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新型长效聚多肽与突变体FGF21融合蛋白
成熟度：正在研发
技术类型：-
应用行业：卫生和社会工作,制造业
技术简介
1.创新点 非酒精性脂肪性肝炎(NASH)现已成为肝硬化甚至肝癌的重要因素之一，其发病机制复杂，受其多重因素影响，目前临床上缺乏针对性的有效疗法。针对NASH 发病机制中的多重因素选择成纤维细胞生长因子21(FGF21)为目标蛋白，利用本课题组建立的聚多肽PsTag筛选库和分 泌型E.coli筛选平台，设计并研究了具有自主知识产权的PsTag-FGF21融合蛋白。2.主要技术指标 该融合蛋白可以针对NASH发病机制中的多重因素发挥对NASH的治疗作用，同时解决了FGF21 不稳定、易聚集、半衰期短等影响其成药性的问题，药效学研究表明PsTag-FGF21对于NASH的治疗效果显著优于原型FGF21。目前已完成PsTag-FGF21的药学研究、药效及作用机制研究、药代动力学研究和部分毒理学研究。3.技术特点与优势： (1)全新结构分子、具有自主知识产权：全新设计的聚多肽与突变体FGF21融合蛋白 (PsTag-FGF21),克服原型FGF21不稳定、易聚集、半衰期短等影响其成药性的问题，对于NASH的治疗效果显著优于原型FGF21, 半衰期比原性FGF21 显著提高了约40倍； (2)靶点新颖、药效显著:可针对NASH 发病机制中的多重因素发挥其治疗NASH的效果，在多种NASH相关模型中表现出了显著的改善糖脂代谢和缓解纤维化的作用； (3)表达量高、适合工业生产：建立分泌型E.coli菌株筛选平台，筛选获得一系列突变的菌株；获得高表达PsTag-FGF21的胞外分泌菌株，简化纯化工艺，降低生产成本。
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一种胰蛋白酶抗性改良的脂肪酶突变体及其基因和应用
成熟度：正在研发
技术类型：发明
应用行业：制造业
技术简介
本发明属于基因工程和酶工程技术领域，具体内容涉及一种对胰蛋白酶抗性改良的脂肪酶lipY2‑m突变体K36G/K39T、R63G和K36G/K39T/R63G及其基因和应用。 本发明的三个突变体的胰蛋白酶抗性均有明显提高，经相同浓度的胰蛋白酶处理后，lipY2‑m的抗胰蛋白酶半衰期为41.5min，K36G/K39T的抗胰蛋白酶半衰期为43.9min；R63G的抗胰蛋白酶半衰期为45.7min；组合突变体K36G/K39T/R63G的抗胰蛋白酶半衰期为46.8min，对胰蛋白酶抗性的半衰期分别提高了5.8％、10.1％和12％，显示出了在治疗胰腺功能不全等疾病方面的潜在应用价值。
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一种碱性蛋白酶突变体及其基因、工程菌、制备方法和应用
成熟度：正在研发
技术类型：发明
应用行业：制造业
技术简介
本发明属于生物工程技术领域，具体涉及一种碱性蛋白酶突变体及其基因、工程菌、制备方法和应用。 本发明通过提取克劳氏芽孢杆菌基因组DNA，经PCR扩增得到野生型碱性蛋白酶基因序列，将扩增得到的野生型碱性蛋白酶基因通过易错PCR进行随机突变，通过高通量筛选后获得了若干个高活力碱性蛋白酶基因，再将这些高活力碱性蛋白酶基因进行DNA改组，通过筛选后获得八个更高活力的碱性蛋白酶突变体基因。 将这八个突变体基因构建重组载体并在枯草芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、克劳氏芽孢杆菌中成功表达，得到产酶活力提高的重组菌株，进一步通过发酵工艺优化获得新型碱性蛋白酶。
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一种D-阿洛酮糖-3-差向异构酶的突变体及其应用
成熟度：正在研发
技术类型：发明
应用行业：制造业
技术简介
本发明提供的D‑阿洛酮糖‑3‑差向异构酶突变体，其氨基酸序列是在如SEQ ID NO:1所示的D‑阿洛酮糖‑3‑差向异构酶氨基酸序列基础上，第124位的天冬酰胺替换为精氨酸以及第63位的丝氨酸替换为甘氨酸的氨基酸序列；或者，第105位的缬氨酸替换为丙氨酸、第124位的天冬酰胺替换为精氨酸以及第63位的丝氨酸替换为甘氨酸的氨基酸序列。 本发明所述突变体的催化活性得到显著提高，达到野生型的179％或223％，而且温度稳定性也得到了显著改善，突变体在60℃下的半衰期是野生型的1.7倍或3.7倍。 对于高温条件下生产D‑阿洛酮糖具有重要意义。
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一种亮氨酸-5-羟化酶突变体及其应用
成熟度：正在研发
技术类型：发明
应用行业：制造业
技术简介
本发明属于基因工程和酶工程技术领域，具体涉及一种活性提高的亮氨酸?5?羟化酶突变体及其应用。 本发明通过分子生物学手段获得念珠藻(Nostoc punctiforme)NIES?2108来源的亮氨酸?5?羟化酶编码基因，采用反向PCR进行定点突变获得编码突变体的基因，而后将编码突变体的基因进行异源表达获得亮氨酸?5?羟化酶的突变体V77A。 该突变体以亮氨酸和蛋氨酸为底物时，其相对酶活性较野生型分别提高了69.53％、23.26％。 本发明筛选出的活性提高的变异体，可以更高效地使亮氨酸远端的5号碳位实现羟基化，并且可催化蛋氨酸生成蛋氨酸亚砜，为工业上药物中间体的酶法催化生产提供广阔的前景。
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磷脂酶D突变体及其在制备磷脂酸、磷脂酰丝氨酸中的应用
成熟度：正在研发
技术类型：发明
应用行业：制造业
技术简介
本发明属于酶的基因工程技术领域，具体涉及一种磷脂酶D突变体及其制备与应用。 其技术方案是利用重组DNA技术对野生型磷脂酶D基因进行定点突变，得到活力较高的磷脂酶D基因，然后将高活力磷脂酶D基因在枯草芽孢杆菌表达系统、毕赤酵母表达系统（包括毕赤酵母游离表达系统和毕赤酵母细胞表面展示系统）中表达，得到产高活力磷脂酶D的重组菌株。 表达后，检测高活力磷脂酶D的比酶活较野生型磷脂酶D提高38‑140％，高活力磷脂酶D在枯草芽孢杆菌表达系统、毕赤酵母表达系统、毕赤酵母表面展示系统内发酵酶活最高值分别为36.8U/ml、48.1U/ml、140.2U/（g·细胞干重）。
