
技术简介
抑癌基因-细胞同质异能素抗癌药(专利号201310246366.2)抑癌基因也称为抗癌基因,是唯一能够抗癌的物质。(物理化学药物抗癌无效,现代药企都企图以化学药物来抗癌,其结果均会以失败而告终。这是癌细胞同位素的特点★)。用可调控生物核反应堆,制造出抑癌基因-细胞同质异能素抗癌药,它们可以是抑癌miRNA、抑癌蛋白质等细胞同质异能素。利用抑癌基因与癌细胞进行混合平衡修复,癌基因激发态量子性、核结合能牢固性才能被彻底清除。抑癌基因-细胞同质异能素抗癌药物研制成功,标志着生物同位素应用世纪的来临。生物治疗是指DC+CIK治疗,第三代生物治疗疗效还没有突破的主要原因是,生物治疗中的体液、免疫细胞抑癌基因丢失(癌基因二维激发态增长)。抑癌基因抗癌药能修复DC+CIK、NK等细胞,切除其中的致癌“干性”物质,能使血液免疫细胞转换成骨髓免疫细胞,抗癌免疫力提高90%。这样的生物免疫学治疗才堪称得上真正的绿色治疗。★癌细胞(放射性)同位素特点,癌细胞核“放射性衰变”的速度不受温度、压力、电磁场等外界条件的影响,也不受细胞所处状态的影响,只和时间有关。
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微小分子RNA-1247-5p作为新型肿瘤治疗分子靶标的用途
成熟度:正在研发
技术类型:发明
应用行业:制造业
技术简介
本发明提供一种小分子miRNA-1247-5p稳定过表达肝癌细胞系的建立方法及其对肝癌细胞株新陈代谢的调控作用,很可能成为预防与治疗肿瘤的标志物。越来越多的证据表明,microRNA可作为一种癌基因或抑癌基因,参与调控多种癌症的发生和发展过程。本发明通过构建慢病毒侵染肿瘤细胞模型的实验证明,miRNA-1247-5p对肿瘤细胞株HepG2增殖、迁移和侵袭等具有明显抑制作用,具有调控细胞周期及新陈代谢的作用,因此miR-1247-5p很可能成为肿瘤预防与治疗的全新靶点;并且通过靶基因预测数据库及双荧光素酶报告系统证实miR-1247-5p发挥细胞调控作用,是通过特异性靶向抑制癌基因无翅型MMTV整合位点家族成员3(WNT3)的表达来实现的。
找到8项技术成果数据。
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微小分子RNA-508-5p作为抗肿瘤标志物的用途
成熟度:正在研发
技术类型:发明
应用行业:制造业
技术简介
本发明提供一种miRNA‑508‑5p对肝癌和胃癌细胞株新陈代谢的调控作用,很可能成为预防与治疗肿瘤的标志物。越来越多的证据表明,microRNA可作为一种癌基因或抑癌基因,参与调控多种癌症的发生和发展过程。本发明通过构建慢病毒侵染肿瘤细胞模型的实验证明,miRNA‑508‑5p对肿瘤细胞株HepG2和SGC7901的增殖、迁移和侵袭等具有明显抑制作用,并且促进其细胞的凋亡,具有调控细胞周期及新陈代谢的作用,因此miR‑508‑5p很可能成为肿瘤预防与治疗的全新靶点;并且通过靶基因删选软件及双荧光素酶报告系统证实miR‑508‑5p发挥细胞调控作用,是通过特异性靶向抑制癌基因S‑期激酶相关蛋白2基因(Skp2)的表达。
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扶正驱邪中药促进乳腺癌细胞调亡及干预癌基因的实验研究
成熟度:-
技术类型:-
应用行业:卫生和社会工作
技术简介
本课题运用细胞培养技术旨在研究扶正驱邪中药与抗癌剂阿霉素结合对c-erbB-2(HER-2/neu)及变异型P53等癌基因表达的调整作用以及对乳腺癌细胞调亡的影响。通过本课题探讨了扶正驱邪中药抗肿瘤的机理,尤其是对癌细胞生长抑制率,集落抑制率,细胞调亡指数,超微形态学变化,HER-2/neu及P53基因表达影响的观察。从本课题经费到位2003年6月起我们开始进行工作,首先查新,调研国内外有关本课题的研究进展、收集资料,检索论文,绘制实验表格,进行预实验,查缺补漏。因本实验初就遭遇“非典”,致使最初工作进行的不顺利,直至2003年12月才将初步工作进行完成。从2004年1月开始正式进行实验:1.细胞凋亡实验;生长抑制率(IR);集落抑制率的测定。