基于CRISPR-cas12a技术的ESKAPE病原菌快速检测技术的研发

本项目拟基于CRISPR-Cas相关技术研发出一款可用于临床快速检测ESKAP病原菌的试剂盒。该病原菌包括：

• Enterococcus faecium（屎肠球菌）
• Staphylococcus aureus（金黄色葡萄球菌）
• Klebsiella pneumoniae（肺炎克雷伯菌）
• Acinetobacter baumannii（鲍曼不动杆菌）
• Pseudomonas aeruginosa（铜绿假单胞菌）
• Enterobacter species（肠杆菌属细菌）

本项目检测方法是结合等温扩增技术、CRISPR检测技术和横向泳动技术来实现的。其中，CRISPR检测技术的核心是利用Cas12a的切割活性。Cas12a不仅能切割其结合的靶标DNA，还能切割非靶标单链DNA。这种切割活性依赖于Cas12a的激活。

在检测过程中，单链DNA两端分别标记作为探针。当检测样本中含有靶标DNA时，在Cas12sgRNA的引导下被激活，切割靶标DNA的同时也能切割被标记的探针DNA，从而释放信号，达到检测目的。

本项目拟基于CRISPR-Cas相关技术研发出一款可用于临床快速检测ESKAP病原菌(Enterococcusfaecium , 屎肠球菌;Staphylococcusaureus,金黄色葡萄球菌: Klebsiellapneumonia,肺炎克雷伯菌: Acinetobacterbaumanni ,鲍曼不动杆菌;Pseudomonasaeruginosa,病原菌: Enterobacterspecies,肠杆菌属细菌)的试剂盒,本项目检测方法是结合等温扩增技术、CRISPR检测技术和横向泳动技术来实现的,其中CRISPR检测技术的核心是利用Cas12a的切割活性,它不仅能切割它结合的靶标DNA,也能勇切期1的非靶标单链DNA,这种切割活性依赖Cas12a的激活。将单接Du两端分别标记作为探针,当检测样本中含有靶标DNA时, Cas12sgRNA的引导下被激活,切割靶标DNA的同时也能切割被标记的轉DNA,从而释放信号,达到检测目的。