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一种磷脂酶D突变体及其应用
成熟度：正在研发
技术类型：发明
应用行业：制造业
技术简介
本发明属于酶的基因工程技术领域，具体涉及一种磷脂酶D突变体及其制备与应用。 其技术方案是利用重组DNA技术对野生型磷脂酶D基因进行定点突变，得到活力较高的磷脂酶D基因，然后将高活力磷脂酶D基因在枯草芽孢杆菌表达系统、毕赤酵母表达系统（包括毕赤酵母游离表达系统和毕赤酵母细胞表面展示系统）中表达，得到产高活力磷脂酶D的重组菌株。 表达后，检测高活力磷脂酶D的比酶活较野生型磷脂酶D提高38?140％，高活力磷脂酶D在枯草芽孢杆菌表达系统、毕赤酵母表达系统、毕赤酵母表面展示系统内发酵酶活最高值分别为36.8U/ml、48.1U/ml、140.2U/（g·细胞干重）。
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一种差向异构酶的突变体及其应用
成熟度：正在研发
技术类型：发明
应用行业：制造业
技术简介
本发明提供了一种D-阿洛酮糖-3-差向异构酶的突变体构建及其应用的方法，酶的突变体的构建方法为：以来自于球形节杆菌（Arthrobacter globiformis）的D-阿洛酮糖-3-差向异构酶基因为亲本，通过同源比对及定点突变技术将酶活性催化中心的（第105位氨基酸残基）缬氨酸变成异亮氨酸；之后构建表达载体，以E.coli BL21（DE3）为异源表达宿主获得酶的突变体。 活性测定表明得到的突变体酶温度稳定性显著提高。60℃和70℃下的t1/2值分别达到了12.5h和0.5h，70℃下的半衰期较野生型延长6倍。突变体酶的活性也得到提高。 本发明筛选获得的突变体酶可以在高温下更高效地催化D-果糖异构化为D-阿洛酮糖，为工业化生产D-阿洛酮糖提供了广阔的前景，具有重要的工业应用价值。
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观赏作物组织培养及其突变体的研究
成熟度：-
技术类型：-
应用行业：农、林、牧、渔业
技术简介
花叶芋为天南星科植物，原产南美洲，其叶面色彩斑斓，是一种美丽的室内观叶植物，园艺上常规采用分球繁殖，繁殖系数低，不能适应市场需要。该试验采用切割伤组织培养混合技术及液体浅层培养和溶液培养等技术，使试管苗生长整齐一致，生长速度加快，其繁殖系数和生长速度较常规组织培养方法成倍增加。试验结合开放培养技术，建立了一套行之有效的商品化生产花叶芋的快繁体系。通过对离体条件下遗传变异的研究，获得了多倍体类型和各种叶面色斑变异类型，并试验了其遗传递能力，从而为获得新的园艺种提供了可能性，在园艺生产上具有极大的应传用潜力。该技术属国内首创，在国内同类研究中处领先地位。
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基于空间环境诱变水稻基因组特征进行突变体筛选的技术研究与应用
成熟度：-
技术类型：-
应用行业：科学研究和技术服务业
技术简介
为了进一步分析空间环境引起水稻遗传变异特征和变异位点的生物学意义，该项目需要进一步跟踪突变位点，分析这些突变位点序列特征和功能，研究这些位点在后代中的变化。分析基因组甲基化改变及蛋白质组改变特征。(1)对神舟六号飞行诱变的三个突变体进行了基因组突变率分析，对突变位点进行了克隆测序，有3个突变位点位于转座子区，而且有一个(Z-15)明显发生了转座或重组行为。发现5个突变基因，分别编码核糖体蛋白、未知蛋白(疑似核糖体蛋白)、TPR基序蛋白、MtN3/saliva家族跨膜蛋白及锌指蛋白，参与的生化过程包括：核糖体中蛋白质的合成(翻译)、蛋白质相互作用、基因调控、蛋白质核酸相互作用(转录因子)。(2)空间飞行能够导致水稻特定基因组序列DNA甲基化状态的变化，具体表现为甲基化多态性比例增加，多态性的变化既有甲基化的产生也有甲基化的去除。而且这种变化在空间飞行后当代的表型变化植株上更为明显。与基因组中的CG位点相比，CNG位点更容易发生DNA甲基化状态的改变。对变化位点进行测序发现空间飞行引起的DNA甲基化变化的位点主要分布在编码区和未知功能的区域上。(3)神舟6号飞船飞行可引起水稻种子氮元素代谢调节、核酸代谢、光合作用光反应、细胞氧化还原动态平衡、蛋白折叠、蛋白降解以及抗盐胁迫相关的蛋白分子发生较强烈的变化；空间飞行环境引起的当代蛋白表达谱变化特征对于越光和北京红两个品系延续到了第二代；而对于莲粳一号和珍珠红两个品系当代的蛋白表达变化特征在第二代有所回复。说明不同的遗传背景对于诱变的稳定性有一定的影响。(4)神舟六号飞行诱导的蛋白质表达谱，在第一代的变化较大的光合作用光反应类蛋白在第二代都有所降低；而氮元素代谢调节、细胞氧化还原动态平衡蛋白质在当代以及第二代中的差异表达一直稳定存在；而化学物胁迫应答、脂类合成、氧化还原以及光合作用暗反应蛋白，在第二代而非当代出现了显著的差异表达。说明与抗逆相关功能的蛋白质能在第二代中被激发出来。
找到14项技术成果数据。
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新型长效聚多肽与突变体FGF21融合蛋白
成熟度：正在研发
技术类型：-
应用行业：卫生和社会工作,制造业
技术简介
1.创新点 非酒精性脂肪性肝炎(NASH)现已成为肝硬化甚至肝癌的重要因素之一，其发病机制复杂，受其多重因素影响，目前临床上缺乏针对性的有效疗法。针对NASH 发病机制中的多重因素选择成纤维细胞生长因子21(FGF21)为目标蛋白，利用本课题组建立的聚多肽PsTag筛选库和分 泌型E.coli筛选平台，设计并研究了具有自主知识产权的PsTag-FGF21融合蛋白。2.主要技术指标 该融合蛋白可以针对NASH发病机制中的多重因素发挥对NASH的治疗作用，同时解决了FGF21 不稳定、易聚集、半衰期短等影响其成药性的问题，药效学研究表明PsTag-FGF21对于NASH的治疗效果显著优于原型FGF21。目前已完成PsTag-FGF21的药学研究、药效及作用机制研究、药代动力学研究和部分毒理学研究。3.技术特点与优势： (1)全新结构分子、具有自主知识产权：全新设计的聚多肽与突变体FGF21融合蛋白 (PsTag-FGF21),克服原型FGF21不稳定、易聚集、半衰期短等影响其成药性的问题，对于NASH的治疗效果显著优于原型FGF21, 半衰期比原性FGF21 显著提高了约40倍； (2)靶点新颖、药效显著:可针对NASH 发病机制中的多重因素发挥其治疗NASH的效果，在多种NASH相关模型中表现出了显著的改善糖脂代谢和缓解纤维化的作用； (3)表达量高、适合工业生产：建立分泌型E.coli菌株筛选平台，筛选获得一系列突变的菌株；获得高表达PsTag-FGF21的胞外分泌菌株，简化纯化工艺，降低生产成本。