具体操作过程(1)人P53(+),HER-2/ neu (+)乳腺癌细胞原代培养:人乳腺癌细胞株,购自北京中国科学研究院细胞库。(2)中药合剂制备:中药“乳岩宁方”药物组成:人参、黄芪、白术、茯苓、半枝莲、莪术、白花蛇舌草、山慈姑、薏苡仁、浙贝母等十四味中药,购于辽宁中医学院附属医院药局。制备方法:①将上述中药先后用10倍水煎煮1h,8倍水煎煮0.5h,收集两次煎液过滤,药渣弃去。②将滤液浓缩,最终浓度为2.7g/ml。③2000r/min离心30min,取上液,用0.22μm孔径的微孔滤膜滤过除菌。④无菌实验阴性后备用。(3)生长抑制率(IR)分组处理:①空白组:无药物处理;②单纯中药组;③阿霉素处理;④中药加阿霉素处理;采用MTT法进行细胞毒性实验,计算细胞生长抑制。计算细胞增长抑制率:相对存活率(%)=(用药组OD值-无细胞空白组OD值)/(不加药细胞对照组OD值-无细胞空白组OD值)×100%,抑制率(%)=1-相对存活率。2.细胞凋亡实验;流式细胞仪检测;细胞调亡指数;P53蛋白检测: ①空白组:无药物处理;②单纯中药组;③阿霉素处理;④中药加阿霉素处理。采用卵白素-生物素—过氧化物酶法(ABC)法,进行免疫细胞化学方法检测p53蛋白。ABC法即卵白素-生物素—酶复合物法,它是目前最敏感的免疫细胞化学染色法之一。此法不仅灵敏性高而且非特异染色少,背景清晰,对比度极佳。p53蛋白染色以细胞核呈清晰棕色为阳性,单纯胞浆着色或胞核、胞浆均无着色为阴性。3.HER-2/nen基因检测. (1)空白组:无药物处理;(2)单纯中药组;(3)阿霉素处理;4)中药加阿霉素处理。采用地高辛标记的寡核苷酸探针及其原位杂交试剂盒,用原位杂交方法检测HER-2/neu基因。制成切片,在光镜下观察结果。计算平均阳性率,无阳性细胞为失表达,阳性细胞<30%为+,阳性细胞30%-70%为++,阳性细胞>70%为+++。以细胞质内棕黄色颗粒为阳性信号。4.进行光镜及电镜等形态学变化:主要进行检测标本的处理,光镜及电镜的照片观察、采集。相差显微镜动态观察,接种于盖玻片上的对照组和各实验组细胞的形态变化。细胞形态和生长改变与药物作用效应的关系一般可大致分为五个等级。5.数据整理,结题,论文写作及交流,统计学处理:方差分析、q检验,用SPSS10.0统计软件进行统计分析,论文发表。主要进行图像分析与统计学处理:经ABC法染色的乳腺癌细胞,置MIAS300全自动图像分析仪40倍显微镜下分别检测HER-2、p53染色积分,每个视野测定100个细胞,共测5个视野,以所测得的平均染色积分作为染色阳性强度。采用SPSS 10.0软件进行方差分析、q检验。各实验组MTT法检测细胞生长抑制率(%)比较本课题结果:1.各组MTT结果比较乳岩宁煎剂、阿霉素、乳岩宁血清对乳腺癌细胞的增殖均有抑制作用,抑制作用随药物浓度增高而有加强趋势,最高抑制率可达40.00%,且剂量组间有差异(P0.05),阿霉素组乳岩宁血清组乳岩宁煎剂组。2.免疫细胞化学检测p53蛋白比较乳腺癌细胞ABC法染色结果为p53呈细胞核着色,用药组细胞染色强度有不同程度变化,伴形态改变。体外自动图像定量分析结果见表1。经方差分析及q检验,用药组(阿霉素+乳岩宁血清组,阿霉素组)癌细胞p53表达与未用药组比较有差异 (P0.05)。乳岩宁血清组单独用药效果与未用药组比较差异无显著性(P0.05)。表1:免疫细胞化学方法检测各实验组p53 结果(x±s)阿霉素 乳岩宁血清 阿霉素+乳岩宁 阴性对照组 空白对照 (OD值) (OD值) 血清(OD值) (OD值) (OD值)高剂量2.823±0.024 2.948±0.089 2.513±0.023中剂量2.924±0.066 2.962±0.124 2.847±0.049低剂量2.972±0.029 2.984±0.010 2.886±0.108未用药3.012±0.057 0注:高剂量为0.5倍血浆峰值浓度,中剂量为0.2倍血浆峰值浓度,低剂量为0.1倍血浆峰值浓度。单位为mg/L。3.原位杂交方法检测HER-2/neu基因比较原位杂交方法检测结果为HER-2/neu呈细胞膜及胞浆着色,用药组细胞染色强度有不同程度变化,伴形态改变。体外自动图像定量分析结果见表2。