八角茴香、莪术和玫瑰挥发油抗念珠菌活性的体外研究

该研究属自选课题，经费自筹。

简要技术说明：

1. 临床分离念珠菌的鉴定

   • 将临床标本接种于沙堡氏培养基，培养阳性者分别采用芽管实验、厚壁孢子实验、API真菌自动鉴定系统将念珠菌鉴定到种。

2. 药敏实验 （1）纸片扩散法：初步显示挥发油或单体化合物对念珠菌的抑菌活性，同时设置空白对照和阳性对照。 （2）NCCLS M27-A方案常量液基稀释法：在试管内进行倍比稀释药敏试验。 微量液基稀释法：采用96孔药敏板进行倍比稀释药敏实验。该方法所需的药液及菌悬液量均明显少于常量稀释法，且其准确性高、重复性好。该方案为目前国际上公认的标准化抗真菌药敏试验方法。 棋盘微量稀释法：原理同微量稀释法。用于中草药挥发油与氟康唑对念珠菌的联合抑菌试验，以探讨两者之间的相互作用。

该课题主要首先采用纸片扩散法初步定性挥发油的体外抑菌活性，然后采用NCCLS-M27A微量稀释法抗真菌药敏试验定量检测八角茴香、莪术和玫瑰挥发油及其3种单体成分对临床分离念珠菌的体外最小抑菌浓度（MIC）和最小杀菌浓度（MFC），并采用棋盘法进行挥发油与氟康唑对念珠菌的联合抑菌实验，观察二者的抑菌效应。该课题所采用的抗真菌药敏试验方法适用于对已有抗真菌药物体外抑菌作用的评估，也适用于新的抗真菌药物的筛选，可在有条件的实验室推广应用。

我国四川、贵州、云南等地均盛产莪术，我省陇南地区盛产八角茴香，永登盛产玫瑰，是国内最重要的玫瑰油生产基地。因此，充分利用我国和我省的药用植物资源，进行新药研发，对本国及甘肃省的经济发展将会有积极的促进作用。

药用植物挥发油与氟康唑联用具有协同作用，为今后中西医结合治疗念珠菌感染提供了实验依据，可进一步进行动物实验研究。

该研究属自选课题，经费自筹。

简要技术说明：

1、临床分离念珠菌的鉴定将临床标本接种于沙堡氏培养基，培养阳性者分别采用芽管实验、厚壁孢子实验、API真菌自动鉴定系统将念珠菌鉴定到种。

2、药敏实验

（1）纸片扩散法：初步显示挥发油或单体化合物对念珠菌的抑菌活性，同时设置空白对照和阳性对照。

（2）NCCLS M27-A方案常量液基稀释法：在试管内进行倍比稀释药敏试验。微量液基稀释法：采用96孔药敏板进行倍比稀释药敏实验。该方法所需的药液及菌悬液量均明显少于常量稀释法，且其准确性高、重复性好。该方案为目前国际上公认的标准化抗真菌药敏试验方法。

棋盘微量稀释法：原理同微量稀释法。用于中草药挥发油与氟康唑对念珠菌的联合抑菌试验，以探讨两者之间的相互作用。

该课题主要首先采用纸片扩散法初步定性挥发油的体外抑菌活性，然后采用NCCLS-M27A微量稀释法抗真菌药敏试验定量检测八角茴香、莪术和玫瑰挥发油及其3种单体成分对临床分离念珠菌的体外最小抑菌浓度（MIC）和最小杀菌浓度（MFC），并采用棋盘法进行挥发油与氟康唑对念珠菌的联合抑菌实验，观察二者的抑菌效应。

该课题所采用的抗真菌药敏试验方法适用于对已有抗真菌药物体外抑菌作用的评估，也适用于新的抗真菌药物的筛选可在有条件的实验室推广应用。

我国四川、贵州、云南等地均盛产莪术，我省陇南地区盛产八角茴香，永登盛产玫瑰，是国内最重要的玫瑰油生产基地，因此充分利用我国和我省要用植物资源，进行新药研发，对本国及甘肃省的经济发展将会有积极的促进作用。

药用植物挥发油与氟康唑联用具有协同作用，为今后中西医结合治疗念珠菌感染提供了实验依据，可进一步进行动物实验研究。