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一种胰蛋白酶抗性改良的脂肪酶突变体及其基因和应用
成熟度：正在研发
技术类型：发明
应用行业：制造业
技术简介
本发明属于基因工程和酶工程技术领域，具体内容涉及一种对胰蛋白酶抗性改良的脂肪酶lipY2‑m突变体K36G/K39T、R63G和K36G/K39T/R63G及其基因和应用。 本发明的三个突变体的胰蛋白酶抗性均有明显提高，经相同浓度的胰蛋白酶处理后，lipY2‑m的抗胰蛋白酶半衰期为41.5min，K36G/K39T的抗胰蛋白酶半衰期为43.9min；R63G的抗胰蛋白酶半衰期为45.7min；组合突变体K36G/K39T/R63G的抗胰蛋白酶半衰期为46.8min，对胰蛋白酶抗性的半衰期分别提高了5.8％、10.1％和12％，显示出了在治疗胰腺功能不全等疾病方面的潜在应用价值。
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一种碱性蛋白酶突变体及其基因、工程菌、制备方法和应用
成熟度：正在研发
技术类型：发明
应用行业：制造业
技术简介
本发明属于生物工程技术领域，具体涉及一种碱性蛋白酶突变体及其基因、工程菌、制备方法和应用。 本发明通过提取克劳氏芽孢杆菌基因组DNA，经PCR扩增得到野生型碱性蛋白酶基因序列，将扩增得到的野生型碱性蛋白酶基因通过易错PCR进行随机突变，通过高通量筛选后获得了若干个高活力碱性蛋白酶基因，再将这些高活力碱性蛋白酶基因进行DNA改组，通过筛选后获得八个更高活力的碱性蛋白酶突变体基因。 将这八个突变体基因构建重组载体并在枯草芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、克劳氏芽孢杆菌中成功表达，得到产酶活力提高的重组菌株，进一步通过发酵工艺优化获得新型碱性蛋白酶。
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一种D-阿洛酮糖-3-差向异构酶的突变体及其应用
成熟度：正在研发
技术类型：发明
应用行业：制造业
技术简介
本发明提供的D‑阿洛酮糖‑3‑差向异构酶突变体，其氨基酸序列是在如SEQ ID NO:1所示的D‑阿洛酮糖‑3‑差向异构酶氨基酸序列基础上，第124位的天冬酰胺替换为精氨酸以及第63位的丝氨酸替换为甘氨酸的氨基酸序列；或者，第105位的缬氨酸替换为丙氨酸、第124位的天冬酰胺替换为精氨酸以及第63位的丝氨酸替换为甘氨酸的氨基酸序列。 本发明所述突变体的催化活性得到显著提高，达到野生型的179％或223％，而且温度稳定性也得到了显著改善，突变体在60℃下的半衰期是野生型的1.7倍或3.7倍。 对于高温条件下生产D‑阿洛酮糖具有重要意义。
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一种亮氨酸-5-羟化酶突变体及其应用
成熟度：正在研发
技术类型：发明
应用行业：制造业
技术简介
本发明属于基因工程和酶工程技术领域，具体涉及一种活性提高的亮氨酸?5?羟化酶突变体及其应用。 本发明通过分子生物学手段获得念珠藻(Nostoc punctiforme)NIES?2108来源的亮氨酸?5?羟化酶编码基因，采用反向PCR进行定点突变获得编码突变体的基因，而后将编码突变体的基因进行异源表达获得亮氨酸?5?羟化酶的突变体V77A。 该突变体以亮氨酸和蛋氨酸为底物时，其相对酶活性较野生型分别提高了69.53％、23.26％。 本发明筛选出的活性提高的变异体，可以更高效地使亮氨酸远端的5号碳位实现羟基化，并且可催化蛋氨酸生成蛋氨酸亚砜，为工业上药物中间体的酶法催化生产提供广阔的前景。
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磷脂酶D突变体及其在制备磷脂酸、磷脂酰丝氨酸中的应用
成熟度：正在研发
技术类型：发明
应用行业：制造业
技术简介
本发明属于酶的基因工程技术领域，具体涉及一种磷脂酶D突变体及其制备与应用。 其技术方案是利用重组DNA技术对野生型磷脂酶D基因进行定点突变，得到活力较高的磷脂酶D基因，然后将高活力磷脂酶D基因在枯草芽孢杆菌表达系统、毕赤酵母表达系统（包括毕赤酵母游离表达系统和毕赤酵母细胞表面展示系统）中表达，得到产高活力磷脂酶D的重组菌株。 表达后，检测高活力磷脂酶D的比酶活较野生型磷脂酶D提高38‑140％，高活力磷脂酶D在枯草芽孢杆菌表达系统、毕赤酵母表达系统、毕赤酵母表面展示系统内发酵酶活最高值分别为36.8U/ml、48.1U/ml、140.2U/（g·细胞干重）。
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一种磷脂酶D突变体及其应用
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技术类型：发明
应用行业：制造业
技术简介
本发明属于酶的基因工程技术领域，具体涉及一种磷脂酶D突变体及其制备与应用。 其技术方案是利用重组DNA技术对野生型磷脂酶D基因进行定点突变，得到活力较高的磷脂酶D基因，然后将高活力磷脂酶D基因在枯草芽孢杆菌表达系统、毕赤酵母表达系统（包括毕赤酵母游离表达系统和毕赤酵母细胞表面展示系统）中表达，得到产高活力磷脂酶D的重组菌株。 表达后，检测高活力磷脂酶D的比酶活较野生型磷脂酶D提高38?140％，高活力磷脂酶D在枯草芽孢杆菌表达系统、毕赤酵母表达系统、毕赤酵母表面展示系统内发酵酶活最高值分别为36.8U/ml、48.1U/ml、140.2U/（g·细胞干重）。
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一种差向异构酶的突变体及其应用
