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高产尿苷的基因工程菌及其构建方法与应用

技术类型：发明专利

技术成熟度：研发

转让方式：技术转让、其他

专利申请日：2018-01-10

专利所属地 ：其他国家、地区

专利号：CN201810020944.3

应用领域：生物药品制品制造

技术领域：生物治疗技术和基因工程药物

交易价格：面议专利价值评估

应用案例：否

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简介

本发明提供了一种高产尿苷的基因工程菌及其构建方法与应用。该菌是在大肠杆菌的基因组上整合了核苷酸序列，如SEQ ID NO:1所示的嘧啶核苷操纵子pyrBCAKDFE，并由强启动子Ptrc启动，重构了尿苷合成途径。具体而言，该菌在基因组上对自身的PRPP合成酶编码基因prsA进行了双拷贝，同样由强启动子Ptrc启动。此外，该菌同时缺失了尿苷激酶(udk)、尿苷磷酸化酶(udp)和核苷水解酶(rihA、rihB和rihC)的活性。同时，还缺失了高丝氨酸脱氢酶1(thrA)的活性以及鸟氨酸氨甲酰转移酶(argF)的活性。

该基因工程菌应用于发酵生产尿苷，表现优异。在5L发酵罐中发酵40-70小时，可生产尿苷40-67g/L，最大生产强度可达1.5g/(L×h)，糖苷转化率为15-25％。这一水平是目前报道的发酵法生产尿苷的最高水平。

(此文字表达经过AI优化完善，查看原文请点击 原文)
专利基本信息
专利名称 高产尿苷的基因工程菌及其构建方法与应用
专利状态 授权 专利号（申请号） CN201810020944.3
申请号 CN108130306A 专利申请日期 2018-01-10
专利授权日期 2019-03-05 专利权届满日 2038-01-10
专利所属地 其他国家、地区 专利类型 发明专利
发明人 谢希贤;陈宁;吴鹤云;李国梁;李强;范晓光;徐庆阳;张成林;李燕军;马倩
权利人 天津科技大学
专利摘要 本发明提供一种高产尿苷的基因工程菌及其构建方法与应用，该菌是在大肠杆菌的基因组上整合了核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示的嘧啶核苷操纵子pyrBCAKDFE，并由强启动子Ptrc启动，重构了尿苷合成途径；在基因组上对其自身的PRPP合成酶编码基因prsA进行双拷贝，由强启动子Ptrc启动；同时缺失尿苷激酶(udk)、尿苷磷酸化酶(udp)和核苷水解酶(rihA、rihB和rihC)活性；缺失高丝氨酸脱氢酶1(thrA)活性；缺失鸟氨酸氨甲酰转移酶(argF)活性。该基因工程菌应用于发酵生产尿苷，在5L发酵罐发酵40‑70h可生产尿苷40‑67g/L，最大生产强度可达1.5g/(L×h)，糖苷转化率为15‑25％，是目前报道的发酵法生产尿苷的最高水平。
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