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表达光敏感型腺苷酸环化酶的重组载体、其应用、构建方法及脱髓鞘疾病的治疗系统
成熟度：正在研发
技术类型：发明
应用行业：制造业
技术简介
本发明涉及一种用于表达光敏感型腺苷酸环化酶的重组载体、其应用、构建方法及脱髓鞘疾病的治疗系统。该用于表达光敏感型腺苷酸环化酶的重组载体包括病毒载体和包装于所述病毒载体中的带有光敏感型腺苷酸环化酶基因序列的穿梭质粒，所述光敏感型腺苷酸环化酶基因序列包含少突胶质细胞和施万细胞的特异性启动子。使用该用于表达光敏感型腺苷酸环化酶的重组载体感染脱髓鞘部位，使光敏感型腺苷酸环化酶基因序列只在少突胶质细胞和施万细胞中表达，在光刺激下，能定向调节上述两种细胞中的cAMP水平，从而促进髓鞘再生和稳定成髓，实现细胞特异性治疗脱髓鞘疾病的目的。
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用于高通量酵母双杂交技术的重组载体及其大规模筛选互作蛋白的方法
成熟度：正在研发
技术类型：发明
应用行业：制造业
技术简介
摘要：本发明公开了一种用于酵母双杂交的相关重组载体及其利用高通量测序技术大规模筛选互作蛋白的酵母双杂交的方法，该方法依赖于一种整合酶Integrase phiC31(En)的特有整合功能，通过对传统酵母双杂交载体的改造，使其与高通量测序技术有机结合，实现成百上千的Bait蛋白同时对Prey蛋白文库的筛选工作。将整合酶及其特异识别的核苷酸序列插入Matchmaker GAL4系统的载体中，通过酵母双杂交的方法使重组载体进入同一个酵母细胞，整合酶发生作用，将其特异识别的核苷酸序列及其紧邻的核苷酸序列进行特异性定向重排，从而使得两个重组载体融合成一个融合载体，此时猎物和诱饵蛋白序列被定向连接成融合载体上的一段新的序列，通过扩增、高通量测序，从而经济高效地筛选相互作用蛋白质并构建全面的蛋白互作网络图谱。
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一种重组鸡α干扰素基因及其重组载体
成熟度：正在研发
技术类型：-
应用行业：制造业
技术简介
本发明涉及一种新型重组鸡α干扰素基因序列，并构建其重组表达载体，属于用分子生物学方法获得的基因工程生物制品。将新设计的鸡α干扰素的基因序列重组到ｐＰＩＣＺα－Ａ载体，然后通过电转化方式整合到酵母菌上的特定位置。并采用毕赤酵母表达系统表达外源基因，有利于鸡干扰素商业化生产。该基因组表达的蛋白经过４３６５１５８．３倍稀释后，能完全抑制１００－１０００ＴＣＩＤ↓［５０］的水疱性口炎病毒的攻击。与天然的鸡α干扰素相比，有更强的抗病毒作用，其抗病毒作用提高了６．８倍。试验还测定该基因表达的蛋白可抑制新城疫病毒和禽流感病毒的增殖，且高浓度的干扰素作用更明显。
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一种纤维素酶、编码基因、重组载体及其应用
成熟度：正在研发
技术类型：发明
应用行业：制造业
技术简介
技术描述： 本发明提供了一种纤维素酶及其编码基因、重组载体和遗传工程化宿主细胞，属于生物工程技术领域。本发明的纤维素酶基因来源于土壤宏基因组文库，该蛋白酶由678个氨基酸残基组成，理论等电点pI为4.97，理论分子量Mw为73.17kDa，SDS-PAGE结果显示其表观分子量约为70kDa。经蛋白质数据库和核苷酸数据库分别进行搜寻比较，未发现有任何相同氨基酸序列和核苷酸序列，属于新型的纤维素酶，命名为GHF9 CelY。该纤维素酶的最适pH范围在6.5-7.0之间，最适酶反应温度为37℃。 成果用途：本发明纤维素酶在植物中药（银杏叶片）有效成分提取中具有很好的应用前景。在37℃下，pH7.0的缓冲体系中，使用终浓度为0.8mg/ml的GHF9 CelY处理银杏叶片粉末1小时，可以有效地提高其总黄酮的提取率,提高率达19.43%。
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一种双基因共表达重组载体及其构建方法和在三孢布拉霉中的应用
成熟度：正在研发
技术类型：发明
应用行业：制造业
技术简介
p 摘要：本发明公开了一种双基因共表达重组载体，在初始载体中携带有基因表达框序列syn，所述基因表达框序列syn含有：终止子—多克隆位点—双向启动子序列PCarB—TA克隆制备序列—终止子，所述基因表达框序列syn的核苷酸序列如SEQ.ID.NO:1所示；在所述初始载体中还携带有潮霉素抗性基因hygR，所述潮霉素抗性基因hygR的核苷酸序列如SEQ.ID.NO:2；具体构建了一个双基因共表达重组载体pPMPT，为在初始载体pATZ中含有基因表达框序列syn和潮霉素抗性基因hygR，其核苷酸序列如SEQ.ID.NO:3所示，同时还公开了该载体的构建方法以及在丝状真菌三孢布拉霉中的应用。本发明提供的重组载体可在一个质粒上同时添加两个基因，而且通过农杆菌介导可以整合到丝状真菌基因组中，以单拷贝插入，实现双基因共表达，其遗传稳定。 /p
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蚕类蜕皮激素受体EcR/USP蛋白复合物的表达及纯化的方法
成熟度：正在研发
技术类型：发明
应用行业：制造业
技术简介
本发明涉及蚕类蜕皮激素受体EcR/USP蛋白复合物的表达及纯化的方法，包括以下步骤：构建USP-pET-28a(+)重组载体和EcR-pET21b-MDX12重组载体；将所述USP-pET-28a(+)重组载体和EcR-pET21b-MDX12重组载体转化表达菌，培养，诱导表达重组目的蛋白复合物；将所得的重组目的蛋白复合物经镍离子亲和层析及分子筛层析进行纯化。本发明通过构建重组表达载体EcR-pET21b-MDX12、USP-pET-28a(+)，将两个载体进行共转，诱导两种蛋白的共表达，从而得到大量的重组目的蛋白复合物，然后经镍离子亲和层析柱和分子筛分离纯化可以得到纯度较高的目的蛋白。
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针对NFAT3基因靶点的短发卡RNA、重组载体及应用
成熟度：正在研发
技术类型：发明
应用行业：制造业
技术简介
摘要：本发明公开了一种针对NFAT3基因靶点的短发卡RNA、重组载体及应用，所述基因靶点的序列如SEQ ID NO3所示，所述RNA的正义链序列如SEQ ID NO1所示，所述RNA的反义链序列如SEQ ID NO2所示。针对NFAT3基因靶点设计了短发卡RNA序列，并构建了相应的重组载体，该重组载体能在宿主细胞内转录得到NFAT3‑shRNA，经宿主细胞加工后可生成小分子干扰RNA，并靶向NFAT3的信使RNA，降低NFAT3的表达，导致基因沉默效应，有效抑制黑色素瘤细胞的增殖，具有抗癌应用价值，为进一步研究NFAT3在皮肤癌细胞中的功能及靶向NFAT3的药物研发提供了基础。
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针对SOX4基因靶点的小干扰RNA、短发卡RNA及重组载体和应用
成熟度：正在研发
技术类型：发明
应用行业：制造业
技术简介
摘要：本发明涉及分子生物学、基因工程技术以及生物医药领域，具体涉及一种针对SOX4基因靶点的小干扰RNA、短发卡RNA及重组载体和应用。小干扰RNA包括SEQ ID NO.1所示的正义链和SEQ ID NO.2所示的反义链。短发卡RNA包括SEQ ID NO.3所示的正义链和SEQ ID NO.4所示的反义链。包含短发卡RNA的重组载体能在宿主细胞内转录得到SOX4‑shRNA，经宿主细胞加工后可生成小分子干扰RNA，并靶向SOX4的信使RNA，降低SOX4的表达，导致基因沉默效应，有效抑制食管鳞癌细胞的增殖并促进化疗药物阿霉素诱导的食管鳞癌细胞的衰老，具有抗肿瘤应用价值，为进一步研究SOX4在肿瘤细胞衰老逃逸中的功能及靶向SOX4的药物研发提供了基础。
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一种宏基因来源的α‑糖苷酶、编码基因、载体、工程菌及应用
成熟度：正在研发
技术类型：发明
应用行业：制造业
技术简介
p 摘要：本发明一种宏基因来源的α‑糖苷酶、编码基因、载体、工程菌及应用，属于基因工程技术领域。宏基因来源的α‑糖苷酶XcG‑B的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。编码α‑糖苷酶XcG‑B的基因。基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。一种含有所述基因的重组载体。一种由所述重组载体转化得到的基因工程菌。所述基因在制备重组α‑糖苷酶XcG‑B中的应用。所述的α‑糖苷酶XcG‑B在催化麦芽糖与含羟基底物的转糖苷反应中的应用。本发明具有以下优点α‑糖苷酶XcG‑B易于原核表达，可以采用重组载体、菌株及制备方法高效生产本发明α‑糖苷酶；而且，本发明酶的制备方法简便高效，易于大量表达，适于工业化生产。 /p
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表达光敏感型腺苷酸环化酶的重组载体、其应用、构建方法及脱髓鞘疾病的治疗系统
