水体汞污染的微生物修复技术研发

申请人以对汞离子具有抗性、可转化汞离子的恶臭假单胞菌为模板，并克隆了与抗汞-汞离子转化相关的mer操纵子及其调控基因merR。借助表面展示技术将merR锚定于大肠杆菌表面，构建了merR蛋白的表面展示菌，进行汞离子的吸附。

将mer操纵子克隆到可在环境菌中自我复制的质粒pJR20，利用细菌接合的方式将抗汞相关基因mer操纵子转化至多种污染物降解菌醋酸钙不动杆菌中，构建了可同时清除多种不同污染物的基因工程菌。

研究达到了以下指标：

1. 不同配比（3:1-1:3）的恶臭假单胞菌和表面展示菌的混合菌体对汞离子菌具有较高的清除效率，在pH 8.0-9.0之间，对汞离子的清除效率介于85%-90%之间。

2. 可用沸石对菌剂进行固定，菌剂在pH为9.0时，对不大于280 μM的汞离子具有最高的清除效率，达到90%以上。恶臭假单胞菌、表面展示菌DH5α/pAT2、基因工程-含有mer操纵子的醋酸钙不动杆菌均具有85%以上的清除效率。

3. 本项目发表SCI论文5篇，申请国家发明专利2项。组合菌清除汞离子的能力达到90%以上，并且针对不同菌株，优化了应用条件。

申请人以对汞离子具有抗性、可转化汞离子的的恶臭假单胞菌为模板,并克隆了与抗汞-汞离子转化相关的mer操纵子及其调控基因merR。借助表面展示技术将merR锚定于大肠杆菌表面,构建了merR蛋白的表面展示菌,进行汞离子的吸附。将mer操纵子克隆到可在环境菌中自我复制的质粒pJR20,利用细菌接合的方式将抗汞相关基因mer操纵子转化至多种污染物降解菌醋酸钙不动杆菌中,构建了可同时清除多种不同污染物的基因工程菌。研究达到了一下指标：（1）不同配比（3:1-1:3）的恶臭假单胞菌和表面展示菌的混合菌体对汞离子菌具有较高的清除效率,在pH8.0-9.0之间,对汞离子的清除效率介于85-90%之间。（2）可用沸石对菌剂进行固定,菌剂在pH为9.0时,对不大于280 μM的汞离子具有最高的清除效率,达到90%以上。恶臭假单胞菌、表面展示菌DH5α/pAT2、基因工程-含有mer操纵子的醋酸钙不动杆菌均具有85%以上的清除效率。（3）本项目发表SCI论文5篇,申请国家发明专利2项,组合菌清除汞离子的能力达到90%以上,并且针对不同菌株,优化了应用条件。