成熟度：正在研发
技术类型：发明
应用行业：制造业
技术简介
本发明提供了一种D-阿洛酮糖-3-差向异构酶的突变体构建及其应用的方法，酶的突变体的构建方法为：以来自于球形节杆菌（Arthrobacter globiformis）的D-阿洛酮糖-3-差向异构酶基因为亲本，通过同源比对及定点突变技术将酶活性催化中心的（第105位氨基酸残基）缬氨酸变成异亮氨酸；之后构建表达载体，以E.coli BL21（DE3）为异源表达宿主获得酶的突变体。 活性测定表明得到的突变体酶温度稳定性显著提高。60℃和70℃下的t1/2值分别达到了12.5h和0.5h，70℃下的半衰期较野生型延长6倍。突变体酶的活性也得到提高。 本发明筛选获得的突变体酶可以在高温下更高效地催化D-果糖异构化为D-阿洛酮糖，为工业化生产D-阿洛酮糖提供了广阔的前景，具有重要的工业应用价值。
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观赏作物组织培养及其突变体的研究
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技术类型：-
应用行业：农、林、牧、渔业
技术简介
花叶芋为天南星科植物，原产南美洲，其叶面色彩斑斓，是一种美丽的室内观叶植物，园艺上常规采用分球繁殖，繁殖系数低，不能适应市场需要。该试验采用切割伤组织培养混合技术及液体浅层培养和溶液培养等技术，使试管苗生长整齐一致，生长速度加快，其繁殖系数和生长速度较常规组织培养方法成倍增加。试验结合开放培养技术，建立了一套行之有效的商品化生产花叶芋的快繁体系。通过对离体条件下遗传变异的研究，获得了多倍体类型和各种叶面色斑变异类型，并试验了其遗传递能力，从而为获得新的园艺种提供了可能性，在园艺生产上具有极大的应传用潜力。该技术属国内首创，在国内同类研究中处领先地位。
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基于空间环境诱变水稻基因组特征进行突变体筛选的技术研究与应用
成熟度：-
技术类型：-
应用行业：科学研究和技术服务业
技术简介
为了进一步分析空间环境引起水稻遗传变异特征和变异位点的生物学意义，该项目需要进一步跟踪突变位点，分析这些突变位点序列特征和功能，研究这些位点在后代中的变化。分析基因组甲基化改变及蛋白质组改变特征。(1)对神舟六号飞行诱变的三个突变体进行了基因组突变率分析，对突变位点进行了克隆测序，有3个突变位点位于转座子区，而且有一个(Z-15)明显发生了转座或重组行为。发现5个突变基因，分别编码核糖体蛋白、未知蛋白(疑似核糖体蛋白)、TPR基序蛋白、MtN3/saliva家族跨膜蛋白及锌指蛋白，参与的生化过程包括：核糖体中蛋白质的合成(翻译)、蛋白质相互作用、基因调控、蛋白质核酸相互作用(转录因子)。(2)空间飞行能够导致水稻特定基因组序列DNA甲基化状态的变化，具体表现为甲基化多态性比例增加，多态性的变化既有甲基化的产生也有甲基化的去除。而且这种变化在空间飞行后当代的表型变化植株上更为明显。与基因组中的CG位点相比，CNG位点更容易发生DNA甲基化状态的改变。对变化位点进行测序发现空间飞行引起的DNA甲基化变化的位点主要分布在编码区和未知功能的区域上。(3)神舟6号飞船飞行可引起水稻种子氮元素代谢调节、核酸代谢、光合作用光反应、细胞氧化还原动态平衡、蛋白折叠、蛋白降解以及抗盐胁迫相关的蛋白分子发生较强烈的变化；空间飞行环境引起的当代蛋白表达谱变化特征对于越光和北京红两个品系延续到了第二代；而对于莲粳一号和珍珠红两个品系当代的蛋白表达变化特征在第二代有所回复。说明不同的遗传背景对于诱变的稳定性有一定的影响。(4)神舟六号飞行诱导的蛋白质表达谱，在第一代的变化较大的光合作用光反应类蛋白在第二代都有所降低；而氮元素代谢调节、细胞氧化还原动态平衡蛋白质在当代以及第二代中的差异表达一直稳定存在；而化学物胁迫应答、脂类合成、氧化还原以及光合作用暗反应蛋白，在第二代而非当代出现了显著的差异表达。说明与抗逆相关功能的蛋白质能在第二代中被激发出来。
找到14项技术成果数据。
找技术>-
新型长效聚多肽与突变体FGF21融合蛋白
成熟度：正在研发
技术类型：-
应用行业：卫生和社会工作,制造业
技术简介
1.创新点 非酒精性脂肪性肝炎(NASH)现已成为肝硬化甚至肝癌的重要因素之一，其发病机制复杂，受其多重因素影响，目前临床上缺乏针对性的有效疗法。针对NASH 发病机制中的多重因素选择成纤维细胞生长因子21(FGF21)为目标蛋白，利用本课题组建立的聚多肽PsTag筛选库和分 泌型E.coli筛选平台，设计并研究了具有自主知识产权的PsTag-FGF21融合蛋白。2.主要技术指标 该融合蛋白可以针对NASH发病机制中的多重因素发挥对NASH的治疗作用，同时解决了FGF21 不稳定、易聚集、半衰期短等影响其成药性的问题，药效学研究表明PsTag-FGF21对于NASH的治疗效果显著优于原型FGF21。目前已完成PsTag-FGF21的药学研究、药效及作用机制研究、药代动力学研究和部分毒理学研究。3.技术特点与优势： (1)全新结构分子、具有自主知识产权：全新设计的聚多肽与突变体FGF21融合蛋白 (PsTag-FGF21),克服原型FGF21不稳定、易聚集、半衰期短等影响其成药性的问题，对于NASH的治疗效果显著优于原型FGF21, 半衰期比原性FGF21 显著提高了约40倍； (2)靶点新颖、药效显著:可针对NASH 发病机制中的多重因素发挥其治疗NASH的效果，在多种NASH相关模型中表现出了显著的改善糖脂代谢和缓解纤维化的作用； (3)表达量高、适合工业生产：建立分泌型E.coli菌株筛选平台，筛选获得一系列突变的菌株；获得高表达PsTag-FGF21的胞外分泌菌株，简化纯化工艺，降低生产成本。
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一种胰蛋白酶抗性改良的脂肪酶突变体及其基因和应用
成熟度：正在研发
技术类型：发明
应用行业：制造业
技术简介