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本发明涉及一种用于表达光敏感型腺苷酸环化酶的重组载体、其应用、构建方法及脱髓鞘疾病的治疗系统。该用于表达光敏感型腺苷酸环化酶的重组载体包括病毒载体和包装于所述病毒载体中的带有光敏感型腺苷酸环化酶基因序列的穿梭质粒，所述光敏感型腺苷酸环化酶基因序列包含少突胶质细胞和施万细胞的特异性启动子。使用该用于表达光敏感型腺苷酸环化酶的重组载体感染脱髓鞘部位，使光敏感型腺苷酸环化酶基因序列只在少突胶质细胞和施万细胞中表达，在光刺激下，能定向调节上述两种细胞中的cAMP水平，从而促进髓鞘再生和稳定成髓，实现细胞特异性治疗脱髓鞘疾病的目的。
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用于高通量酵母双杂交技术的重组载体及其大规模筛选互作蛋白的方法
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技术类型：发明
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摘要：本发明公开了一种用于酵母双杂交的相关重组载体及其利用高通量测序技术大规模筛选互作蛋白的酵母双杂交的方法，该方法依赖于一种整合酶Integrase phiC31(En)的特有整合功能，通过对传统酵母双杂交载体的改造，使其与高通量测序技术有机结合，实现成百上千的Bait蛋白同时对Prey蛋白文库的筛选工作。将整合酶及其特异识别的核苷酸序列插入Matchmaker GAL4系统的载体中，通过酵母双杂交的方法使重组载体进入同一个酵母细胞，整合酶发生作用，将其特异识别的核苷酸序列及其紧邻的核苷酸序列进行特异性定向重排，从而使得两个重组载体融合成一个融合载体，此时猎物和诱饵蛋白序列被定向连接成融合载体上的一段新的序列，通过扩增、高通量测序，从而经济高效地筛选相互作用蛋白质并构建全面的蛋白互作网络图谱。
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一种重组鸡α干扰素基因及其重组载体
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技术类型：-
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本发明涉及一种新型重组鸡α干扰素基因序列，并构建其重组表达载体，属于用分子生物学方法获得的基因工程生物制品。将新设计的鸡α干扰素的基因序列重组到ｐＰＩＣＺα－Ａ载体，然后通过电转化方式整合到酵母菌上的特定位置。并采用毕赤酵母表达系统表达外源基因，有利于鸡干扰素商业化生产。该基因组表达的蛋白经过４３６５１５８．３倍稀释后，能完全抑制１００－１０００ＴＣＩＤ↓［５０］的水疱性口炎病毒的攻击。与天然的鸡α干扰素相比，有更强的抗病毒作用，其抗病毒作用提高了６．８倍。试验还测定该基因表达的蛋白可抑制新城疫病毒和禽流感病毒的增殖，且高浓度的干扰素作用更明显。
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一种纤维素酶、编码基因、重组载体及其应用
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技术描述： 本发明提供了一种纤维素酶及其编码基因、重组载体和遗传工程化宿主细胞，属于生物工程技术领域。本发明的纤维素酶基因来源于土壤宏基因组文库，该蛋白酶由678个氨基酸残基组成，理论等电点pI为4.97，理论分子量Mw为73.17kDa，SDS-PAGE结果显示其表观分子量约为70kDa。经蛋白质数据库和核苷酸数据库分别进行搜寻比较，未发现有任何相同氨基酸序列和核苷酸序列，属于新型的纤维素酶，命名为GHF9 CelY。该纤维素酶的最适pH范围在6.5-7.0之间，最适酶反应温度为37℃。 成果用途：本发明纤维素酶在植物中药（银杏叶片）有效成分提取中具有很好的应用前景。在37℃下，pH7.0的缓冲体系中，使用终浓度为0.8mg/ml的GHF9 CelY处理银杏叶片粉末1小时，可以有效地提高其总黄酮的提取率,提高率达19.43%。
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一种双基因共表达重组载体及其构建方法和在三孢布拉霉中的应用
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技术简介
p 摘要：本发明公开了一种双基因共表达重组载体，在初始载体中携带有基因表达框序列syn，所述基因表达框序列syn含有：终止子—多克隆位点—双向启动子序列PCarB—TA克隆制备序列—终止子，所述基因表达框序列syn的核苷酸序列如SEQ.ID.NO:1所示；在所述初始载体中还携带有潮霉素抗性基因hygR，所述潮霉素抗性基因hygR的核苷酸序列如SEQ.ID.NO:2；具体构建了一个双基因共表达重组载体pPMPT，为在初始载体pATZ中含有基因表达框序列syn和潮霉素抗性基因hygR，其核苷酸序列如SEQ.ID.NO:3所示，同时还公开了该载体的构建方法以及在丝状真菌三孢布拉霉中的应用。本发明提供的重组载体可在一个质粒上同时添加两个基因，而且通过农杆菌介导可以整合到丝状真菌基因组中，以单拷贝插入，实现双基因共表达，其遗传稳定。 /p
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蚕类蜕皮激素受体EcR/USP蛋白复合物的表达及纯化的方法
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技术类型：发明
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技术简介
本发明涉及蚕类蜕皮激素受体EcR/USP蛋白复合物的表达及纯化的方法，包括以下步骤：构建USP-pET-28a(+)重组载体和EcR-pET21b-MDX12重组载体；将所述USP-pET-28a(+)重组载体和EcR-pET21b-MDX12重组载体转化表达菌，培养，诱导表达重组目的蛋白复合物；将所得的重组目的蛋白复合物经镍离子亲和层析及分子筛层析进行纯化。本发明通过构建重组表达载体EcR-pET21b-MDX12、USP-pET-28a(+)，将两个载体进行共转，诱导两种蛋白的共表达，从而得到大量的重组目的蛋白复合物，然后经镍离子亲和层析柱和分子筛分离纯化可以得到纯度较高的目的蛋白。
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针对NFAT3基因靶点的短发卡RNA、重组载体及应用
成熟度：正在研发
技术类型：发明
应用行业：制造业
技术简介
摘要：本发明公开了一种针对NFAT3基因靶点的短发卡RNA、重组载体及应用，所述基因靶点的序列如SEQ ID NO3所示，所述RNA的正义链序列如SEQ ID NO1所示，所述RNA的反义链序列如SEQ ID NO2所示。针对NFAT3基因靶点设计了短发卡RNA序列，并构建了相应的重组载体，该重组载体能在宿主细胞内转录得到NFAT3‑shRNA，经宿主细胞加工后可生成小分子干扰RNA，并靶向NFAT3的信使RNA，降低NFAT3的表达，导致基因沉默效应，有效抑制黑色素瘤细胞的增殖，具有抗癌应用价值，为进一步研究NFAT3在皮肤癌细胞中的功能及靶向NFAT3的药物研发提供了基础。
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针对SOX4基因靶点的小干扰RNA、短发卡RNA及重组载体和应用
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技术类型：发明
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技术简介
摘要：本发明涉及分子生物学、基因工程技术以及生物医药领域，具体涉及一种针对SOX4基因靶点的小干扰RNA、短发卡RNA及重组载体和应用。小干扰RNA包括SEQ ID NO.1所示的正义链和SEQ ID NO.2所示的反义链。短发卡RNA包括SEQ ID NO.3所示的正义链和SEQ ID NO.4所示的反义链。包含短发卡RNA的重组载体能在宿主细胞内转录得到SOX4‑shRNA，经宿主细胞加工后可生成小分子干扰RNA，并靶向SOX4的信使RNA，降低SOX4的表达，导致基因沉默效应，有效抑制食管鳞癌细胞的增殖并促进化疗药物阿霉素诱导的食管鳞癌细胞的衰老，具有抗肿瘤应用价值，为进一步研究SOX4在肿瘤细胞衰老逃逸中的功能及靶向SOX4的药物研发提供了基础。
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一种宏基因来源的α‑糖苷酶、编码基因、载体、工程菌及应用
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技术类型：发明
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技术简介
p 摘要：本发明一种宏基因来源的α‑糖苷酶、编码基因、载体、工程菌及应用，属于基因工程技术领域。宏基因来源的α‑糖苷酶XcG‑B的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。编码α‑糖苷酶XcG‑B的基因。基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。一种含有所述基因的重组载体。一种由所述重组载体转化得到的基因工程菌。所述基因在制备重组α‑糖苷酶XcG‑B中的应用。所述的α‑糖苷酶XcG‑B在催化麦芽糖与含羟基底物的转糖苷反应中的应用。本发明具有以下优点α‑糖苷酶XcG‑B易于原核表达，可以采用重组载体、菌株及制备方法高效生产本发明α‑糖苷酶；而且，本发明酶的制备方法简便高效，易于大量表达，适于工业化生产。 /p
