一种制备重组耐热β-葡萄糖醛酸酶的方法

一种制备重组极耐热性β-葡萄糖醛酶的方法，其制法如下：

1. 将耐热β-葡萄糖醛酸基因插入表达载体PHSH。
2. 转化大肠杆菌，获得耐热β—葡萄糖醛酸酶表达质粒。
3. 对基因进行诱变，改变mRNA的二级结构，得到优化的耐热β-葡萄糖醛酸酶质粒。
4. 将耐热β--葡萄糖醛酸酶表达质粒或优化的耐热β-葡萄糖醛酸酯进行超量表达。
5. 收集细胞，破壁，离心后得到粗酶液。
6. 进一步纯化后得到纯酶。

本发明首次使用表达载体PHSH对耐热β-葡萄糖醛酸酶的基因进行高效表达，并首次将重组的耐热β—葡萄糖醛酸酶应用于甘草次酸的制备。

一种制备重组极耐热性β-葡萄糖醛酶酸的方法，其制法是：将耐热β-葡萄糖醛酸基因插入表达载体PHSH，转化大肠杆菌获得耐热β—葡萄糖醛酸酶表达质粒；其次是对基因进行诱变，改变MRNA的二级结构，得到优化的耐热β-葡萄糖醛酸酶质表达质粒；然后将耐热β--葡萄糖醛酸酶表达质粒或优化的耐热β-葡萄糖醛酸酯得到超量表达；最后收集细胞，破壁，离心后得到粗酶液，进一步纯化后得到纯酶。本发明首次使用表达载体PHSH对耐热β-葡萄糖醛酸酶的基因进行高效表达，并首次将重组的耐热β—葡萄糖醛酸酶应用于甘草次酸的制备。