无内毒素的rLj-RGD3蛋白制备方法

摘要： 本发明公开一种无内毒素的rLj-RGD3蛋白制备方法，其步骤如下：

1. 将转化有pET23b-RGD3重组质粒的大肠杆菌BL21进行高密度发酵及IPTG诱导表达。
2. 收集菌体，并采用高压均质机进行菌体细胞破碎，从而得到破菌液。
3. 对破菌液进行过滤，得到澄清液。
4. 将澄清液通过镍离子亲和层析，以捕获目的蛋白。
5. 利用Superdex 75分子筛对蛋白进行第二步精细纯化。
6. 通过Q FF阴离子交换进行蛋白的第三步纯化。
7. 最终，蛋白纯度可达99%。

摘要：本发明公开一种无内毒素的rLj‑RGD3蛋白制备方法，按如下步骤进行将转化有pET23b‑RGD3重组质粒的大肠杆菌BL21高密度发酵及IPTG诱导表达，收集菌体，采用高压均质机进行菌体细胞破碎，得破菌液；过滤破菌液得澄清液；将澄清液通过镍离子亲和层析进行目的蛋白的捕获；利用Superdex 75分子筛进行蛋白的第二步精细纯化；利用Q FF阴离子交换进行蛋白的第三步纯化；蛋白纯度达99%。