找到9项技术成果数据。
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表达光敏感型腺苷酸环化酶的重组载体、其应用、构建方法及脱髓鞘疾病的治疗系统
成熟度：正在研发
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应用行业：制造业
技术简介
本发明涉及一种用于表达光敏感型腺苷酸环化酶的重组载体、其应用、构建方法及脱髓鞘疾病的治疗系统。该用于表达光敏感型腺苷酸环化酶的重组载体包括病毒载体和包装于所述病毒载体中的带有光敏感型腺苷酸环化酶基因序列的穿梭质粒，所述光敏感型腺苷酸环化酶基因序列包含少突胶质细胞和施万细胞的特异性启动子。使用该用于表达光敏感型腺苷酸环化酶的重组载体感染脱髓鞘部位，使光敏感型腺苷酸环化酶基因序列只在少突胶质细胞和施万细胞中表达，在光刺激下，能定向调节上述两种细胞中的cAMP水平，从而促进髓鞘再生和稳定成髓，实现细胞特异性治疗脱髓鞘疾病的目的。
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用于高通量酵母双杂交技术的重组载体及其大规模筛选互作蛋白的方法
成熟度：正在研发
技术类型：发明
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技术简介
摘要：本发明公开了一种用于酵母双杂交的相关重组载体及其利用高通量测序技术大规模筛选互作蛋白的酵母双杂交的方法，该方法依赖于一种整合酶Integrase phiC31(En)的特有整合功能，通过对传统酵母双杂交载体的改造，使其与高通量测序技术有机结合，实现成百上千的Bait蛋白同时对Prey蛋白文库的筛选工作。将整合酶及其特异识别的核苷酸序列插入Matchmaker GAL4系统的载体中，通过酵母双杂交的方法使重组载体进入同一个酵母细胞，整合酶发生作用，将其特异识别的核苷酸序列及其紧邻的核苷酸序列进行特异性定向重排，从而使得两个重组载体融合成一个融合载体，此时猎物和诱饵蛋白序列被定向连接成融合载体上的一段新的序列，通过扩增、高通量测序，从而经济高效地筛选相互作用蛋白质并构建全面的蛋白互作网络图谱。
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一种重组鸡α干扰素基因及其重组载体
成熟度：正在研发
技术类型：-
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技术简介
本发明涉及一种新型重组鸡α干扰素基因序列，并构建其重组表达载体，属于用分子生物学方法获得的基因工程生物制品。将新设计的鸡α干扰素的基因序列重组到ｐＰＩＣＺα－Ａ载体，然后通过电转化方式整合到酵母菌上的特定位置。并采用毕赤酵母表达系统表达外源基因，有利于鸡干扰素商业化生产。该基因组表达的蛋白经过４３６５１５８．３倍稀释后，能完全抑制１００－１０００ＴＣＩＤ↓［５０］的水疱性口炎病毒的攻击。与天然的鸡α干扰素相比，有更强的抗病毒作用，其抗病毒作用提高了６．８倍。试验还测定该基因表达的蛋白可抑制新城疫病毒和禽流感病毒的增殖，且高浓度的干扰素作用更明显。
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一种纤维素酶、编码基因、重组载体及其应用
成熟度：正在研发
技术类型：发明
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技术简介
技术描述： 本发明提供了一种纤维素酶及其编码基因、重组载体和遗传工程化宿主细胞，属于生物工程技术领域。本发明的纤维素酶基因来源于土壤宏基因组文库，该蛋白酶由678个氨基酸残基组成，理论等电点pI为4.97，理论分子量Mw为73.17kDa，SDS-PAGE结果显示其表观分子量约为70kDa。经蛋白质数据库和核苷酸数据库分别进行搜寻比较，未发现有任何相同氨基酸序列和核苷酸序列，属于新型的纤维素酶，命名为GHF9 CelY。该纤维素酶的最适pH范围在6.5-7.0之间，最适酶反应温度为37℃。 成果用途：本发明纤维素酶在植物中药（银杏叶片）有效成分提取中具有很好的应用前景。在37℃下，pH7.0的缓冲体系中，使用终浓度为0.8mg/ml的GHF9 CelY处理银杏叶片粉末1小时，可以有效地提高其总黄酮的提取率,提高率达19.43%。
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一种双基因共表达重组载体及其构建方法和在三孢布拉霉中的应用
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技术简介
p 摘要：本发明公开了一种双基因共表达重组载体，在初始载体中携带有基因表达框序列syn，所述基因表达框序列syn含有：终止子—多克隆位点—双向启动子序列PCarB—TA克隆制备序列—终止子，所述基因表达框序列syn的核苷酸序列如SEQ.ID.NO:1所示；在所述初始载体中还携带有潮霉素抗性基因hygR，所述潮霉素抗性基因hygR的核苷酸序列如SEQ.ID.NO:2；具体构建了一个双基因共表达重组载体pPMPT，为在初始载体pATZ中含有基因表达框序列syn和潮霉素抗性基因hygR，其核苷酸序列如SEQ.ID.NO:3所示，同时还公开了该载体的构建方法以及在丝状真菌三孢布拉霉中的应用。本发明提供的重组载体可在一个质粒上同时添加两个基因，而且通过农杆菌介导可以整合到丝状真菌基因组中，以单拷贝插入，实现双基因共表达，其遗传稳定。 /p
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蚕类蜕皮激素受体EcR/USP蛋白复合物的表达及纯化的方法
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技术类型：发明
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技术简介
本发明涉及蚕类蜕皮激素受体EcR/USP蛋白复合物的表达及纯化的方法，包括以下步骤：构建USP-pET-28a(+)重组载体和EcR-pET21b-MDX12重组载体；将所述USP-pET-28a(+)重组载体和EcR-pET21b-MDX12重组载体转化表达菌，培养，诱导表达重组目的蛋白复合物；将所得的重组目的蛋白复合物经镍离子亲和层析及分子筛层析进行纯化。本发明通过构建重组表达载体EcR-pET21b-MDX12、USP-pET-28a(+)，将两个载体进行共转，诱导两种蛋白的共表达，从而得到大量的重组目的蛋白复合物，然后经镍离子亲和层析柱和分子筛分离纯化可以得到纯度较高的目的蛋白。
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针对NFAT3基因靶点的短发卡RNA、重组载体及应用
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摘要：本发明公开了一种针对NFAT3基因靶点的短发卡RNA、重组载体及应用，所述基因靶点的序列如SEQ ID NO3所示，所述RNA的正义链序列如SEQ ID NO1所示，所述RNA的反义链序列如SEQ ID NO2所示。针对NFAT3基因靶点设计了短发卡RNA序列，并构建了相应的重组载体，该重组载体能在宿主细胞内转录得到NFAT3‑shRNA，经宿主细胞加工后可生成小分子干扰RNA，并靶向NFAT3的信使RNA，降低NFAT3的表达，导致基因沉默效应，有效抑制黑色素瘤细胞的增殖，具有抗癌应用价值，为进一步研究NFAT3在皮肤癌细胞中的功能及靶向NFAT3的药物研发提供了基础。
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针对SOX4基因靶点的小干扰RNA、短发卡RNA及重组载体和应用
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摘要：本发明涉及分子生物学、基因工程技术以及生物医药领域，具体涉及一种针对SOX4基因靶点的小干扰RNA、短发卡RNA及重组载体和应用。小干扰RNA包括SEQ ID NO.1所示的正义链和SEQ ID NO.2所示的反义链。短发卡RNA包括SEQ ID NO.3所示的正义链和SEQ ID NO.4所示的反义链。包含短发卡RNA的重组载体能在宿主细胞内转录得到SOX4‑shRNA，经宿主细胞加工后可生成小分子干扰RNA，并靶向SOX4的信使RNA，降低SOX4的表达，导致基因沉默效应，有效抑制食管鳞癌细胞的增殖并促进化疗药物阿霉素诱导的食管鳞癌细胞的衰老，具有抗肿瘤应用价值，为进一步研究SOX4在肿瘤细胞衰老逃逸中的功能及靶向SOX4的药物研发提供了基础。
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一种宏基因来源的α‑糖苷酶、编码基因、载体、工程菌及应用
