基于色谱技术的中药活性成分快速辨识与绿色质量控制研究

该项目致力于中药药效物质基础与质量控制领域的研究。中药作为中医临床防病治病的物质基础，对其药效成分的快速明确和整体质量控制是中药现代化发展的必然趋势。本项目针对中药研究中存在的活性成分发现困难、指标性成分与功效相关性不强、药材消耗大、有机溶剂提取污染环境等关键问题，在国家自然科学基金、省自然科学基金等课题的支持下，开展了以下工作：

项目成果概述：1. 针对中药提取物、中药单体及活性成分的快速筛选，创建了系列新技术和新方法。 2. 在活性成分辨识的基础上，提出了基于药理活性的中药绿色质量控制新模式。 3. 该模式成功应用于药材（珠芽蓼、木蝴蝶）的质量控制，显著提升了中药质控水平。

科学技术内容及创新点：1.中药活性提取物/单体的快速筛选：- 建立了柱前酶反应结合HPLC分析的酶抑制剂筛选方法，提高了专属性。 - 建立了固定化酶微反应器—毛细管电泳在线筛选酶抑制剂方法，降低了试剂成本。 - 建立了磁床固定化双酶微反应器—毛细管电泳筛选酶抑制剂方法，实现多靶同时筛选。

2. 中药提取物中活性成分的快速筛选：

   • 建立了基于靶酶内在活性的中药活性成分在线快速筛选新方法。
   • 建立了基于靶酶亲和性的中药活性成分在线快速筛选新方法。
   • 建立了中空纤维固定化酶结合液质联用的亲和筛选方法。

3. 基于药理活性的中药绿色质量控制研究：

   • 建立了集在线微萃取、色谱分离、质谱鉴定与抗氧化活性于一体的全自动“一体化”系统。
   • 以药效主要成分为指标，应用绿色溶剂、超快提取与快速分析建立中药绿色质量控制研究策略。

项目成果应用与影响：- 项目发表学术论文20篇，其中SCI收录17篇，10篇代表作（2篇IF＞5.0）均发表在行业知名期刊，总引用130次。 - 相关成果被业界同行广泛接受，自2015年起陆续在省内部分医院和省内外一些企业推广应用，产生较好的社会效益和一定的经济效益。

该项目属于中药药效物质基础与质量控制领域研究。中药是中医临床防病治病的物质基础，快速明确其药效成分并对其进行整体质量控制是中药现代化发展的必然趋势。该项目针对中药普遍存在活性成分发现困难、指标性成分与功效相关性不强、药材消耗大、有机溶剂提取污染环境等关键热点问题，在国家自然科学基金、省自然科学基金等课题支持下，以快速发现中药功效相关活性成分研究为切入点，创建了适用于中药提取物、中药单体、中药提取物中活性成分快速筛选的系列新技术和新方法，为中药等复杂体系下的活性成分快速发现提供了技术参考和应用实践；并在此活性成分辨识的基础上，提出基于药理活性的中药绿色质量控制新模式，并成功用于药材（珠芽蓼、木蝴蝶）的质量控制，显著提升了中药质控水平，有利于中药标准体系建设和相关产业发展。 该成果的科学技术内容及创新点：（1）中药活性提取物/单体的快速筛选：1）建立了柱前酶反应结合HPLC分析的酶抑制剂筛选方法，对中药提取物进行筛选，提高了专属性，避免了传统分光光度法由于背景干扰导致的假阴性或假阳性结果；2）建立了固定化酶微反应器—毛细管电泳在线筛选酶抑制剂方法，降低了试剂成本，具有分离效率高，分析速度快，消耗试剂少等优点，为活性成分快速发现提供了强有力的工具；3）建立了磁床固定化双酶微反应器—毛细管电泳筛选酶抑制剂方法，实现多靶同时筛选。 (2)中药提取物中活性成分的快速筛选：1）建立基于靶酶内在活性的中药活性成分在线快速筛选新方法（HPLC-DAD-MS/MS-BCD系统），集样品分离、成分鉴定与活性评价于一体，一次进样同时实现中药成分化学信息和生物活性信息的获取；2）建立基于靶酶亲和性的中药活性成分在线快速筛选新方法（SPE-HPLC-DAD-MS/MS系统），利用先进分析技术解决传统亲和筛选方法（超滤）操作繁琐、多非特异性结合的缺点；3）建立中空纤维固定化酶结合液质联用的亲和筛选方法，固定化材料经济易得、固定化方法简单、固定化酶可多次重复使用，降低试剂成本。 (3)基于药理活性的中药绿色质量控制研究：1）建立集在线微萃取、色谱分离、质谱鉴定与抗氧化活性于一体的全自动“一体化”系统，仅需微量药材（0.4mg），且流动相做提取溶剂减少有机提取污染；2）以药效主要成分为指标，应用绿色溶剂、超快提取与快速分析建立基于药理活性的中药绿色质量控制研究策略，助力相关中药质控水平的提升。中药活性成分的发现既是创新中药研发的源泉又是对其进行质量控制的关键，该研究为中药复杂体系中活性物质的发现和基于药理活性的绿色质量控制研究提供了现实、可行的策略。项目发表学术论文20篇，其中SCI收录17篇，10篇代表作（2篇IF＞5.0）均发表在行业知名期刊，总引用130次；相关成果被业界同行广泛接受，自2015年起陆续在省内部分医院和省内外一些企业推广应用，产生较好的社会效益和一定的经济效益。