一种基于荧光猝灭的蛋白激酶活性分析方法

摘要： 本发明公开了一种基于荧光猝灭的蛋白激酶活性分析方法。该方法首先将靶标蛋白激酶与其对应的荧光标记多肽底物混合，使底物多肽中的特定氨基酸位点发生磷酸化反应。然后，利用纳米二氧化铈能够快速、高选择性地吸附生成的磷酸化荧光标记多肽底物，导致其荧光发生猝灭。而未磷酸化的荧光多肽底物与二氧化铈的相互作用非常微弱，不会造成荧光信号的猝灭。因此，通过监测体系中荧光信号的猝灭情况，即可实现蛋白激酶活性的准确分析。

本发明只需将蛋白激酶反应体系与纳米二氧化铈混合后，即可直接进行荧光信号的测量。利用简便的操作步骤，实现了蛋白激酶活性的即混即测型快速分析。同时，本发明方法可应用于蛋白激酶抑制剂的筛选。

摘要：本发明公开了一种基于荧光猝灭的蛋白激酶活性分析方法，该方法首先将靶标蛋白激酶与其对应的荧光标记多肽底物混合，使底物多肽中的特定氨基酸位点发生磷酸化反应，然后利用纳米二氧化铈能够快速、高选择性的吸附生成的磷酸化荧光标记多肽底物，导致其荧光发生猝灭，而未磷酸化的荧光多肽底物与二氧化铈的相互作用非常微弱，不会造成荧光信号的猝灭，因此，通过监测体系中荧光信号的猝灭情况，即可实现蛋白激酶活性的准确分析。本发明只需将蛋白激酶反应体系与纳米二氧化铈混合后即可直接进行荧光信号的测量，利用简便的操作步骤实现了蛋白激酶活性的即混即测型快速分析。同时本发明方法可应用于蛋白激酶抑制剂的筛选。