本发明属于基因工程和酶工程技术领域，具体内容涉及一种对胰蛋白酶抗性改良的脂肪酶lipY2‑m突变体K36G/K39T、R63G和K36G/K39T/R63G及其基因和应用。 本发明的三个突变体的胰蛋白酶抗性均有明显提高，经相同浓度的胰蛋白酶处理后，lipY2‑m的抗胰蛋白酶半衰期为41.5min，K36G/K39T的抗胰蛋白酶半衰期为43.9min；R63G的抗胰蛋白酶半衰期为45.7min；组合突变体K36G/K39T/R63G的抗胰蛋白酶半衰期为46.8min，对胰蛋白酶抗性的半衰期分别提高了5.8％、10.1％和12％，显示出了在治疗胰腺功能不全等疾病方面的潜在应用价值。
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一种碱性蛋白酶突变体及其基因、工程菌、制备方法和应用
成熟度：正在研发
技术类型：发明
应用行业：制造业
技术简介
本发明属于生物工程技术领域，具体涉及一种碱性蛋白酶突变体及其基因、工程菌、制备方法和应用。 本发明通过提取克劳氏芽孢杆菌基因组DNA，经PCR扩增得到野生型碱性蛋白酶基因序列，将扩增得到的野生型碱性蛋白酶基因通过易错PCR进行随机突变，通过高通量筛选后获得了若干个高活力碱性蛋白酶基因，再将这些高活力碱性蛋白酶基因进行DNA改组，通过筛选后获得八个更高活力的碱性蛋白酶突变体基因。 将这八个突变体基因构建重组载体并在枯草芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、克劳氏芽孢杆菌中成功表达，得到产酶活力提高的重组菌株，进一步通过发酵工艺优化获得新型碱性蛋白酶。
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一种D-阿洛酮糖-3-差向异构酶的突变体及其应用
成熟度：正在研发
技术类型：发明
应用行业：制造业
技术简介
本发明提供的D‑阿洛酮糖‑3‑差向异构酶突变体，其氨基酸序列是在如SEQ ID NO:1所示的D‑阿洛酮糖‑3‑差向异构酶氨基酸序列基础上，第124位的天冬酰胺替换为精氨酸以及第63位的丝氨酸替换为甘氨酸的氨基酸序列；或者，第105位的缬氨酸替换为丙氨酸、第124位的天冬酰胺替换为精氨酸以及第63位的丝氨酸替换为甘氨酸的氨基酸序列。 本发明所述突变体的催化活性得到显著提高，达到野生型的179％或223％，而且温度稳定性也得到了显著改善，突变体在60℃下的半衰期是野生型的1.7倍或3.7倍。 对于高温条件下生产D‑阿洛酮糖具有重要意义。
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一种亮氨酸-5-羟化酶突变体及其应用
成熟度：正在研发
技术类型：发明
应用行业：制造业
技术简介
本发明属于基因工程和酶工程技术领域，具体涉及一种活性提高的亮氨酸?5?羟化酶突变体及其应用。 本发明通过分子生物学手段获得念珠藻(Nostoc punctiforme)NIES?2108来源的亮氨酸?5?羟化酶编码基因，采用反向PCR进行定点突变获得编码突变体的基因，而后将编码突变体的基因进行异源表达获得亮氨酸?5?羟化酶的突变体V77A。 该突变体以亮氨酸和蛋氨酸为底物时，其相对酶活性较野生型分别提高了69.53％、23.26％。 本发明筛选出的活性提高的变异体，可以更高效地使亮氨酸远端的5号碳位实现羟基化，并且可催化蛋氨酸生成蛋氨酸亚砜，为工业上药物中间体的酶法催化生产提供广阔的前景。
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磷脂酶D突变体及其在制备磷脂酸、磷脂酰丝氨酸中的应用
成熟度：正在研发
技术类型：发明
应用行业：制造业
技术简介
本发明属于酶的基因工程技术领域，具体涉及一种磷脂酶D突变体及其制备与应用。 其技术方案是利用重组DNA技术对野生型磷脂酶D基因进行定点突变，得到活力较高的磷脂酶D基因，然后将高活力磷脂酶D基因在枯草芽孢杆菌表达系统、毕赤酵母表达系统（包括毕赤酵母游离表达系统和毕赤酵母细胞表面展示系统）中表达，得到产高活力磷脂酶D的重组菌株。 表达后，检测高活力磷脂酶D的比酶活较野生型磷脂酶D提高38‑140％，高活力磷脂酶D在枯草芽孢杆菌表达系统、毕赤酵母表达系统、毕赤酵母表面展示系统内发酵酶活最高值分别为36.8U/ml、48.1U/ml、140.2U/（g·细胞干重）。
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一种磷脂酶D突变体及其应用
成熟度：正在研发
技术类型：发明
应用行业：制造业
技术简介
本发明属于酶的基因工程技术领域，具体涉及一种磷脂酶D突变体及其制备与应用。 其技术方案是利用重组DNA技术对野生型磷脂酶D基因进行定点突变，得到活力较高的磷脂酶D基因，然后将高活力磷脂酶D基因在枯草芽孢杆菌表达系统、毕赤酵母表达系统（包括毕赤酵母游离表达系统和毕赤酵母细胞表面展示系统）中表达，得到产高活力磷脂酶D的重组菌株。 表达后，检测高活力磷脂酶D的比酶活较野生型磷脂酶D提高38?140％，高活力磷脂酶D在枯草芽孢杆菌表达系统、毕赤酵母表达系统、毕赤酵母表面展示系统内发酵酶活最高值分别为36.8U/ml、48.1U/ml、140.2U/（g·细胞干重）。
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一种差向异构酶的突变体及其应用
成熟度：正在研发
技术类型：发明
应用行业：制造业
技术简介
本发明提供了一种D-阿洛酮糖-3-差向异构酶的突变体构建及其应用的方法，酶的突变体的构建方法为：以来自于球形节杆菌（Arthrobacter globiformis）的D-阿洛酮糖-3-差向异构酶基因为亲本，通过同源比对及定点突变技术将酶活性催化中心的（第105位氨基酸残基）缬氨酸变成异亮氨酸；之后构建表达载体，以E.coli BL21（DE3）为异源表达宿主获得酶的突变体。 活性测定表明得到的突变体酶温度稳定性显著提高。60℃和70℃下的t1/2值分别达到了12.5h和0.5h，70℃下的半衰期较野生型延长6倍。突变体酶的活性也得到提高。 本发明筛选获得的突变体酶可以在高温下更高效地催化D-果糖异构化为D-阿洛酮糖，为工业化生产D-阿洛酮糖提供了广阔的前景，具有重要的工业应用价值。
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观赏作物组织培养及其突变体的研究
成熟度：-
技术类型：-
应用行业：农、林、牧、渔业
技术简介
