新型重组蛋白非色谱纯化技术的开发

本课题组自行开发了一种能对目标蛋白进行非色谱分离的融合标签。它能快速与目标蛋白融合，经过条件的控制，采用离心或过滤的方法分离重组蛋白，效果显著；蛋白表达条件简单，易于操作，生产成本低廉（经国外相关专家计算，其成本约为色谱法的10%），可望进行工业化生产。

该标签名为KV8F，其生物安全性得到广泛认同。重组蛋白经表达后，通过温度的精确控制，不借助色谱技术，即可获得高纯度目标蛋白。在该临界温度上下，KV8F结构发生明显变化，进而引起溶解性能的急剧改变，且该过程可逆。该非色谱纯化法具有回收效率高、简单易行的特点，同时离心回收目的蛋白本身就是浓缩的过程，而色谱法最后的洗脱过程则是一个稀释的过程，也增加了后续冷冻干燥的成本。

重组蛋白（如：转基因药物、抗原、抗体、酶）分离纯化过程所需成本约占总成本的60％-70%。目前主流采用的是基于亲和标签的色谱技术。但是，与融合标签结合的特异配基价格昂贵，限制了其在大规模分离纯化中的应用。因此，本项目所发展的简单易行、廉价、可靠的蛋白质纯化方法具有广阔的市场前景。

本课题组自行开发了一种能对目标蛋白进行非色谱分离的融合标签。它能快速与目标蛋白融合，经过条件的控制，采用离心或过滤的方法分离重组蛋白，效果显著；蛋白表达条件简单，易于操作，生产成本低廉（经国外相关专家计算，其成本约为色谱法的10%），可望进行工业化生产。 该标签名为KV8F，其生物安全性得到广泛认同。重组蛋白经表达后，通过温度的精确控制，不借助色谱技术，即可获得高纯度目标蛋白。在该临界温度上下，KV8F结构发生明显变化，进而引起溶解性能的急剧改变，且该过程可逆。该非色谱纯化法具有回收效率高、简单易行的特点，同时离心回收目的蛋白本身就是浓缩的过程，而色谱法最后的洗脱过程则是一个稀释的过程，也增加了后续冷冻干燥的成本。 重组蛋白(如：转基因药物、抗原、抗体、酶)分离纯化过程所需成本约占总成本的60％-70%，目前主流采用的是基于亲和标签的色谱技术。但是，与融合标签结合的特异配基价格昂贵限制了在大规模分离纯化中的应用。因此，本项目所发展的简单易行、廉价、可靠的蛋白质纯化方法具有广阔的市场前景。