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p 摘要：本发明一种宏基因来源的α‑糖苷酶、编码基因、载体、工程菌及应用，属于基因工程技术领域。宏基因来源的α‑糖苷酶XcG‑B的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。编码α‑糖苷酶XcG‑B的基因。基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。一种含有所述基因的重组载体。一种由所述重组载体转化得到的基因工程菌。所述基因在制备重组α‑糖苷酶XcG‑B中的应用。所述的α‑糖苷酶XcG‑B在催化麦芽糖与含羟基底物的转糖苷反应中的应用。本发明具有以下优点α‑糖苷酶XcG‑B易于原核表达，可以采用重组载体、菌株及制备方法高效生产本发明α‑糖苷酶；而且，本发明酶的制备方法简便高效，易于大量表达，适于工业化生产。 /p
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表达光敏感型腺苷酸环化酶的重组载体、其应用、构建方法及脱髓鞘疾病的治疗系统
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本发明涉及一种用于表达光敏感型腺苷酸环化酶的重组载体、其应用、构建方法及脱髓鞘疾病的治疗系统。该用于表达光敏感型腺苷酸环化酶的重组载体包括病毒载体和包装于所述病毒载体中的带有光敏感型腺苷酸环化酶基因序列的穿梭质粒，所述光敏感型腺苷酸环化酶基因序列包含少突胶质细胞和施万细胞的特异性启动子。使用该用于表达光敏感型腺苷酸环化酶的重组载体感染脱髓鞘部位，使光敏感型腺苷酸环化酶基因序列只在少突胶质细胞和施万细胞中表达，在光刺激下，能定向调节上述两种细胞中的cAMP水平，从而促进髓鞘再生和稳定成髓，实现细胞特异性治疗脱髓鞘疾病的目的。
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用于高通量酵母双杂交技术的重组载体及其大规模筛选互作蛋白的方法
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应用行业：制造业
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摘要：本发明公开了一种用于酵母双杂交的相关重组载体及其利用高通量测序技术大规模筛选互作蛋白的酵母双杂交的方法，该方法依赖于一种整合酶Integrase phiC31(En)的特有整合功能，通过对传统酵母双杂交载体的改造，使其与高通量测序技术有机结合，实现成百上千的Bait蛋白同时对Prey蛋白文库的筛选工作。将整合酶及其特异识别的核苷酸序列插入Matchmaker GAL4系统的载体中，通过酵母双杂交的方法使重组载体进入同一个酵母细胞，整合酶发生作用，将其特异识别的核苷酸序列及其紧邻的核苷酸序列进行特异性定向重排，从而使得两个重组载体融合成一个融合载体，此时猎物和诱饵蛋白序列被定向连接成融合载体上的一段新的序列，通过扩增、高通量测序，从而经济高效地筛选相互作用蛋白质并构建全面的蛋白互作网络图谱。
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应用行业：制造业
技术简介
本发明涉及一种新型重组鸡α干扰素基因序列，并构建其重组表达载体，属于用分子生物学方法获得的基因工程生物制品。将新设计的鸡α干扰素的基因序列重组到ｐＰＩＣＺα－Ａ载体，然后通过电转化方式整合到酵母菌上的特定位置。并采用毕赤酵母表达系统表达外源基因，有利于鸡干扰素商业化生产。该基因组表达的蛋白经过４３６５１５８．３倍稀释后，能完全抑制１００－１０００ＴＣＩＤ↓［５０］的水疱性口炎病毒的攻击。与天然的鸡α干扰素相比，有更强的抗病毒作用，其抗病毒作用提高了６．８倍。试验还测定该基因表达的蛋白可抑制新城疫病毒和禽流感病毒的增殖，且高浓度的干扰素作用更明显。
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一种纤维素酶、编码基因、重组载体及其应用
成熟度：正在研发
技术类型：发明
应用行业：制造业
技术简介
技术描述： 本发明提供了一种纤维素酶及其编码基因、重组载体和遗传工程化宿主细胞，属于生物工程技术领域。本发明的纤维素酶基因来源于土壤宏基因组文库，该蛋白酶由678个氨基酸残基组成，理论等电点pI为4.97，理论分子量Mw为73.17kDa，SDS-PAGE结果显示其表观分子量约为70kDa。经蛋白质数据库和核苷酸数据库分别进行搜寻比较，未发现有任何相同氨基酸序列和核苷酸序列，属于新型的纤维素酶，命名为GHF9 CelY。该纤维素酶的最适pH范围在6.5-7.0之间，最适酶反应温度为37℃。 成果用途：本发明纤维素酶在植物中药（银杏叶片）有效成分提取中具有很好的应用前景。在37℃下，pH7.0的缓冲体系中，使用终浓度为0.8mg/ml的GHF9 CelY处理银杏叶片粉末1小时，可以有效地提高其总黄酮的提取率,提高率达19.43%。
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一种双基因共表达重组载体及其构建方法和在三孢布拉霉中的应用
成熟度：正在研发
技术类型：发明
应用行业：制造业
技术简介
p 摘要：本发明公开了一种双基因共表达重组载体，在初始载体中携带有基因表达框序列syn，所述基因表达框序列syn含有：终止子—多克隆位点—双向启动子序列PCarB—TA克隆制备序列—终止子，所述基因表达框序列syn的核苷酸序列如SEQ.ID.NO:1所示；在所述初始载体中还携带有潮霉素抗性基因hygR，所述潮霉素抗性基因hygR的核苷酸序列如SEQ.ID.NO:2；具体构建了一个双基因共表达重组载体pPMPT，为在初始载体pATZ中含有基因表达框序列syn和潮霉素抗性基因hygR，其核苷酸序列如SEQ.ID.NO:3所示，同时还公开了该载体的构建方法以及在丝状真菌三孢布拉霉中的应用。本发明提供的重组载体可在一个质粒上同时添加两个基因，而且通过农杆菌介导可以整合到丝状真菌基因组中，以单拷贝插入，实现双基因共表达，其遗传稳定。 /p
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蚕类蜕皮激素受体EcR/USP蛋白复合物的表达及纯化的方法
成熟度：正在研发
技术类型：发明
应用行业：制造业
技术简介
本发明涉及蚕类蜕皮激素受体EcR/USP蛋白复合物的表达及纯化的方法，包括以下步骤：构建USP-pET-28a(+)重组载体和EcR-pET21b-MDX12重组载体；将所述USP-pET-28a(+)重组载体和EcR-pET21b-MDX12重组载体转化表达菌，培养，诱导表达重组目的蛋白复合物；将所得的重组目的蛋白复合物经镍离子亲和层析及分子筛层析进行纯化。本发明通过构建重组表达载体EcR-pET21b-MDX12、USP-pET-28a(+)，将两个载体进行共转，诱导两种蛋白的共表达，从而得到大量的重组目的蛋白复合物，然后经镍离子亲和层析柱和分子筛分离纯化可以得到纯度较高的目的蛋白。
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针对NFAT3基因靶点的短发卡RNA、重组载体及应用
成熟度：正在研发
技术类型：发明
应用行业：制造业
技术简介
摘要：本发明公开了一种针对NFAT3基因靶点的短发卡RNA、重组载体及应用，所述基因靶点的序列如SEQ ID NO3所示，所述RNA的正义链序列如SEQ ID NO1所示，所述RNA的反义链序列如SEQ ID NO2所示。针对NFAT3基因靶点设计了短发卡RNA序列，并构建了相应的重组载体，该重组载体能在宿主细胞内转录得到NFAT3‑shRNA，经宿主细胞加工后可生成小分子干扰RNA，并靶向NFAT3的信使RNA，降低NFAT3的表达，导致基因沉默效应，有效抑制黑色素瘤细胞的增殖，具有抗癌应用价值，为进一步研究NFAT3在皮肤癌细胞中的功能及靶向NFAT3的药物研发提供了基础。
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针对SOX4基因靶点的小干扰RNA、短发卡RNA及重组载体和应用
成熟度：正在研发
技术类型：发明
应用行业：制造业
技术简介
摘要：本发明涉及分子生物学、基因工程技术以及生物医药领域，具体涉及一种针对SOX4基因靶点的小干扰RNA、短发卡RNA及重组载体和应用。小干扰RNA包括SEQ ID NO.1所示的正义链和SEQ ID NO.2所示的反义链。短发卡RNA包括SEQ ID NO.3所示的正义链和SEQ ID NO.4所示的反义链。包含短发卡RNA的重组载体能在宿主细胞内转录得到SOX4‑shRNA，经宿主细胞加工后可生成小分子干扰RNA，并靶向SOX4的信使RNA，降低SOX4的表达，导致基因沉默效应，有效抑制食管鳞癌细胞的增殖并促进化疗药物阿霉素诱导的食管鳞癌细胞的衰老，具有抗肿瘤应用价值，为进一步研究SOX4在肿瘤细胞衰老逃逸中的功能及靶向SOX4的药物研发提供了基础。
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一种宏基因来源的α‑糖苷酶、编码基因、载体、工程菌及应用
成熟度：正在研发
技术类型：发明
应用行业：制造业
技术简介