经方差分析及q检验用药组(阿霉素+乳岩宁血清组,阿霉素组)癌细胞HER-2/neu表达与未用药组比较有显著性差异 (P0.05)。乳岩宁血清组单独用药效果与未用药组差异无显著性(P0.05)。表2 原位杂交方法检测各实验组HER-2/neu基因结果(x±s)阿霉素 乳岩宁血清 阿霉素+乳岩宁 阴性对照组 空白对照(OD值) (OD值) 血清(OD值) (OD值)(OD值)高剂量2.107±0.011 2.128±0.012 2.058±0.012中剂量2.116±0.010 2.130±0.013 2.103±0.013低剂量2.120±0.013 2.136±0.012 2.114±0.017未用药 2.144±0.013 0 0注:高剂量为0.5倍血浆峰值浓度,中剂量为0.2倍血浆峰值浓度,低剂量为0.1倍血浆峰值浓度。单位为mg/L。4.光镜观察发现用药组出现随着药物浓度增高,其凋亡细胞的发生率随之增高,且凋亡细胞的形态结构越发典型。凋亡细胞体积变小、胞浆膜完整但出现发泡现象、胞浆固缩、染色体浓聚成团块状、核碎裂、细胞变形、胞膜有明显突起,部分细胞膜包裹碎裂核形成凋亡小体,呈现典型凋亡现象。空白对照组未见凋亡细胞,细胞呈现典型的恶性肿瘤细胞特征,细胞大小不等、成梭形或不规则型、细胞核与细胞质比例增大、核内染色之增减、核仁增大、可见多个核仁等,且与HER-2/neu及 p53基因抑制呈正相关。相差显微镜、光镜观察发现,凋亡细胞变化特征有两种:一种为间期凋亡特点,细胞染色质固缩、聚集至核边、胞浆浓缩、有空泡形成;另一种为分裂染色体散乱分布于细胞中、细胞膜出泡、进而染色体聚集成团、形成凋亡小体,到后期凋亡小体及残留的凋亡细胞进行次级坏死。 通过本课题,证明了乳岩宁血清与抗癌剂阿霉素合用通过下调HER-2/neu及突变型p53基因表达而起到促进乳腺癌细胞凋亡的作用。从而揭示扶正驱邪中药治疗乳腺癌的疗效机理,为确立中西医结合治疗HER-2/neu(+)乳腺癌的新方法奠定理论基础。本课题研究成果已在临床肿瘤学杂志(2006年7月)上发表及收录在第十届全国中西医结合肿瘤专业学术大会(2006年)的论文集中。
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多种癌基因在人脑胶质瘤中的联合检测及其表达的临床意义
成熟度:-
技术类型:-
应用行业:卫生和社会工作
技术简介
该项目属脑肿瘤领域的研究。由陕西省卫生厅科研基金(No.1995-4)资助完成。该课题采用ABC和Sp免疫组化法,系列检测脑胶质瘤关键调节位点G1-S期致癌基因产物(p53和CyclinD1蛋白),抑癌基因产物(p27蛋白)和细胞周期调控蛋白(pCNA),Tas-plus全自动图像分析仪(德国)半定量研究,并紧密结合临床资料进行综合分析。结果发现,pCNA、CyclinD1和p53蛋白在脑胶质瘤中均有异常高表达,这些蛋白的表达程度与脑胶质瘤的恶性程度呈正相关。而p27蛋白表达程度则与脑胶质瘤的恶性程度呈负相关。联合检测显示,CyclinD1和p27蛋白表达呈显著负相关。CyclinD1、p53蛋白和pCNA表达增高,以及p27蛋白表达减低,提示脑胶质瘤患者预后不良,尤其是pCNA表达提供了反映患者预后的参考指标。因此本研究结果对脑胶质瘤的临床诊治具有实用价值,为人脑胶质瘤的病理分级和预后评估提供多种客观的分子生物学指标,并进一步丰富和完善了脑胶质瘤发生和发展的分子生物学机理。该课题是基础与临床相结合的研究。已在统计源期刊发表相关文章9篇,并多次参加国内学术交流,研究成果被多家综合性医院所应用。该课题所用ABC和Sp免疫组化法均为公认的成熟方法,简便、经济、实用、重复性好,易于临床普及推广应用。
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一种治疗妇科疾病的密丸
成熟度:正在研发
技术类型:发明
应用行业:农、林、牧、渔业
技术简介