花叶芋为天南星科植物，原产南美洲，其叶面色彩斑斓，是一种美丽的室内观叶植物，园艺上常规采用分球繁殖，繁殖系数低，不能适应市场需要。该试验采用切割伤组织培养混合技术及液体浅层培养和溶液培养等技术，使试管苗生长整齐一致，生长速度加快，其繁殖系数和生长速度较常规组织培养方法成倍增加。试验结合开放培养技术，建立了一套行之有效的商品化生产花叶芋的快繁体系。通过对离体条件下遗传变异的研究，获得了多倍体类型和各种叶面色斑变异类型，并试验了其遗传递能力，从而为获得新的园艺种提供了可能性，在园艺生产上具有极大的应传用潜力。该技术属国内首创，在国内同类研究中处领先地位。
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基于空间环境诱变水稻基因组特征进行突变体筛选的技术研究与应用
成熟度：-
技术类型：-
应用行业：科学研究和技术服务业
技术简介
为了进一步分析空间环境引起水稻遗传变异特征和变异位点的生物学意义，该项目需要进一步跟踪突变位点，分析这些突变位点序列特征和功能，研究这些位点在后代中的变化。分析基因组甲基化改变及蛋白质组改变特征。(1)对神舟六号飞行诱变的三个突变体进行了基因组突变率分析，对突变位点进行了克隆测序，有3个突变位点位于转座子区，而且有一个(Z-15)明显发生了转座或重组行为。发现5个突变基因，分别编码核糖体蛋白、未知蛋白(疑似核糖体蛋白)、TPR基序蛋白、MtN3/saliva家族跨膜蛋白及锌指蛋白，参与的生化过程包括：核糖体中蛋白质的合成(翻译)、蛋白质相互作用、基因调控、蛋白质核酸相互作用(转录因子)。(2)空间飞行能够导致水稻特定基因组序列DNA甲基化状态的变化，具体表现为甲基化多态性比例增加，多态性的变化既有甲基化的产生也有甲基化的去除。而且这种变化在空间飞行后当代的表型变化植株上更为明显。与基因组中的CG位点相比，CNG位点更容易发生DNA甲基化状态的改变。对变化位点进行测序发现空间飞行引起的DNA甲基化变化的位点主要分布在编码区和未知功能的区域上。(3)神舟6号飞船飞行可引起水稻种子氮元素代谢调节、核酸代谢、光合作用光反应、细胞氧化还原动态平衡、蛋白折叠、蛋白降解以及抗盐胁迫相关的蛋白分子发生较强烈的变化；空间飞行环境引起的当代蛋白表达谱变化特征对于越光和北京红两个品系延续到了第二代；而对于莲粳一号和珍珠红两个品系当代的蛋白表达变化特征在第二代有所回复。说明不同的遗传背景对于诱变的稳定性有一定的影响。(4)神舟六号飞行诱导的蛋白质表达谱，在第一代的变化较大的光合作用光反应类蛋白在第二代都有所降低；而氮元素代谢调节、细胞氧化还原动态平衡蛋白质在当代以及第二代中的差异表达一直稳定存在；而化学物胁迫应答、脂类合成、氧化还原以及光合作用暗反应蛋白，在第二代而非当代出现了显著的差异表达。说明与抗逆相关功能的蛋白质能在第二代中被激发出来。
找到14项技术成果数据。
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新型长效聚多肽与突变体FGF21融合蛋白
成熟度：正在研发
技术类型：-
应用行业：卫生和社会工作,制造业
技术简介
1.创新点 非酒精性脂肪性肝炎(NASH)现已成为肝硬化甚至肝癌的重要因素之一，其发病机制复杂，受其多重因素影响，目前临床上缺乏针对性的有效疗法。针对NASH 发病机制中的多重因素选择成纤维细胞生长因子21(FGF21)为目标蛋白，利用本课题组建立的聚多肽PsTag筛选库和分 泌型E.coli筛选平台，设计并研究了具有自主知识产权的PsTag-FGF21融合蛋白。2.主要技术指标 该融合蛋白可以针对NASH发病机制中的多重因素发挥对NASH的治疗作用，同时解决了FGF21 不稳定、易聚集、半衰期短等影响其成药性的问题，药效学研究表明PsTag-FGF21对于NASH的治疗效果显著优于原型FGF21。目前已完成PsTag-FGF21的药学研究、药效及作用机制研究、药代动力学研究和部分毒理学研究。3.技术特点与优势： (1)全新结构分子、具有自主知识产权：全新设计的聚多肽与突变体FGF21融合蛋白 (PsTag-FGF21),克服原型FGF21不稳定、易聚集、半衰期短等影响其成药性的问题，对于NASH的治疗效果显著优于原型FGF21, 半衰期比原性FGF21 显著提高了约40倍； (2)靶点新颖、药效显著:可针对NASH 发病机制中的多重因素发挥其治疗NASH的效果，在多种NASH相关模型中表现出了显著的改善糖脂代谢和缓解纤维化的作用； (3)表达量高、适合工业生产：建立分泌型E.coli菌株筛选平台，筛选获得一系列突变的菌株；获得高表达PsTag-FGF21的胞外分泌菌株，简化纯化工艺，降低生产成本。
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一种胰蛋白酶抗性改良的脂肪酶突变体及其基因和应用
成熟度：正在研发
技术类型：发明
应用行业：制造业
技术简介
本发明属于基因工程和酶工程技术领域，具体内容涉及一种对胰蛋白酶抗性改良的脂肪酶lipY2‑m突变体K36G/K39T、R63G和K36G/K39T/R63G及其基因和应用。 本发明的三个突变体的胰蛋白酶抗性均有明显提高，经相同浓度的胰蛋白酶处理后，lipY2‑m的抗胰蛋白酶半衰期为41.5min，K36G/K39T的抗胰蛋白酶半衰期为43.9min；R63G的抗胰蛋白酶半衰期为45.7min；组合突变体K36G/K39T/R63G的抗胰蛋白酶半衰期为46.8min，对胰蛋白酶抗性的半衰期分别提高了5.8％、10.1％和12％，显示出了在治疗胰腺功能不全等疾病方面的潜在应用价值。
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一种碱性蛋白酶突变体及其基因、工程菌、制备方法和应用
成熟度：正在研发
技术类型：发明
应用行业：制造业
技术简介
本发明属于生物工程技术领域，具体涉及一种碱性蛋白酶突变体及其基因、工程菌、制备方法和应用。 本发明通过提取克劳氏芽孢杆菌基因组DNA，经PCR扩增得到野生型碱性蛋白酶基因序列，将扩增得到的野生型碱性蛋白酶基因通过易错PCR进行随机突变，通过高通量筛选后获得了若干个高活力碱性蛋白酶基因，再将这些高活力碱性蛋白酶基因进行DNA改组，通过筛选后获得八个更高活力的碱性蛋白酶突变体基因。 将这八个突变体基因构建重组载体并在枯草芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、克劳氏芽孢杆菌中成功表达，得到产酶活力提高的重组菌株，进一步通过发酵工艺优化获得新型碱性蛋白酶。