p 摘要：本发明一种宏基因来源的α‑糖苷酶、编码基因、载体、工程菌及应用，属于基因工程技术领域。宏基因来源的α‑糖苷酶XcG‑B的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。编码α‑糖苷酶XcG‑B的基因。基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。一种含有所述基因的重组载体。一种由所述重组载体转化得到的基因工程菌。所述基因在制备重组α‑糖苷酶XcG‑B中的应用。所述的α‑糖苷酶XcG‑B在催化麦芽糖与含羟基底物的转糖苷反应中的应用。本发明具有以下优点α‑糖苷酶XcG‑B易于原核表达，可以采用重组载体、菌株及制备方法高效生产本发明α‑糖苷酶；而且，本发明酶的制备方法简便高效，易于大量表达，适于工业化生产。 /p
找到9项技术成果数据。
找技术>-
表达光敏感型腺苷酸环化酶的重组载体、其应用、构建方法及脱髓鞘疾病的治疗系统
成熟度：正在研发
技术类型：发明
应用行业：制造业
技术简介
本发明涉及一种用于表达光敏感型腺苷酸环化酶的重组载体、其应用、构建方法及脱髓鞘疾病的治疗系统。该用于表达光敏感型腺苷酸环化酶的重组载体包括病毒载体和包装于所述病毒载体中的带有光敏感型腺苷酸环化酶基因序列的穿梭质粒，所述光敏感型腺苷酸环化酶基因序列包含少突胶质细胞和施万细胞的特异性启动子。使用该用于表达光敏感型腺苷酸环化酶的重组载体感染脱髓鞘部位，使光敏感型腺苷酸环化酶基因序列只在少突胶质细胞和施万细胞中表达，在光刺激下，能定向调节上述两种细胞中的cAMP水平，从而促进髓鞘再生和稳定成髓，实现细胞特异性治疗脱髓鞘疾病的目的。
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用于高通量酵母双杂交技术的重组载体及其大规模筛选互作蛋白的方法
成熟度：正在研发
技术类型：发明
应用行业：制造业
技术简介
摘要：本发明公开了一种用于酵母双杂交的相关重组载体及其利用高通量测序技术大规模筛选互作蛋白的酵母双杂交的方法，该方法依赖于一种整合酶Integrase phiC31(En)的特有整合功能，通过对传统酵母双杂交载体的改造，使其与高通量测序技术有机结合，实现成百上千的Bait蛋白同时对Prey蛋白文库的筛选工作。将整合酶及其特异识别的核苷酸序列插入Matchmaker GAL4系统的载体中，通过酵母双杂交的方法使重组载体进入同一个酵母细胞，整合酶发生作用，将其特异识别的核苷酸序列及其紧邻的核苷酸序列进行特异性定向重排，从而使得两个重组载体融合成一个融合载体，此时猎物和诱饵蛋白序列被定向连接成融合载体上的一段新的序列，通过扩增、高通量测序，从而经济高效地筛选相互作用蛋白质并构建全面的蛋白互作网络图谱。
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一种重组鸡α干扰素基因及其重组载体
成熟度：正在研发
技术类型：-
应用行业：制造业
技术简介
本发明涉及一种新型重组鸡α干扰素基因序列，并构建其重组表达载体，属于用分子生物学方法获得的基因工程生物制品。将新设计的鸡α干扰素的基因序列重组到ｐＰＩＣＺα－Ａ载体，然后通过电转化方式整合到酵母菌上的特定位置。并采用毕赤酵母表达系统表达外源基因，有利于鸡干扰素商业化生产。该基因组表达的蛋白经过４３６５１５８．３倍稀释后，能完全抑制１００－１０００ＴＣＩＤ↓［５０］的水疱性口炎病毒的攻击。与天然的鸡α干扰素相比，有更强的抗病毒作用，其抗病毒作用提高了６．８倍。试验还测定该基因表达的蛋白可抑制新城疫病毒和禽流感病毒的增殖，且高浓度的干扰素作用更明显。
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一种纤维素酶、编码基因、重组载体及其应用
成熟度：正在研发
技术类型：发明
应用行业：制造业
技术简介
技术描述： 本发明提供了一种纤维素酶及其编码基因、重组载体和遗传工程化宿主细胞，属于生物工程技术领域。本发明的纤维素酶基因来源于土壤宏基因组文库，该蛋白酶由678个氨基酸残基组成，理论等电点pI为4.97，理论分子量Mw为73.17kDa，SDS-PAGE结果显示其表观分子量约为70kDa。经蛋白质数据库和核苷酸数据库分别进行搜寻比较，未发现有任何相同氨基酸序列和核苷酸序列，属于新型的纤维素酶，命名为GHF9 CelY。该纤维素酶的最适pH范围在6.5-7.0之间，最适酶反应温度为37℃。 成果用途：本发明纤维素酶在植物中药（银杏叶片）有效成分提取中具有很好的应用前景。在37℃下，pH7.0的缓冲体系中，使用终浓度为0.8mg/ml的GHF9 CelY处理银杏叶片粉末1小时，可以有效地提高其总黄酮的提取率,提高率达19.43%。
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一种双基因共表达重组载体及其构建方法和在三孢布拉霉中的应用
成熟度：正在研发
技术类型：发明
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技术简介
p 摘要：本发明公开了一种双基因共表达重组载体，在初始载体中携带有基因表达框序列syn，所述基因表达框序列syn含有：终止子—多克隆位点—双向启动子序列PCarB—TA克隆制备序列—终止子，所述基因表达框序列syn的核苷酸序列如SEQ.ID.NO:1所示；在所述初始载体中还携带有潮霉素抗性基因hygR，所述潮霉素抗性基因hygR的核苷酸序列如SEQ.ID.NO:2；具体构建了一个双基因共表达重组载体pPMPT，为在初始载体pATZ中含有基因表达框序列syn和潮霉素抗性基因hygR，其核苷酸序列如SEQ.ID.NO:3所示，同时还公开了该载体的构建方法以及在丝状真菌三孢布拉霉中的应用。本发明提供的重组载体可在一个质粒上同时添加两个基因，而且通过农杆菌介导可以整合到丝状真菌基因组中，以单拷贝插入，实现双基因共表达，其遗传稳定。 /p
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蚕类蜕皮激素受体EcR/USP蛋白复合物的表达及纯化的方法
成熟度：正在研发
技术类型：发明
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本发明涉及蚕类蜕皮激素受体EcR/USP蛋白复合物的表达及纯化的方法，包括以下步骤：构建USP-pET-28a(+)重组载体和EcR-pET21b-MDX12重组载体；将所述USP-pET-28a(+)重组载体和EcR-pET21b-MDX12重组载体转化表达菌，培养，诱导表达重组目的蛋白复合物；将所得的重组目的蛋白复合物经镍离子亲和层析及分子筛层析进行纯化。本发明通过构建重组表达载体EcR-pET21b-MDX12、USP-pET-28a(+)，将两个载体进行共转，诱导两种蛋白的共表达，从而得到大量的重组目的蛋白复合物，然后经镍离子亲和层析柱和分子筛分离纯化可以得到纯度较高的目的蛋白。
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针对NFAT3基因靶点的短发卡RNA、重组载体及应用
成熟度：正在研发
技术类型：发明
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摘要：本发明公开了一种针对NFAT3基因靶点的短发卡RNA、重组载体及应用，所述基因靶点的序列如SEQ ID NO3所示，所述RNA的正义链序列如SEQ ID NO1所示，所述RNA的反义链序列如SEQ ID NO2所示。针对NFAT3基因靶点设计了短发卡RNA序列，并构建了相应的重组载体，该重组载体能在宿主细胞内转录得到NFAT3‑shRNA，经宿主细胞加工后可生成小分子干扰RNA，并靶向NFAT3的信使RNA，降低NFAT3的表达，导致基因沉默效应，有效抑制黑色素瘤细胞的增殖，具有抗癌应用价值，为进一步研究NFAT3在皮肤癌细胞中的功能及靶向NFAT3的药物研发提供了基础。
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针对SOX4基因靶点的小干扰RNA、短发卡RNA及重组载体和应用
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摘要：本发明涉及分子生物学、基因工程技术以及生物医药领域，具体涉及一种针对SOX4基因靶点的小干扰RNA、短发卡RNA及重组载体和应用。小干扰RNA包括SEQ ID NO.1所示的正义链和SEQ ID NO.2所示的反义链。短发卡RNA包括SEQ ID NO.3所示的正义链和SEQ ID NO.4所示的反义链。包含短发卡RNA的重组载体能在宿主细胞内转录得到SOX4‑shRNA，经宿主细胞加工后可生成小分子干扰RNA，并靶向SOX4的信使RNA，降低SOX4的表达，导致基因沉默效应，有效抑制食管鳞癌细胞的增殖并促进化疗药物阿霉素诱导的食管鳞癌细胞的衰老，具有抗肿瘤应用价值，为进一步研究SOX4在肿瘤细胞衰老逃逸中的功能及靶向SOX4的药物研发提供了基础。
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一种宏基因来源的α‑糖苷酶、编码基因、载体、工程菌及应用