技术投资分析:本发明为祖传,是纯中药治剂,主要功能;防癌.超前检测癌基因.消灭早期癌症.抗治晚期.扩散转移癌症.各种癌症手术后防复发,疗效快;治愈率高.愈后不复后,本药无任何副作用.健康人防癌.服药1-3个月.超前检测全身癌基因1-14天.乳腺癌超前检测癌基因1-7个月,晚期扩散转揿的癌症3-7天止痛.20天固定1-2个月萎缩3个月疗程.连用3-4个疗程.各种癌症手术后预防复后8-12个月.本发明为祖传几代人,属于中药治剂.治疗妇女疾病,疗效快;疗程短愈后不复发.无任何毒副作用.在37年的临床中.主治妇女急性乳腺炎12小时痊愈.妇女急性腺增生30天痊愈.妇女慢性肠粘连60天痊愈,妇女盆腔粘连及妇女更年期综合症等40种疾病加药引疗效可靠.妇女超前检测乳腺癌基因.抗治晚期扩散的妇女癌症.妇女各种肿瘤手术后防复发.技术的应用领域前景分析:治疗妇女疾病,本药品治疗快,.妇女各种肿瘤,反复率低.市场广.效益分析:效益良好.厂房条件建议:无备注:无
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肿瘤病人血清erbB2水平检测试剂盒(条)的研发
成熟度:通过中试
技术类型:-
应用行业:制造业
技术简介
肿瘤发生与癌基因过度表达有关,对癌基因表达水平的检测,有助于对肿瘤生物学行为及预后的判断。erbB2 是一个与乳腺癌、胃癌、肺癌等许多肿瘤发生密切相关的癌基因,它的表达水平直接影响到肿瘤病人的化疗效果及五年生存期,针对 erbB2 的人源化抗体 Hercepin 在美国已作为第一个抗肿瘤单抗用于对某些肿瘤的治疗,erbB2水平在国外已作为一个独立指标用于对肿瘤生物学行为的判断。本项目旨在研发具自主知识产权、用于对肿瘤病人血清 erbB2水平检测的诊断试剂盒(条),为临床的肿瘤诊疗服务。
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肿瘤病人血清erbB2水平检测试剂盒(条)研发
成熟度:通过小试
技术类型:-
应用行业:制造业
技术简介
肿瘤发生与癌基因过度表达有关,对癌基因表达水平的检测,有助于对肿瘤生物学行为及预后的判断。erbB2 是一个与乳腺癌、胃癌、肺癌等许多肿瘤发生密切相关的癌基因,它的表达水平直接影响到肿瘤病人的化疗效果及五年生存期,针对erbB2 的人源化抗体 Hercepin 在美国已作为第一个抗肿瘤单抗用于对某些肿瘤的治疗,erbB2水平在国外已作为一个独立指标用于对肿瘤生物学行为的判断。本项目旨在研发具自主知识产权、用于对肿瘤病人血清 erbB2水平检测的诊断试剂盒(条),为临床的肿瘤诊疗服务。本试剂盒技术的应用范围:适用于对所有肿瘤病人血清 erbB2 水平的检测,同时适用于对术后病人肿瘤复发的检测,为临床的肿瘤治疗个体化及准确的预后判断提供依据。本试剂盒技术的优势:本项目所采用的抗体,其特异性和亲和力已达到国际同类产品水平。本试剂盒技术的水平:血清 erbB2 检测盒在国外已有商品化,在国内尚无同类产品。我所具有二十年的抗体研发历史,掌握细胞工程抗体及基因工程抗体的各种制备技术,在各类抗体的研发中,在国内具显著的技术优势,多次获得有关科技成果奖,已有不少抗体获得专利或用于对肿瘤的诊疗实践,在国内具一定影响。
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抑癌基因-细胞同质异能素抗癌药
成熟度:通过小试
技术类型:发明
应用行业:制造业
技术简介
抑癌基因-细胞同质异能素抗癌药(专利号201310246366.2)抑癌基因也称为抗癌基因,是唯一能够抗癌的物质。(物理化学药物抗癌无效,现代药企都企图以化学药物来抗癌,其结果均会以失败而告终。这是癌细胞同位素的特点★)。用可调控生物核反应堆,制造出抑癌基因-细胞同质异能素抗癌药,它们可以是抑癌miRNA、抑癌蛋白质等细胞同质异能素。利用抑癌基因与癌细胞进行混合平衡修复,癌基因激发态量子性、核结合能牢固性才能被彻底清除。抑癌基因-细胞同质异能素抗癌药物研制成功,标志着生物同位素应用世纪的来临。生物治疗是指DC+CIK治疗,第三代生物治疗疗效还没有突破的主要原因是,生物治疗中的体液、免疫细胞抑癌基因丢失(癌基因二维激发态增长)。抑癌基因抗癌药能修复DC+CIK、NK等细胞,切除其中的致癌“干性”物质,能使血液免疫细胞转换成骨髓免疫细胞,抗癌免疫力提高90%。这样的生物免疫学治疗才堪称得上真正的绿色治疗。★癌细胞(放射性)同位素特点,癌细胞核“放射性衰变”的速度不受温度、压力、电磁场等外界条件的影响,也不受细胞所处状态的影响,只和时间有关。