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一种D-阿洛酮糖-3-差向异构酶的突变体及其应用
成熟度：正在研发
技术类型：发明
应用行业：制造业
技术简介
本发明提供的D‑阿洛酮糖‑3‑差向异构酶突变体，其氨基酸序列是在如SEQ ID NO:1所示的D‑阿洛酮糖‑3‑差向异构酶氨基酸序列基础上，第124位的天冬酰胺替换为精氨酸以及第63位的丝氨酸替换为甘氨酸的氨基酸序列；或者，第105位的缬氨酸替换为丙氨酸、第124位的天冬酰胺替换为精氨酸以及第63位的丝氨酸替换为甘氨酸的氨基酸序列。 本发明所述突变体的催化活性得到显著提高，达到野生型的179％或223％，而且温度稳定性也得到了显著改善，突变体在60℃下的半衰期是野生型的1.7倍或3.7倍。 对于高温条件下生产D‑阿洛酮糖具有重要意义。
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一种亮氨酸-5-羟化酶突变体及其应用
成熟度：正在研发
技术类型：发明
应用行业：制造业
技术简介
本发明属于基因工程和酶工程技术领域，具体涉及一种活性提高的亮氨酸?5?羟化酶突变体及其应用。 本发明通过分子生物学手段获得念珠藻(Nostoc punctiforme)NIES?2108来源的亮氨酸?5?羟化酶编码基因，采用反向PCR进行定点突变获得编码突变体的基因，而后将编码突变体的基因进行异源表达获得亮氨酸?5?羟化酶的突变体V77A。 该突变体以亮氨酸和蛋氨酸为底物时，其相对酶活性较野生型分别提高了69.53％、23.26％。 本发明筛选出的活性提高的变异体，可以更高效地使亮氨酸远端的5号碳位实现羟基化，并且可催化蛋氨酸生成蛋氨酸亚砜，为工业上药物中间体的酶法催化生产提供广阔的前景。
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磷脂酶D突变体及其在制备磷脂酸、磷脂酰丝氨酸中的应用
成熟度：正在研发
技术类型：发明
应用行业：制造业
技术简介
本发明属于酶的基因工程技术领域，具体涉及一种磷脂酶D突变体及其制备与应用。 其技术方案是利用重组DNA技术对野生型磷脂酶D基因进行定点突变，得到活力较高的磷脂酶D基因，然后将高活力磷脂酶D基因在枯草芽孢杆菌表达系统、毕赤酵母表达系统（包括毕赤酵母游离表达系统和毕赤酵母细胞表面展示系统）中表达，得到产高活力磷脂酶D的重组菌株。 表达后，检测高活力磷脂酶D的比酶活较野生型磷脂酶D提高38‑140％，高活力磷脂酶D在枯草芽孢杆菌表达系统、毕赤酵母表达系统、毕赤酵母表面展示系统内发酵酶活最高值分别为36.8U/ml、48.1U/ml、140.2U/（g·细胞干重）。
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一种磷脂酶D突变体及其应用
成熟度：正在研发
技术类型：发明
应用行业：制造业
技术简介
本发明属于酶的基因工程技术领域，具体涉及一种磷脂酶D突变体及其制备与应用。 其技术方案是利用重组DNA技术对野生型磷脂酶D基因进行定点突变，得到活力较高的磷脂酶D基因，然后将高活力磷脂酶D基因在枯草芽孢杆菌表达系统、毕赤酵母表达系统（包括毕赤酵母游离表达系统和毕赤酵母细胞表面展示系统）中表达，得到产高活力磷脂酶D的重组菌株。 表达后，检测高活力磷脂酶D的比酶活较野生型磷脂酶D提高38?140％，高活力磷脂酶D在枯草芽孢杆菌表达系统、毕赤酵母表达系统、毕赤酵母表面展示系统内发酵酶活最高值分别为36.8U/ml、48.1U/ml、140.2U/（g·细胞干重）。
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一种差向异构酶的突变体及其应用
成熟度：正在研发
技术类型：发明
应用行业：制造业
技术简介
本发明提供了一种D-阿洛酮糖-3-差向异构酶的突变体构建及其应用的方法，酶的突变体的构建方法为：以来自于球形节杆菌（Arthrobacter globiformis）的D-阿洛酮糖-3-差向异构酶基因为亲本，通过同源比对及定点突变技术将酶活性催化中心的（第105位氨基酸残基）缬氨酸变成异亮氨酸；之后构建表达载体，以E.coli BL21（DE3）为异源表达宿主获得酶的突变体。 活性测定表明得到的突变体酶温度稳定性显著提高。60℃和70℃下的t1/2值分别达到了12.5h和0.5h，70℃下的半衰期较野生型延长6倍。突变体酶的活性也得到提高。 本发明筛选获得的突变体酶可以在高温下更高效地催化D-果糖异构化为D-阿洛酮糖，为工业化生产D-阿洛酮糖提供了广阔的前景，具有重要的工业应用价值。
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观赏作物组织培养及其突变体的研究
成熟度：-
技术类型：-
应用行业：农、林、牧、渔业
技术简介
花叶芋为天南星科植物，原产南美洲，其叶面色彩斑斓，是一种美丽的室内观叶植物，园艺上常规采用分球繁殖，繁殖系数低，不能适应市场需要。该试验采用切割伤组织培养混合技术及液体浅层培养和溶液培养等技术，使试管苗生长整齐一致，生长速度加快，其繁殖系数和生长速度较常规组织培养方法成倍增加。试验结合开放培养技术，建立了一套行之有效的商品化生产花叶芋的快繁体系。通过对离体条件下遗传变异的研究，获得了多倍体类型和各种叶面色斑变异类型，并试验了其遗传递能力，从而为获得新的园艺种提供了可能性，在园艺生产上具有极大的应传用潜力。该技术属国内首创，在国内同类研究中处领先地位。
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基于空间环境诱变水稻基因组特征进行突变体筛选的技术研究与应用
成熟度：-
技术类型：-
应用行业：科学研究和技术服务业
技术简介