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p 摘要：本发明一种宏基因来源的α‑糖苷酶、编码基因、载体、工程菌及应用，属于基因工程技术领域。宏基因来源的α‑糖苷酶XcG‑B的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。编码α‑糖苷酶XcG‑B的基因。基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。一种含有所述基因的重组载体。一种由所述重组载体转化得到的基因工程菌。所述基因在制备重组α‑糖苷酶XcG‑B中的应用。所述的α‑糖苷酶XcG‑B在催化麦芽糖与含羟基底物的转糖苷反应中的应用。本发明具有以下优点α‑糖苷酶XcG‑B易于原核表达，可以采用重组载体、菌株及制备方法高效生产本发明α‑糖苷酶；而且，本发明酶的制备方法简便高效，易于大量表达，适于工业化生产。 /p
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表达光敏感型腺苷酸环化酶的重组载体、其应用、构建方法及脱髓鞘疾病的治疗系统
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本发明涉及一种用于表达光敏感型腺苷酸环化酶的重组载体、其应用、构建方法及脱髓鞘疾病的治疗系统。该用于表达光敏感型腺苷酸环化酶的重组载体包括病毒载体和包装于所述病毒载体中的带有光敏感型腺苷酸环化酶基因序列的穿梭质粒，所述光敏感型腺苷酸环化酶基因序列包含少突胶质细胞和施万细胞的特异性启动子。使用该用于表达光敏感型腺苷酸环化酶的重组载体感染脱髓鞘部位，使光敏感型腺苷酸环化酶基因序列只在少突胶质细胞和施万细胞中表达，在光刺激下，能定向调节上述两种细胞中的cAMP水平，从而促进髓鞘再生和稳定成髓，实现细胞特异性治疗脱髓鞘疾病的目的。
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用于高通量酵母双杂交技术的重组载体及其大规模筛选互作蛋白的方法
成熟度：正在研发
技术类型：发明
应用行业：制造业
技术简介
摘要：本发明公开了一种用于酵母双杂交的相关重组载体及其利用高通量测序技术大规模筛选互作蛋白的酵母双杂交的方法，该方法依赖于一种整合酶Integrase phiC31(En)的特有整合功能，通过对传统酵母双杂交载体的改造，使其与高通量测序技术有机结合，实现成百上千的Bait蛋白同时对Prey蛋白文库的筛选工作。将整合酶及其特异识别的核苷酸序列插入Matchmaker GAL4系统的载体中，通过酵母双杂交的方法使重组载体进入同一个酵母细胞，整合酶发生作用，将其特异识别的核苷酸序列及其紧邻的核苷酸序列进行特异性定向重排，从而使得两个重组载体融合成一个融合载体，此时猎物和诱饵蛋白序列被定向连接成融合载体上的一段新的序列，通过扩增、高通量测序，从而经济高效地筛选相互作用蛋白质并构建全面的蛋白互作网络图谱。
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一种重组鸡α干扰素基因及其重组载体
成熟度：正在研发
技术类型：-
应用行业：制造业
技术简介
本发明涉及一种新型重组鸡α干扰素基因序列，并构建其重组表达载体，属于用分子生物学方法获得的基因工程生物制品。将新设计的鸡α干扰素的基因序列重组到ｐＰＩＣＺα－Ａ载体，然后通过电转化方式整合到酵母菌上的特定位置。并采用毕赤酵母表达系统表达外源基因，有利于鸡干扰素商业化生产。该基因组表达的蛋白经过４３６５１５８．３倍稀释后，能完全抑制１００－１０００ＴＣＩＤ↓［５０］的水疱性口炎病毒的攻击。与天然的鸡α干扰素相比，有更强的抗病毒作用，其抗病毒作用提高了６．８倍。试验还测定该基因表达的蛋白可抑制新城疫病毒和禽流感病毒的增殖，且高浓度的干扰素作用更明显。
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一种纤维素酶、编码基因、重组载体及其应用
成熟度：正在研发
技术类型：发明
应用行业：制造业
技术简介
技术描述： 本发明提供了一种纤维素酶及其编码基因、重组载体和遗传工程化宿主细胞，属于生物工程技术领域。本发明的纤维素酶基因来源于土壤宏基因组文库，该蛋白酶由678个氨基酸残基组成，理论等电点pI为4.97，理论分子量Mw为73.17kDa，SDS-PAGE结果显示其表观分子量约为70kDa。经蛋白质数据库和核苷酸数据库分别进行搜寻比较，未发现有任何相同氨基酸序列和核苷酸序列，属于新型的纤维素酶，命名为GHF9 CelY。该纤维素酶的最适pH范围在6.5-7.0之间，最适酶反应温度为37℃。 成果用途：本发明纤维素酶在植物中药（银杏叶片）有效成分提取中具有很好的应用前景。在37℃下，pH7.0的缓冲体系中，使用终浓度为0.8mg/ml的GHF9 CelY处理银杏叶片粉末1小时，可以有效地提高其总黄酮的提取率,提高率达19.43%。
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一种双基因共表达重组载体及其构建方法和在三孢布拉霉中的应用
成熟度：正在研发
技术类型：发明
应用行业：制造业
技术简介
p 摘要：本发明公开了一种双基因共表达重组载体，在初始载体中携带有基因表达框序列syn，所述基因表达框序列syn含有：终止子—多克隆位点—双向启动子序列PCarB—TA克隆制备序列—终止子，所述基因表达框序列syn的核苷酸序列如SEQ.ID.NO:1所示；在所述初始载体中还携带有潮霉素抗性基因hygR，所述潮霉素抗性基因hygR的核苷酸序列如SEQ.ID.NO:2；具体构建了一个双基因共表达重组载体pPMPT，为在初始载体pATZ中含有基因表达框序列syn和潮霉素抗性基因hygR，其核苷酸序列如SEQ.ID.NO:3所示，同时还公开了该载体的构建方法以及在丝状真菌三孢布拉霉中的应用。本发明提供的重组载体可在一个质粒上同时添加两个基因，而且通过农杆菌介导可以整合到丝状真菌基因组中，以单拷贝插入，实现双基因共表达，其遗传稳定。 /p
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蚕类蜕皮激素受体EcR/USP蛋白复合物的表达及纯化的方法
成熟度：正在研发
技术类型：发明
应用行业：制造业
技术简介
本发明涉及蚕类蜕皮激素受体EcR/USP蛋白复合物的表达及纯化的方法，包括以下步骤：构建USP-pET-28a(+)重组载体和EcR-pET21b-MDX12重组载体；将所述USP-pET-28a(+)重组载体和EcR-pET21b-MDX12重组载体转化表达菌，培养，诱导表达重组目的蛋白复合物；将所得的重组目的蛋白复合物经镍离子亲和层析及分子筛层析进行纯化。本发明通过构建重组表达载体EcR-pET21b-MDX12、USP-pET-28a(+)，将两个载体进行共转，诱导两种蛋白的共表达，从而得到大量的重组目的蛋白复合物，然后经镍离子亲和层析柱和分子筛分离纯化可以得到纯度较高的目的蛋白。
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针对NFAT3基因靶点的短发卡RNA、重组载体及应用
成熟度：正在研发
技术类型：发明
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摘要：本发明公开了一种针对NFAT3基因靶点的短发卡RNA、重组载体及应用，所述基因靶点的序列如SEQ ID NO3所示，所述RNA的正义链序列如SEQ ID NO1所示，所述RNA的反义链序列如SEQ ID NO2所示。针对NFAT3基因靶点设计了短发卡RNA序列，并构建了相应的重组载体，该重组载体能在宿主细胞内转录得到NFAT3‑shRNA，经宿主细胞加工后可生成小分子干扰RNA，并靶向NFAT3的信使RNA，降低NFAT3的表达，导致基因沉默效应，有效抑制黑色素瘤细胞的增殖，具有抗癌应用价值，为进一步研究NFAT3在皮肤癌细胞中的功能及靶向NFAT3的药物研发提供了基础。
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针对SOX4基因靶点的小干扰RNA、短发卡RNA及重组载体和应用
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技术简介
摘要：本发明涉及分子生物学、基因工程技术以及生物医药领域，具体涉及一种针对SOX4基因靶点的小干扰RNA、短发卡RNA及重组载体和应用。小干扰RNA包括SEQ ID NO.1所示的正义链和SEQ ID NO.2所示的反义链。短发卡RNA包括SEQ ID NO.3所示的正义链和SEQ ID NO.4所示的反义链。包含短发卡RNA的重组载体能在宿主细胞内转录得到SOX4‑shRNA，经宿主细胞加工后可生成小分子干扰RNA，并靶向SOX4的信使RNA，降低SOX4的表达，导致基因沉默效应，有效抑制食管鳞癌细胞的增殖并促进化疗药物阿霉素诱导的食管鳞癌细胞的衰老，具有抗肿瘤应用价值，为进一步研究SOX4在肿瘤细胞衰老逃逸中的功能及靶向SOX4的药物研发提供了基础。
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一种宏基因来源的α‑糖苷酶、编码基因、载体、工程菌及应用
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技术简介
