一种合成的鸭β-防御素-2基因、含该基因的重组质粒与重组酵母转化子及重组鸭β-防御素-2蛋白的生产方法

一种合成的鸭β-防御素-2基因、含该基因的重组质粒与重组酵母转化子及重组鸭β-防御素-2蛋白的生产方法如下：

该生产方法包括以下步骤：

1. 重组鸭β-防御素-2基因的合成：

   • 参照GenBank中注册的鸭AvBD2基因cDNA基因序列。
   • 根据酵母密码子偏好性对鸭AvBD2基因成熟肽段核苷酸序列进行改造。
   • 利用基因合成方法合成该基因。

2. 重组质粒的构建：

   • 设置鸭β-防御素-2基因上游引物和下游引物。
   • 通过PCR扩增鸭β-防御素-2基因片段。
   • 构建重组质粒pPICZα-A-AvBD2。

3. 重组酵母转化子的生产：

   • 制备和线性化重组质粒。
   • 制备毕赤酵母电转化感受态细胞。
   • 进行毕赤酵母的电击转化。

4. 重组鸭β-防御素-2蛋白的生产：

   • 诱导阳性酵母转化子表达蛋白。

本发明专利与已有技术相比，具有以下优点： - 具有抗菌促生长活性。 - 适合于畜牧生产应用。 - 生产成本低。 - 生产效率高。

一种合成的鸭β-防御素-2基因、含该基因的重组质粒与重组酵母转化子及重组鸭β-防御素-2蛋白的生产方法，其中重组鸭β-防御素-2基因参照GenBank中注册的鸭AvBD2基因cDNA基因序列，同时根据酵母密码子偏好性对鸭AvBD2基因成熟肽段核苷酸序列进行改造，然后利用基因合成方法合成，含该基因的重组质粒重组质粒的构建过程依次是：（1）鸭β-防御素-2基因上游引物、下游引物的设置过程；（2）鸭β-防御素-2基因片段的PCR扩增过程；（3）重组质粒pPICZα-A-AvBD2的构建；重组鸭β-防御素-2蛋白的重组酵母阳性转化子的生产方法包括（1）重组质粒的制备和线性化、（2）毕赤酵母电转化感受态细胞的制备、（3）毕赤酵母的电击转化；重组鸭β-防御素-2蛋白的生产方法包括（1）阳性酵母转化子的诱导表达。本[发明专利]与已有技术相比，具有抗菌促生长活性，适合于在畜牧生产中进行应用，而且生产成本低、生产效率高的优点。