造血基质细胞分泌因子扩增脐血干/祖细胞及临床应用

（1）任务来源 “造血基质细胞分泌因子扩增脐血细胞及临床应用”项目由江西省科委社发处立项。批准时间为2002年10月。申请经费为3万元，批准经费为1.0万元。研究周期为3年，于2005年12月完成全部研究计划。

（2）应用领域和技术原理 项目研究内容涉及细胞生物学和实验血液学领域。脐血造血细胞作为一种新的造血干细胞来源，可用于移植，具有许多优点。在SCF、儿-3、儿-6、IL-1、b-FGF等因子的刺激下，脐血造血细胞可自我更新和扩增，更适应体外扩增。骨髓基质细胞系分泌广谱的造血细胞因子和非特异性的介导物，支持造血细胞生长并参与干细胞调节。

本课题旨在研究造血基质细胞分泌因子在单用或与细胞因子联用时对脐血造血干/祖细胞体外扩增的作用，寻找理想的脐血造血细胞体外扩增条件，克服单用细胞因子的不足，保持脐血造血细胞的自我更新能力、增殖能力，减慢分化，扩增早期造血细胞数量，以获得大量的脐血造血干/祖细胞。这将为临床上血液及其它恶性肿瘤患者化疗和放疗后造血细胞移植、临床基因治疗等提供来源方便的造血细胞，并进行临床应用研究，提高移植成功率，减少病人复发，提高患者的无病生存期，具有良好的社会效益和经济效益。

（3）性能指标 课题实际完成的研究任务包括： 1. 建立骨髓基质细胞体外长期培养 2. 骨髓基质细胞培养上清提取 3. 脐血造血干/祖细胞体外培养、扩增 4. 细胞计数 5. 培养细胞存活率测定 6. 细胞增殖测定 7. 造血细胞集落测定 8. 细胞表面标志测定 9. 扩增后的细胞的各项测定及临床移植应用和疗效观察

（4）与国内外同类技术比较 项目研究成果总体水平

（5）成果的先进性 骨髓基质细胞培养上清与细胞因子联用促进脐血-造血细胞的增殖是本项目的先进性所在。本研究达到国内先进、省内领先水平。

（6）作用意义（直接经济效益和社会意义） 基质细胞系分泌广谱的造血细胞因子和非特异性的介导物支持造血细胞调节有关。造血基质细胞培养上清协同造血生长因子可促进造血细胞增殖并防止它们向终末分化，其分泌在培养上清中scF和G-csF两者协同支持早期造血细胞生长。研究出用骨髓基质培养上清联用细胞因子在体外大量扩增人脐血造血干细胞，建立稳定有效的体外主子体系，为临床移植和基因治疗提供来源方便的造血细胞，使扩增后的细胞数量能适于临床应用，提高移植患者生存率，创造良好的社会效益和经济效益。

（7）推广应用的范围、条件和前景以及存在的问题和改进意见 该项目采用骨髓基质细胞培养上清联合造血生长因子刺激人脐造血细胞体外扩增，探索脐血造血细胞更合理的体外扩增方式。研究结果提示骨髓基质细胞培养上清中含有的造血基质细胞分泌因子可促进脐血造血基质细胞分泌因子，比细胞因子作用弱，两者联用时作用明显高于单个使用。骨髓基质细胞还可产生其它物质刺激造血细胞增殖并延长培养时间。脐血造血细胞体外扩增后输注治疗再生障碍贫血有较好疗效。

本研究后续工作是更加完善造血细胞扩增条件的研究，以期获得更多的研究资料。此外，在相关政策允许条件下争取进一步开展应用研究。

(1)任务来源

“造血基质细胞分泌因子扩增脐血细胞及临床应用”是江西省科委社发处项目。批准时间为2002年10月。申请经费3万元，批准经费1.0万元。研究周期：3年。于2005年12月完成全部研究计划。

(2)应用领域和技术原理

项目研究内容应用领域为细胞生物学、实验血液学。脐血造血细胞作为一个新的造血干细胞来源可用于移植，其有许多优点，在SCF、儿-3、几-6、IL-1、b-FGF等因子的刺激下可自我更新和扩增，更适应体外扩增。骨髓基质细胞系分泌广谱的造血细胞因子和非特异性的介导物支持造血细胞生长并参与干细胞调节。

本课题研究造血基质细胞分泌因子在单用或与细胞因子联用时对脐血造血干／祖细胞体外扩增的作用，寻找出理想的脐血造血细胞体外扩增的条件，克服单用细胞因子的不足，保持脐血造血细胞自我更新能力、增殖能力，减慢分化，扩增早期造血细胞数量，以获得大量的脐血造血干／祖细胞，为临床上血液及其它恶性肿瘤患者化疗和放疗后造血细胞移植、临床上基因治疗等提供来源方便的造血细胞，并进行临床应用研究，提高移植的成功率，减少病人的复发，提高患者的无病生存期，具有良好的社会效益和经济效益。

(3)性能指标课题实际完成的研究任务：1．建立骨髓基质细胞体外长期培养2．骨髓基质细胞培养上清提取。3．脐血造血干／祖细胞体外培养、扩增。4．细胞计数5．培养细胞存活率测定。6．细胞增殖测定7．造血细胞集落测定。8．细胞表面标志测定。9．扩增后的细胞的各项测定及临床移植应用和疗效观察。

(4)与国内外同类技术比较 项目研究成果总体水平

(5)成果的先进性将骨髓基质细胞培养上清与细胞因子联用促进脐血－造血细胞的增殖是本项目的先进性所在。本研究达到国内先进、省内领先水平。

(6)作用意义(直接经济效益和社会意义)基质细胞系分泌广谱的造血细胞因子和非特异性的介导物支持造血细胞调节有关。造血基质细胞培养上清协同造血生长因子可促进造血细胞增殖并防止它们向终末分化，其分泌在培养上清中scF和G-csF两者协同支持早期造血细胞生长。研究出用骨髓基质培养上清联用细胞因子在体外大量扩增人脐血造血干细胞，建立稳定有效的体外主子体系，为临床移植和基因治疗提供来源方便的造血细胞，使扩增后的细胞数量能适于临床，应用于临床，提高移植患者生存率，创造良好的社会效益和经济效益。

(7)推广应用的范围、条件和前景以及存在的问题和改进意见

该项目采用骨髓基质细胞培养上清联合造血生长因子刺激人脐造血细胞体外扩增，探索脐血造血细胞更合理的体外扩增方式。研究结果提示骨髓基质细胞培养上清中含有的造血基质细胞分泌因子可促进脐血造血基质细胞分泌因子，比细胞因子作用弱，两者联用时作用明显高于单个使用。骨髓基质细胞还可产生其它物质刺激造血细胞增殖并延长培养时间。脐血造血细胞体外扩增后输注治疗再生障碍贫血有较好疗效。

本研究后续工作是更加完善造血细胞扩增条件的研究，以期获得更多的研究资料。此外，在相关政策允许条件下争取进一步开展应用研究。