一种斑马鱼原代胚胎细胞体外分化为心肌细胞的新方法

本发明提供了一种斑马鱼原代胚胎细胞体外分化为心肌细胞的新方法。

斑马鱼交配后，收集发育至囊胚期的胚胎，经消毒及去绒膜处理后，吹打成单个细胞。再将这些细胞置于明胶包被过的细胞培养容器中，用心肌细胞诱导培养液进行培养，时间为24至48小时。通过这种方法，可以得到能自发收缩的心肌细胞。

心肌细胞诱导培养液的组分包括：Leibovitz L-15培养基、Dulbecco改良Eagle培养基、Ham's F12培养基、胎牛血清、鱼血清、斑马鱼胚胎粗提物、胰岛素、青霉素和链霉素。

通过本发明，每诱导1万个原代胚胎细胞，可获得200个以上的心肌细胞团，并且这些细胞团能保持自发收缩特性长达20天。

本发明可实现经济、快速且高效地筛选对心肌细胞形成和发育有影响的生物大分子或小分子药物。

本发明提供了一种斑马鱼原代胚胎细胞体外分化为心肌细胞的新方法。斑马鱼交配后收集发育至囊胚期的胚胎，经消毒及去绒膜处理后，吹打成单个细胞，再置于明胶包被过的细胞培养容器中用心肌细胞诱导培养液培养24至48小时后得到能自发收缩的心肌细胞。心肌细胞诱导培养液组分为LeibovitzL-15培养基、Dulbecco改良Eagle培养基、Ham'sF12培养基、胎牛血清、鱼血清、斑马鱼胚胎粗提物、胰岛素、青霉素和链霉素。通过本发明每诱导1万个原代胚胎细胞可获得200个以上的心肌细胞团，且能保持自发收缩特性20天。本发明可实现经济、快速且高效地筛选对心肌细胞形成和发育有影响的生物大分子或小分子药物。