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专利基本信息
专利名称 一种特异性靶向变异链球菌gtfB位点的CRISPR-B基因编辑方法及应用
专利状态 - 专利号（申请号） CN108085317B
专利申请日期 2018-01-17 专利类型 发明专利
申请公布号 2018100436822 申请公布日 2018-01-17
授权公告号 - 授权公告日 -
发明人 李雨庆;龚涛;彭显;王诗达;周学东
专利权人 四川大学
专利摘要 本发明公开了一种特异性靶向变异链球菌gtfB位点的CRISPR‑B基因编辑方法及应用,基因序列如SEQIDNO.1所示;基因编辑方法包括以下步骤:步骤1:在基因序列前连接乳酸脱氢酶启动子Ldhp,形成Ldhp+CRISPR‑B;步骤2:通过酶切和连接将Ldhp+CRISPR‑B连接到线性质粒pDL278,形成CRISPR编辑载体;步骤3:通过聚合酶链式反应扩增敲除目的基因gtfB上游序列作为upstream;步骤4:通过聚合酶链式反应扩增敲除目的基因gtfC下游序列作为downstream;步骤5:将步骤3得到的upstream和步骤4得到的downstream连接形成同源重组模板HR‑BC;步骤6:将步骤2得到的CRISPR编辑载体和步骤5得到的同源重组模板HR‑BC转入变异链球菌中,即可实现同时编辑gtfB和gtfC;本发明可最大程度抑制变异链球菌胞外多糖的合成和生物膜的形成。
专利价值评估分析
专利价值评估分析 样例
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