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微小分子RNA-1247-5p作为新型肿瘤治疗分子靶标的用途
成熟度:正在研发
技术类型:发明
应用行业:制造业
技术简介
本发明提供一种小分子miRNA-1247-5p稳定过表达肝癌细胞系的建立方法及其对肝癌细胞株新陈代谢的调控作用,很可能成为预防与治疗肿瘤的标志物。越来越多的证据表明,microRNA可作为一种癌基因或抑癌基因,参与调控多种癌症的发生和发展过程。本发明通过构建慢病毒侵染肿瘤细胞模型的实验证明,miRNA-1247-5p对肿瘤细胞株HepG2增殖、迁移和侵袭等具有明显抑制作用,具有调控细胞周期及新陈代谢的作用,因此miR-1247-5p很可能成为肿瘤预防与治疗的全新靶点;并且通过靶基因预测数据库及双荧光素酶报告系统证实miR-1247-5p发挥细胞调控作用,是通过特异性靶向抑制癌基因无翅型MMTV整合位点家族成员3(WNT3)的表达来实现的。
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微小分子RNA-508-5p作为抗肿瘤标志物的用途
成熟度:正在研发
技术类型:发明
应用行业:制造业
技术简介
本发明提供一种miRNA‑508‑5p对肝癌和胃癌细胞株新陈代谢的调控作用,很可能成为预防与治疗肿瘤的标志物。越来越多的证据表明,microRNA可作为一种癌基因或抑癌基因,参与调控多种癌症的发生和发展过程。本发明通过构建慢病毒侵染肿瘤细胞模型的实验证明,miRNA‑508‑5p对肿瘤细胞株HepG2和SGC7901的增殖、迁移和侵袭等具有明显抑制作用,并且促进其细胞的凋亡,具有调控细胞周期及新陈代谢的作用,因此miR‑508‑5p很可能成为肿瘤预防与治疗的全新靶点;并且通过靶基因删选软件及双荧光素酶报告系统证实miR‑508‑5p发挥细胞调控作用,是通过特异性靶向抑制癌基因S‑期激酶相关蛋白2基因(Skp2)的表达。
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扶正驱邪中药促进乳腺癌细胞调亡及干预癌基因的实验研究
成熟度:-
技术类型:-
应用行业:卫生和社会工作
技术简介
本课题运用细胞培养技术旨在研究扶正驱邪中药与抗癌剂阿霉素结合对c-erbB-2(HER-2/neu)及变异型P53等癌基因表达的调整作用以及对乳腺癌细胞调亡的影响。通过本课题探讨了扶正驱邪中药抗肿瘤的机理,尤其是对癌细胞生长抑制率,集落抑制率,细胞调亡指数,超微形态学变化,HER-2/neu及P53基因表达影响的观察。从本课题经费到位2003年6月起我们开始进行工作,首先查新,调研国内外有关本课题的研究进展、收集资料,检索论文,绘制实验表格,进行预实验,查缺补漏。因本实验初就遭遇“非典”,致使最初工作进行的不顺利,直至2003年12月才将初步工作进行完成。从2004年1月开始正式进行实验:1.细胞凋亡实验;生长抑制率(IR);集落抑制率的测定。具体操作过程(1)人P53(+),HER-2/ neu (+)乳腺癌细胞原代培养:人乳腺癌细胞株,购自北京中国科学研究院细胞库。(2)中药合剂制备:中药“乳岩宁方”药物组成:人参、黄芪、白术、茯苓、半枝莲、莪术、白花蛇舌草、山慈姑、薏苡仁、浙贝母等十四味中药,购于辽宁中医学院附属医院药局。制备方法:①将上述中药先后用10倍水煎煮1h,8倍水煎煮0.5h,收集两次煎液过滤,药渣弃去。②将滤液浓缩,最终浓度为2.7g/ml。③2000r/min离心30min,取上液,用0.22μm孔径的微孔滤膜滤过除菌。④无菌实验阴性后备用。(3)生长抑制率(IR)分组处理:①空白组:无药物处理;②单纯中药组;③阿霉素处理;④中药加阿霉素处理;采用MTT法进行细胞毒性实验,计算细胞生长抑制。计算细胞增长抑制率:相对存活率(%)=(用药组OD值-无细胞空白组OD值)/(不加药细胞对照组OD值-无细胞空白组OD值)×100%,抑制率(%)=1-相对存活率。2.细胞凋亡实验;流式细胞仪检测;细胞调亡指数;P53蛋白检测: ①空白组:无药物处理;②单纯中药组;③阿霉素处理;④中药加阿霉素处理。