p 摘要：本发明一种宏基因来源的α‑糖苷酶、编码基因、载体、工程菌及应用，属于基因工程技术领域。宏基因来源的α‑糖苷酶XcG‑B的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。编码α‑糖苷酶XcG‑B的基因。基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。一种含有所述基因的重组载体。一种由所述重组载体转化得到的基因工程菌。所述基因在制备重组α‑糖苷酶XcG‑B中的应用。所述的α‑糖苷酶XcG‑B在催化麦芽糖与含羟基底物的转糖苷反应中的应用。本发明具有以下优点α‑糖苷酶XcG‑B易于原核表达，可以采用重组载体、菌株及制备方法高效生产本发明α‑糖苷酶；而且，本发明酶的制备方法简便高效，易于大量表达，适于工业化生产。 /p
找到9项技术成果数据。
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表达光敏感型腺苷酸环化酶的重组载体、其应用、构建方法及脱髓鞘疾病的治疗系统
成熟度：正在研发
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技术简介
本发明涉及一种用于表达光敏感型腺苷酸环化酶的重组载体、其应用、构建方法及脱髓鞘疾病的治疗系统。该用于表达光敏感型腺苷酸环化酶的重组载体包括病毒载体和包装于所述病毒载体中的带有光敏感型腺苷酸环化酶基因序列的穿梭质粒，所述光敏感型腺苷酸环化酶基因序列包含少突胶质细胞和施万细胞的特异性启动子。使用该用于表达光敏感型腺苷酸环化酶的重组载体感染脱髓鞘部位，使光敏感型腺苷酸环化酶基因序列只在少突胶质细胞和施万细胞中表达，在光刺激下，能定向调节上述两种细胞中的cAMP水平，从而促进髓鞘再生和稳定成髓，实现细胞特异性治疗脱髓鞘疾病的目的。
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用于高通量酵母双杂交技术的重组载体及其大规模筛选互作蛋白的方法
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技术简介
摘要：本发明公开了一种用于酵母双杂交的相关重组载体及其利用高通量测序技术大规模筛选互作蛋白的酵母双杂交的方法，该方法依赖于一种整合酶Integrase phiC31(En)的特有整合功能，通过对传统酵母双杂交载体的改造，使其与高通量测序技术有机结合，实现成百上千的Bait蛋白同时对Prey蛋白文库的筛选工作。将整合酶及其特异识别的核苷酸序列插入Matchmaker GAL4系统的载体中，通过酵母双杂交的方法使重组载体进入同一个酵母细胞，整合酶发生作用，将其特异识别的核苷酸序列及其紧邻的核苷酸序列进行特异性定向重排，从而使得两个重组载体融合成一个融合载体，此时猎物和诱饵蛋白序列被定向连接成融合载体上的一段新的序列，通过扩增、高通量测序，从而经济高效地筛选相互作用蛋白质并构建全面的蛋白互作网络图谱。
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一种重组鸡α干扰素基因及其重组载体
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本发明涉及一种新型重组鸡α干扰素基因序列，并构建其重组表达载体，属于用分子生物学方法获得的基因工程生物制品。将新设计的鸡α干扰素的基因序列重组到ｐＰＩＣＺα－Ａ载体，然后通过电转化方式整合到酵母菌上的特定位置。并采用毕赤酵母表达系统表达外源基因，有利于鸡干扰素商业化生产。该基因组表达的蛋白经过４３６５１５８．３倍稀释后，能完全抑制１００－１０００ＴＣＩＤ↓［５０］的水疱性口炎病毒的攻击。与天然的鸡α干扰素相比，有更强的抗病毒作用，其抗病毒作用提高了６．８倍。试验还测定该基因表达的蛋白可抑制新城疫病毒和禽流感病毒的增殖，且高浓度的干扰素作用更明显。
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一种纤维素酶、编码基因、重组载体及其应用
成熟度：正在研发
技术类型：发明
应用行业：制造业
技术简介
技术描述： 本发明提供了一种纤维素酶及其编码基因、重组载体和遗传工程化宿主细胞，属于生物工程技术领域。本发明的纤维素酶基因来源于土壤宏基因组文库，该蛋白酶由678个氨基酸残基组成，理论等电点pI为4.97，理论分子量Mw为73.17kDa，SDS-PAGE结果显示其表观分子量约为70kDa。经蛋白质数据库和核苷酸数据库分别进行搜寻比较，未发现有任何相同氨基酸序列和核苷酸序列，属于新型的纤维素酶，命名为GHF9 CelY。该纤维素酶的最适pH范围在6.5-7.0之间，最适酶反应温度为37℃。 成果用途：本发明纤维素酶在植物中药（银杏叶片）有效成分提取中具有很好的应用前景。在37℃下，pH7.0的缓冲体系中，使用终浓度为0.8mg/ml的GHF9 CelY处理银杏叶片粉末1小时，可以有效地提高其总黄酮的提取率,提高率达19.43%。
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一种双基因共表达重组载体及其构建方法和在三孢布拉霉中的应用
成熟度：正在研发
技术类型：发明
应用行业：制造业
技术简介
p 摘要：本发明公开了一种双基因共表达重组载体，在初始载体中携带有基因表达框序列syn，所述基因表达框序列syn含有：终止子—多克隆位点—双向启动子序列PCarB—TA克隆制备序列—终止子，所述基因表达框序列syn的核苷酸序列如SEQ.ID.NO:1所示；在所述初始载体中还携带有潮霉素抗性基因hygR，所述潮霉素抗性基因hygR的核苷酸序列如SEQ.ID.NO:2；具体构建了一个双基因共表达重组载体pPMPT，为在初始载体pATZ中含有基因表达框序列syn和潮霉素抗性基因hygR，其核苷酸序列如SEQ.ID.NO:3所示，同时还公开了该载体的构建方法以及在丝状真菌三孢布拉霉中的应用。本发明提供的重组载体可在一个质粒上同时添加两个基因，而且通过农杆菌介导可以整合到丝状真菌基因组中，以单拷贝插入，实现双基因共表达，其遗传稳定。 /p
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蚕类蜕皮激素受体EcR/USP蛋白复合物的表达及纯化的方法
成熟度：正在研发
技术类型：发明
应用行业：制造业
技术简介
本发明涉及蚕类蜕皮激素受体EcR/USP蛋白复合物的表达及纯化的方法，包括以下步骤：构建USP-pET-28a(+)重组载体和EcR-pET21b-MDX12重组载体；将所述USP-pET-28a(+)重组载体和EcR-pET21b-MDX12重组载体转化表达菌，培养，诱导表达重组目的蛋白复合物；将所得的重组目的蛋白复合物经镍离子亲和层析及分子筛层析进行纯化。本发明通过构建重组表达载体EcR-pET21b-MDX12、USP-pET-28a(+)，将两个载体进行共转，诱导两种蛋白的共表达，从而得到大量的重组目的蛋白复合物，然后经镍离子亲和层析柱和分子筛分离纯化可以得到纯度较高的目的蛋白。
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针对NFAT3基因靶点的短发卡RNA、重组载体及应用
成熟度：正在研发
技术类型：发明
应用行业：制造业
技术简介
摘要：本发明公开了一种针对NFAT3基因靶点的短发卡RNA、重组载体及应用，所述基因靶点的序列如SEQ ID NO3所示，所述RNA的正义链序列如SEQ ID NO1所示，所述RNA的反义链序列如SEQ ID NO2所示。针对NFAT3基因靶点设计了短发卡RNA序列，并构建了相应的重组载体，该重组载体能在宿主细胞内转录得到NFAT3‑shRNA，经宿主细胞加工后可生成小分子干扰RNA，并靶向NFAT3的信使RNA，降低NFAT3的表达，导致基因沉默效应，有效抑制黑色素瘤细胞的增殖，具有抗癌应用价值，为进一步研究NFAT3在皮肤癌细胞中的功能及靶向NFAT3的药物研发提供了基础。
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针对SOX4基因靶点的小干扰RNA、短发卡RNA及重组载体和应用
成熟度：正在研发
技术类型：发明
应用行业：制造业
技术简介
摘要：本发明涉及分子生物学、基因工程技术以及生物医药领域，具体涉及一种针对SOX4基因靶点的小干扰RNA、短发卡RNA及重组载体和应用。小干扰RNA包括SEQ ID NO.1所示的正义链和SEQ ID NO.2所示的反义链。短发卡RNA包括SEQ ID NO.3所示的正义链和SEQ ID NO.4所示的反义链。包含短发卡RNA的重组载体能在宿主细胞内转录得到SOX4‑shRNA，经宿主细胞加工后可生成小分子干扰RNA，并靶向SOX4的信使RNA，降低SOX4的表达，导致基因沉默效应，有效抑制食管鳞癌细胞的增殖并促进化疗药物阿霉素诱导的食管鳞癌细胞的衰老，具有抗肿瘤应用价值，为进一步研究SOX4在肿瘤细胞衰老逃逸中的功能及靶向SOX4的药物研发提供了基础。
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一种宏基因来源的α‑糖苷酶、编码基因、载体、工程菌及应用
成熟度：正在研发
技术类型：发明
应用行业：制造业
技术简介
p 摘要：本发明一种宏基因来源的α‑糖苷酶、编码基因、载体、工程菌及应用，属于基因工程技术领域。宏基因来源的α‑糖苷酶XcG‑B的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。编码α‑糖苷酶XcG‑B的基因。基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。一种含有所述基因的重组载体。一种由所述重组载体转化得到的基因工程菌。所述基因在制备重组α‑糖苷酶XcG‑B中的应用。所述的α‑糖苷酶XcG‑B在催化麦芽糖与含羟基底物的转糖苷反应中的应用。本发明具有以下优点α‑糖苷酶XcG‑B易于原核表达，可以采用重组载体、菌株及制备方法高效生产本发明α‑糖苷酶；而且，本发明酶的制备方法简便高效，易于大量表达，适于工业化生产。 /p