采用卵白素-生物素—过氧化物酶法(ABC)法,进行免疫细胞化学方法检测p53蛋白。ABC法即卵白素-生物素—酶复合物法,它是目前最敏感的免疫细胞化学染色法之一。此法不仅灵敏性高而且非特异染色少,背景清晰,对比度极佳。p53蛋白染色以细胞核呈清晰棕色为阳性,单纯胞浆着色或胞核、胞浆均无着色为阴性。3.HER-2/nen基因检测. (1)空白组:无药物处理;(2)单纯中药组;(3)阿霉素处理;4)中药加阿霉素处理。采用地高辛标记的寡核苷酸探针及其原位杂交试剂盒,用原位杂交方法检测HER-2/neu基因。制成切片,在光镜下观察结果。计算平均阳性率,无阳性细胞为失表达,阳性细胞<30%为+,阳性细胞30%-70%为++,阳性细胞>70%为+++。以细胞质内棕黄色颗粒为阳性信号。4.进行光镜及电镜等形态学变化:主要进行检测标本的处理,光镜及电镜的照片观察、采集。相差显微镜动态观察,接种于盖玻片上的对照组和各实验组细胞的形态变化。细胞形态和生长改变与药物作用效应的关系一般可大致分为五个等级。5.数据整理,结题,论文写作及交流,统计学处理:方差分析、q检验,用SPSS10.0统计软件进行统计分析,论文发表。主要进行图像分析与统计学处理:经ABC法染色的乳腺癌细胞,置MIAS300全自动图像分析仪40倍显微镜下分别检测HER-2、p53染色积分,每个视野测定100个细胞,共测5个视野,以所测得的平均染色积分作为染色阳性强度。采用SPSS 10.0软件进行方差分析、q检验。各实验组MTT法检测细胞生长抑制率(%)比较本课题结果:1.各组MTT结果比较乳岩宁煎剂、阿霉素、乳岩宁血清对乳腺癌细胞的增殖均有抑制作用,抑制作用随药物浓度增高而有加强趋势,最高抑制率可达40.00%,且剂量组间有差异(P0.05),阿霉素组乳岩宁血清组乳岩宁煎剂组。2.免疫细胞化学检测p53蛋白比较乳腺癌细胞ABC法染色结果为p53呈细胞核着色,用药组细胞染色强度有不同程度变化,伴形态改变。体外自动图像定量分析结果见表1。经方差分析及q检验,用药组(阿霉素+乳岩宁血清组,阿霉素组)癌细胞p53表达与未用药组比较有差异 (P0.05)。乳岩宁血清组单独用药效果与未用药组比较差异无显著性(P0.05)。表1:免疫细胞化学方法检测各实验组p53 结果(x±s)阿霉素 乳岩宁血清 阿霉素+乳岩宁 阴性对照组 空白对照 (OD值) (OD值) 血清(OD值) (OD值) (OD值)高剂量2.823±0.024 2.948±0.089 2.513±0.023中剂量2.924±0.066 2.962±0.124 2.847±0.049低剂量2.972±0.029 2.984±0.010 2.886±0.108未用药3.012±0.057 0注:高剂量为0.5倍血浆峰值浓度,中剂量为0.2倍血浆峰值浓度,低剂量为0.1倍血浆峰值浓度。单位为mg/L。3.原位杂交方法检测HER-2/neu基因比较原位杂交方法检测结果为HER-2/neu呈细胞膜及胞浆着色,用药组细胞染色强度有不同程度变化,伴形态改变。体外自动图像定量分析结果见表2。经方差分析及q检验用药组(阿霉素+乳岩宁血清组,阿霉素组)癌细胞HER-2/neu表达与未用药组比较有显著性差异 (P0.05)。乳岩宁血清组单独用药效果与未用药组差异无显著性(P0.05)。表2 原位杂交方法检测各实验组HER-2/neu基因结果(x±s)阿霉素 乳岩宁血清 阿霉素+乳岩宁 阴性对照组 空白对照(OD值) (OD值) 血清(OD值) (OD值)(OD值)高剂量2.107±0.011 2.128±0.012 2.058±0.012中剂量2.116±0.010 2.130±0.013 2.103±0.013低剂量2.120±0.013 2.136±0.012 2.114±0.017未用药 2.144±0.013 0 0注:高剂量为0.5倍血浆峰值浓度,中剂量为0.2倍血浆峰值浓度,低剂量为0.1倍血浆峰值浓度。单位为mg/L。4.光镜观察发现用药组出现随着药物浓度增高,其凋亡细胞的发生率随之增高,且凋亡细胞的形态结构越发典型。凋亡细胞体积变小、胞浆膜完整但出现发泡现象、胞浆固缩、染色体浓聚成团块状、核碎裂、细胞变形、胞膜有明显突起,部分细胞膜包裹碎裂核形成凋亡小体,呈现典型凋亡现象。