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表达光敏感型腺苷酸环化酶的重组载体、其应用、构建方法及脱髓鞘疾病的治疗系统
成熟度：正在研发
技术类型：发明
应用行业：制造业
技术简介
本发明涉及一种用于表达光敏感型腺苷酸环化酶的重组载体、其应用、构建方法及脱髓鞘疾病的治疗系统。该用于表达光敏感型腺苷酸环化酶的重组载体包括病毒载体和包装于所述病毒载体中的带有光敏感型腺苷酸环化酶基因序列的穿梭质粒，所述光敏感型腺苷酸环化酶基因序列包含少突胶质细胞和施万细胞的特异性启动子。使用该用于表达光敏感型腺苷酸环化酶的重组载体感染脱髓鞘部位，使光敏感型腺苷酸环化酶基因序列只在少突胶质细胞和施万细胞中表达，在光刺激下，能定向调节上述两种细胞中的cAMP水平，从而促进髓鞘再生和稳定成髓，实现细胞特异性治疗脱髓鞘疾病的目的。
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用于高通量酵母双杂交技术的重组载体及其大规模筛选互作蛋白的方法
成熟度：正在研发
技术类型：发明
应用行业：制造业
技术简介
摘要：本发明公开了一种用于酵母双杂交的相关重组载体及其利用高通量测序技术大规模筛选互作蛋白的酵母双杂交的方法，该方法依赖于一种整合酶Integrase phiC31(En)的特有整合功能，通过对传统酵母双杂交载体的改造，使其与高通量测序技术有机结合，实现成百上千的Bait蛋白同时对Prey蛋白文库的筛选工作。将整合酶及其特异识别的核苷酸序列插入Matchmaker GAL4系统的载体中，通过酵母双杂交的方法使重组载体进入同一个酵母细胞，整合酶发生作用，将其特异识别的核苷酸序列及其紧邻的核苷酸序列进行特异性定向重排，从而使得两个重组载体融合成一个融合载体，此时猎物和诱饵蛋白序列被定向连接成融合载体上的一段新的序列，通过扩增、高通量测序，从而经济高效地筛选相互作用蛋白质并构建全面的蛋白互作网络图谱。
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一种重组鸡α干扰素基因及其重组载体
成熟度：正在研发
技术类型：-
应用行业：制造业
技术简介
本发明涉及一种新型重组鸡α干扰素基因序列，并构建其重组表达载体，属于用分子生物学方法获得的基因工程生物制品。将新设计的鸡α干扰素的基因序列重组到ｐＰＩＣＺα－Ａ载体，然后通过电转化方式整合到酵母菌上的特定位置。并采用毕赤酵母表达系统表达外源基因，有利于鸡干扰素商业化生产。该基因组表达的蛋白经过４３６５１５８．３倍稀释后，能完全抑制１００－１０００ＴＣＩＤ↓［５０］的水疱性口炎病毒的攻击。与天然的鸡α干扰素相比，有更强的抗病毒作用，其抗病毒作用提高了６．８倍。试验还测定该基因表达的蛋白可抑制新城疫病毒和禽流感病毒的增殖，且高浓度的干扰素作用更明显。
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一种纤维素酶、编码基因、重组载体及其应用
成熟度：正在研发
技术类型：发明
应用行业：制造业
技术简介
技术描述： 本发明提供了一种纤维素酶及其编码基因、重组载体和遗传工程化宿主细胞，属于生物工程技术领域。本发明的纤维素酶基因来源于土壤宏基因组文库，该蛋白酶由678个氨基酸残基组成，理论等电点pI为4.97，理论分子量Mw为73.17kDa，SDS-PAGE结果显示其表观分子量约为70kDa。经蛋白质数据库和核苷酸数据库分别进行搜寻比较，未发现有任何相同氨基酸序列和核苷酸序列，属于新型的纤维素酶，命名为GHF9 CelY。该纤维素酶的最适pH范围在6.5-7.0之间，最适酶反应温度为37℃。 成果用途：本发明纤维素酶在植物中药（银杏叶片）有效成分提取中具有很好的应用前景。在37℃下，pH7.0的缓冲体系中，使用终浓度为0.8mg/ml的GHF9 CelY处理银杏叶片粉末1小时，可以有效地提高其总黄酮的提取率,提高率达19.43%。
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一种双基因共表达重组载体及其构建方法和在三孢布拉霉中的应用
成熟度：正在研发
技术类型：发明
应用行业：制造业
技术简介
p 摘要：本发明公开了一种双基因共表达重组载体，在初始载体中携带有基因表达框序列syn，所述基因表达框序列syn含有：终止子—多克隆位点—双向启动子序列PCarB—TA克隆制备序列—终止子，所述基因表达框序列syn的核苷酸序列如SEQ.ID.NO:1所示；在所述初始载体中还携带有潮霉素抗性基因hygR，所述潮霉素抗性基因hygR的核苷酸序列如SEQ.ID.NO:2；具体构建了一个双基因共表达重组载体pPMPT，为在初始载体pATZ中含有基因表达框序列syn和潮霉素抗性基因hygR，其核苷酸序列如SEQ.ID.NO:3所示，同时还公开了该载体的构建方法以及在丝状真菌三孢布拉霉中的应用。本发明提供的重组载体可在一个质粒上同时添加两个基因，而且通过农杆菌介导可以整合到丝状真菌基因组中，以单拷贝插入，实现双基因共表达，其遗传稳定。 /p
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蚕类蜕皮激素受体EcR/USP蛋白复合物的表达及纯化的方法
成熟度：正在研发
技术类型：发明
应用行业：制造业
技术简介
本发明涉及蚕类蜕皮激素受体EcR/USP蛋白复合物的表达及纯化的方法，包括以下步骤：构建USP-pET-28a(+)重组载体和EcR-pET21b-MDX12重组载体；将所述USP-pET-28a(+)重组载体和EcR-pET21b-MDX12重组载体转化表达菌，培养，诱导表达重组目的蛋白复合物；将所得的重组目的蛋白复合物经镍离子亲和层析及分子筛层析进行纯化。本发明通过构建重组表达载体EcR-pET21b-MDX12、USP-pET-28a(+)，将两个载体进行共转，诱导两种蛋白的共表达，从而得到大量的重组目的蛋白复合物，然后经镍离子亲和层析柱和分子筛分离纯化可以得到纯度较高的目的蛋白。
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针对NFAT3基因靶点的短发卡RNA、重组载体及应用
成熟度：正在研发
技术类型：发明
应用行业：制造业
技术简介
摘要：本发明公开了一种针对NFAT3基因靶点的短发卡RNA、重组载体及应用，所述基因靶点的序列如SEQ ID NO3所示，所述RNA的正义链序列如SEQ ID NO1所示，所述RNA的反义链序列如SEQ ID NO2所示。针对NFAT3基因靶点设计了短发卡RNA序列，并构建了相应的重组载体，该重组载体能在宿主细胞内转录得到NFAT3‑shRNA，经宿主细胞加工后可生成小分子干扰RNA，并靶向NFAT3的信使RNA，降低NFAT3的表达，导致基因沉默效应，有效抑制黑色素瘤细胞的增殖，具有抗癌应用价值，为进一步研究NFAT3在皮肤癌细胞中的功能及靶向NFAT3的药物研发提供了基础。
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针对SOX4基因靶点的小干扰RNA、短发卡RNA及重组载体和应用
成熟度：正在研发
技术类型：发明
应用行业：制造业
技术简介
摘要：本发明涉及分子生物学、基因工程技术以及生物医药领域，具体涉及一种针对SOX4基因靶点的小干扰RNA、短发卡RNA及重组载体和应用。小干扰RNA包括SEQ ID NO.1所示的正义链和SEQ ID NO.2所示的反义链。短发卡RNA包括SEQ ID NO.3所示的正义链和SEQ ID NO.4所示的反义链。包含短发卡RNA的重组载体能在宿主细胞内转录得到SOX4‑shRNA，经宿主细胞加工后可生成小分子干扰RNA，并靶向SOX4的信使RNA，降低SOX4的表达，导致基因沉默效应，有效抑制食管鳞癌细胞的增殖并促进化疗药物阿霉素诱导的食管鳞癌细胞的衰老，具有抗肿瘤应用价值，为进一步研究SOX4在肿瘤细胞衰老逃逸中的功能及靶向SOX4的药物研发提供了基础。
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一种宏基因来源的α‑糖苷酶、编码基因、载体、工程菌及应用
成熟度：正在研发
技术类型：发明
应用行业：制造业
技术简介
p 摘要：本发明一种宏基因来源的α‑糖苷酶、编码基因、载体、工程菌及应用，属于基因工程技术领域。宏基因来源的α‑糖苷酶XcG‑B的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。编码α‑糖苷酶XcG‑B的基因。基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。一种含有所述基因的重组载体。一种由所述重组载体转化得到的基因工程菌。所述基因在制备重组α‑糖苷酶XcG‑B中的应用。所述的α‑糖苷酶XcG‑B在催化麦芽糖与含羟基底物的转糖苷反应中的应用。本发明具有以下优点α‑糖苷酶XcG‑B易于原核表达，可以采用重组载体、菌株及制备方法高效生产本发明α‑糖苷酶；而且，本发明酶的制备方法简便高效，易于大量表达，适于工业化生产。 /p