空白对照组未见凋亡细胞,细胞呈现典型的恶性肿瘤细胞特征,细胞大小不等、成梭形或不规则型、细胞核与细胞质比例增大、核内染色之增减、核仁增大、可见多个核仁等,且与HER-2/neu及 p53基因抑制呈正相关。相差显微镜、光镜观察发现,凋亡细胞变化特征有两种:一种为间期凋亡特点,细胞染色质固缩、聚集至核边、胞浆浓缩、有空泡形成;另一种为分裂染色体散乱分布于细胞中、细胞膜出泡、进而染色体聚集成团、形成凋亡小体,到后期凋亡小体及残留的凋亡细胞进行次级坏死。 通过本课题,证明了乳岩宁血清与抗癌剂阿霉素合用通过下调HER-2/neu及突变型p53基因表达而起到促进乳腺癌细胞凋亡的作用。从而揭示扶正驱邪中药治疗乳腺癌的疗效机理,为确立中西医结合治疗HER-2/neu(+)乳腺癌的新方法奠定理论基础。本课题研究成果已在临床肿瘤学杂志(2006年7月)上发表及收录在第十届全国中西医结合肿瘤专业学术大会(2006年)的论文集中。
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多种癌基因在人脑胶质瘤中的联合检测及其表达的临床意义
成熟度:-
技术类型:-
应用行业:卫生和社会工作
技术简介
该项目属脑肿瘤领域的研究。由陕西省卫生厅科研基金(No.1995-4)资助完成。该课题采用ABC和Sp免疫组化法,系列检测脑胶质瘤关键调节位点G1-S期致癌基因产物(p53和CyclinD1蛋白),抑癌基因产物(p27蛋白)和细胞周期调控蛋白(pCNA),Tas-plus全自动图像分析仪(德国)半定量研究,并紧密结合临床资料进行综合分析。结果发现,pCNA、CyclinD1和p53蛋白在脑胶质瘤中均有异常高表达,这些蛋白的表达程度与脑胶质瘤的恶性程度呈正相关。而p27蛋白表达程度则与脑胶质瘤的恶性程度呈负相关。联合检测显示,CyclinD1和p27蛋白表达呈显著负相关。CyclinD1、p53蛋白和pCNA表达增高,以及p27蛋白表达减低,提示脑胶质瘤患者预后不良,尤其是pCNA表达提供了反映患者预后的参考指标。因此本研究结果对脑胶质瘤的临床诊治具有实用价值,为人脑胶质瘤的病理分级和预后评估提供多种客观的分子生物学指标,并进一步丰富和完善了脑胶质瘤发生和发展的分子生物学机理。该课题是基础与临床相结合的研究。已在统计源期刊发表相关文章9篇,并多次参加国内学术交流,研究成果被多家综合性医院所应用。该课题所用ABC和Sp免疫组化法均为公认的成熟方法,简便、经济、实用、重复性好,易于临床普及推广应用。
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一种治疗妇科疾病的密丸
成熟度:正在研发
技术类型:发明
应用行业:农、林、牧、渔业
技术简介
技术投资分析:本发明为祖传,是纯中药治剂,主要功能;防癌.超前检测癌基因.消灭早期癌症.抗治晚期.扩散转移癌症.各种癌症手术后防复发,疗效快;治愈率高.愈后不复后,本药无任何副作用.健康人防癌.服药1-3个月.超前检测全身癌基因1-14天.乳腺癌超前检测癌基因1-7个月,晚期扩散转揿的癌症3-7天止痛.20天固定1-2个月萎缩3个月疗程.连用3-4个疗程.各种癌症手术后预防复后8-12个月.本发明为祖传几代人,属于中药治剂.治疗妇女疾病,疗效快;疗程短愈后不复发.无任何毒副作用.在37年的临床中.主治妇女急性乳腺炎12小时痊愈.妇女急性腺增生30天痊愈.妇女慢性肠粘连60天痊愈,妇女盆腔粘连及妇女更年期综合症等40种疾病加药引疗效可靠.妇女超前检测乳腺癌基因.抗治晚期扩散的妇女癌症.妇女各种肿瘤手术后防复发.技术的应用领域前景分析:治疗妇女疾病,本药品治疗快,.妇女各种肿瘤,反复率低.市场广.效益分析:效益良好.厂房条件建议:无备注:无
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肿瘤病人血清erbB2水平检测试剂盒(条)的研发
成熟度:通过中试
技术类型:-
应用行业:制造业
技术简介
肿瘤发生与癌基因过度表达有关,对癌基因表达水平的检测,有助于对肿瘤生物学行为及预后的判断。erbB2 是一个与乳腺癌、胃癌、肺癌等许多肿瘤发生密切相关的癌基因,它的表达水平直接影响到肿瘤病人的化疗效果及五年生存期,针对 erbB2 的人源化抗体 Hercepin 在美国已作为第一个抗肿瘤单抗用于对某些肿瘤的治疗,erbB2水平在国外已作为一个独立指标用于对肿瘤生物学行为的判断。本项目旨在研发具自主知识产权、用于对肿瘤病人血清 erbB2水平检测的诊断试剂盒(条),为临床的肿瘤诊疗服务。
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肿瘤病人血清erbB2水平检测试剂盒(条)研发
成熟度:通过小试
技术类型:-
应用行业:制造业
技术简介
肿瘤发生与癌基因过度表达有关,对癌基因表达水平的检测,有助于对肿瘤生物学行为及预后的判断。erbB2 是一个与乳腺癌、胃癌、肺癌等许多肿瘤发生密切相关的癌基因,它的表达水平直接影响到肿瘤病人的化疗效果及五年生存期,针对erbB2 的人源化抗体 Hercepin 在美国已作为第一个抗肿瘤单抗用于对某些肿瘤的治疗,erbB2水平在国外已作为一个独立指标用于对肿瘤生物学行为的判断。本项目旨在研发具自主知识产权、用于对肿瘤病人血清 erbB2水平检测的诊断试剂盒(条),为临床的肿瘤诊疗服务。本试剂盒技术的应用范围:适用于对所有肿瘤病人血清 erbB2 水平的检测,同时适用于对术后病人肿瘤复发的检测,为临床的肿瘤治疗个体化及准确的预后判断提供依据。本试剂盒技术的优势:本项目所采用的抗体,其特异性和亲和力已达到国际同类产品水平。本试剂盒技术的水平:血清 erbB2 检测盒在国外已有商品化,在国内尚无同类产品。我所具有二十年的抗体研发历史,掌握细胞工程抗体及基因工程抗体的各种制备技术,在各类抗体的研发中,在国内具显著的技术优势,多次获得有关科技成果奖,已有不少抗体获得专利或用于对肿瘤的诊疗实践,在国内具一定影响。
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抑癌基因-细胞同质异能素抗癌药
成熟度:通过小试
技术类型:发明
应用行业:制造业
技术简介
抑癌基因-细胞同质异能素抗癌药(专利号201310246366.2)抑癌基因也称为抗癌基因,是唯一能够抗癌的物质。(物理化学药物抗癌无效,现代药企都企图以化学药物来抗癌,其结果均会以失败而告终。这是癌细胞同位素的特点★)。用可调控生物核反应堆,制造出抑癌基因-细胞同质异能素抗癌药,它们可以是抑癌miRNA、抑癌蛋白质等细胞同质异能素。利用抑癌基因与癌细胞进行混合平衡修复,癌基因激发态量子性、核结合能牢固性才能被彻底清除。抑癌基因-细胞同质异能素抗癌药物研制成功,标志着生物同位素应用世纪的来临。生物治疗是指DC+CIK治疗,第三代生物治疗疗效还没有突破的主要原因是,生物治疗中的体液、免疫细胞抑癌基因丢失(癌基因二维激发态增长)。抑癌基因抗癌药能修复DC+CIK、NK等细胞,切除其中的致癌“干性”物质,能使血液免疫细胞转换成骨髓免疫细胞,抗癌免疫力提高90%。这样的生物免疫学治疗才堪称得上真正的绿色治疗。★癌细胞(放射性)同位素特点,癌细胞核“放射性衰变”的速度不受温度、压力、电磁场等外界条件的影响,也不受细胞所处状态的影响,只和时间有关。
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微小分子RNA-1247-5p作为新型肿瘤治疗分子靶标的用途
成熟度:正在研发
技术类型:发明
应用行业:制造业
技术简介
本发明提供一种小分子miRNA-1247-5p稳定过表达肝癌细胞系的建立方法及其对肝癌细胞株新陈代谢的调控作用,很可能成为预防与治疗肿瘤的标志物。越来越多的证据表明,microRNA可作为一种癌基因或抑癌基因,参与调控多种癌症的发生和发展过程。本发明通过构建慢病毒侵染肿瘤细胞模型的实验证明,miRNA-1247-5p对肿瘤细胞株HepG2增殖、迁移和侵袭等具有明显抑制作用,具有调控细胞周期及新陈代谢的作用,因此miR-1247-5p很可能成为肿瘤预防与治疗的全新靶点;并且通过靶基因预测数据库及双荧光素酶报告系统证实miR-1247-5p发挥细胞调控作用,是通过特异性靶向抑制癌基因无翅型MMTV整合位点家族成员3(WNT3)的表达来实现的。