为了进一步分析空间环境引起水稻遗传变异特征和变异位点的生物学意义，该项目需要进一步跟踪突变位点，分析这些突变位点序列特征和功能，研究这些位点在后代中的变化。分析基因组甲基化改变及蛋白质组改变特征。(1)对神舟六号飞行诱变的三个突变体进行了基因组突变率分析，对突变位点进行了克隆测序，有3个突变位点位于转座子区，而且有一个(Z-15)明显发生了转座或重组行为。发现5个突变基因，分别编码核糖体蛋白、未知蛋白(疑似核糖体蛋白)、TPR基序蛋白、MtN3/saliva家族跨膜蛋白及锌指蛋白，参与的生化过程包括：核糖体中蛋白质的合成(翻译)、蛋白质相互作用、基因调控、蛋白质核酸相互作用(转录因子)。(2)空间飞行能够导致水稻特定基因组序列DNA甲基化状态的变化，具体表现为甲基化多态性比例增加，多态性的变化既有甲基化的产生也有甲基化的去除。而且这种变化在空间飞行后当代的表型变化植株上更为明显。与基因组中的CG位点相比，CNG位点更容易发生DNA甲基化状态的改变。对变化位点进行测序发现空间飞行引起的DNA甲基化变化的位点主要分布在编码区和未知功能的区域上。(3)神舟6号飞船飞行可引起水稻种子氮元素代谢调节、核酸代谢、光合作用光反应、细胞氧化还原动态平衡、蛋白折叠、蛋白降解以及抗盐胁迫相关的蛋白分子发生较强烈的变化；空间飞行环境引起的当代蛋白表达谱变化特征对于越光和北京红两个品系延续到了第二代；而对于莲粳一号和珍珠红两个品系当代的蛋白表达变化特征在第二代有所回复。说明不同的遗传背景对于诱变的稳定性有一定的影响。(4)神舟六号飞行诱导的蛋白质表达谱，在第一代的变化较大的光合作用光反应类蛋白在第二代都有所降低；而氮元素代谢调节、细胞氧化还原动态平衡蛋白质在当代以及第二代中的差异表达一直稳定存在；而化学物胁迫应答、脂类合成、氧化还原以及光合作用暗反应蛋白，在第二代而非当代出现了显著的差异表达。说明与抗逆相关功能的蛋白质能在第二代中被激发出来。
找到14项技术成果数据。
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新型长效聚多肽与突变体FGF21融合蛋白
成熟度：正在研发
技术类型：-
应用行业：卫生和社会工作,制造业
技术简介
1.创新点 非酒精性脂肪性肝炎(NASH)现已成为肝硬化甚至肝癌的重要因素之一，其发病机制复杂，受其多重因素影响，目前临床上缺乏针对性的有效疗法。针对NASH 发病机制中的多重因素选择成纤维细胞生长因子21(FGF21)为目标蛋白，利用本课题组建立的聚多肽PsTag筛选库和分 泌型E.coli筛选平台，设计并研究了具有自主知识产权的PsTag-FGF21融合蛋白。2.主要技术指标 该融合蛋白可以针对NASH发病机制中的多重因素发挥对NASH的治疗作用，同时解决了FGF21 不稳定、易聚集、半衰期短等影响其成药性的问题，药效学研究表明PsTag-FGF21对于NASH的治疗效果显著优于原型FGF21。目前已完成PsTag-FGF21的药学研究、药效及作用机制研究、药代动力学研究和部分毒理学研究。3.技术特点与优势： (1)全新结构分子、具有自主知识产权：全新设计的聚多肽与突变体FGF21融合蛋白 (PsTag-FGF21),克服原型FGF21不稳定、易聚集、半衰期短等影响其成药性的问题，对于NASH的治疗效果显著优于原型FGF21, 半衰期比原性FGF21 显著提高了约40倍； (2)靶点新颖、药效显著:可针对NASH 发病机制中的多重因素发挥其治疗NASH的效果，在多种NASH相关模型中表现出了显著的改善糖脂代谢和缓解纤维化的作用； (3)表达量高、适合工业生产：建立分泌型E.coli菌株筛选平台，筛选获得一系列突变的菌株；获得高表达PsTag-FGF21的胞外分泌菌株，简化纯化工艺，降低生产成本。
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一种胰蛋白酶抗性改良的脂肪酶突变体及其基因和应用
成熟度：正在研发
技术类型：发明
应用行业：制造业
技术简介
本发明属于基因工程和酶工程技术领域，具体内容涉及一种对胰蛋白酶抗性改良的脂肪酶lipY2‑m突变体K36G/K39T、R63G和K36G/K39T/R63G及其基因和应用。 本发明的三个突变体的胰蛋白酶抗性均有明显提高，经相同浓度的胰蛋白酶处理后，lipY2‑m的抗胰蛋白酶半衰期为41.5min，K36G/K39T的抗胰蛋白酶半衰期为43.9min；R63G的抗胰蛋白酶半衰期为45.7min；组合突变体K36G/K39T/R63G的抗胰蛋白酶半衰期为46.8min，对胰蛋白酶抗性的半衰期分别提高了5.8％、10.1％和12％，显示出了在治疗胰腺功能不全等疾病方面的潜在应用价值。
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一种碱性蛋白酶突变体及其基因、工程菌、制备方法和应用
成熟度：正在研发
技术类型：发明
应用行业：制造业
技术简介
本发明属于生物工程技术领域，具体涉及一种碱性蛋白酶突变体及其基因、工程菌、制备方法和应用。 本发明通过提取克劳氏芽孢杆菌基因组DNA，经PCR扩增得到野生型碱性蛋白酶基因序列，将扩增得到的野生型碱性蛋白酶基因通过易错PCR进行随机突变，通过高通量筛选后获得了若干个高活力碱性蛋白酶基因，再将这些高活力碱性蛋白酶基因进行DNA改组，通过筛选后获得八个更高活力的碱性蛋白酶突变体基因。 将这八个突变体基因构建重组载体并在枯草芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、克劳氏芽孢杆菌中成功表达，得到产酶活力提高的重组菌株，进一步通过发酵工艺优化获得新型碱性蛋白酶。
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一种D-阿洛酮糖-3-差向异构酶的突变体及其应用
成熟度：正在研发
技术类型：发明
应用行业：制造业
技术简介
本发明提供的D‑阿洛酮糖‑3‑差向异构酶突变体，其氨基酸序列是在如SEQ ID NO:1所示的D‑阿洛酮糖‑3‑差向异构酶氨基酸序列基础上，第124位的天冬酰胺替换为精氨酸以及第63位的丝氨酸替换为甘氨酸的氨基酸序列；或者，第105位的缬氨酸替换为丙氨酸、第124位的天冬酰胺替换为精氨酸以及第63位的丝氨酸替换为甘氨酸的氨基酸序列。 本发明所述突变体的催化活性得到显著提高，达到野生型的179％或223％，而且温度稳定性也得到了显著改善，突变体在60℃下的半衰期是野生型的1.7倍或3.7倍。 对于高温条件下生产D‑阿洛酮糖具有重要意义。
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一种亮氨酸-5-羟化酶突变体及其应用
成熟度：正在研发
技术类型：发明
应用行业：制造业
技术简介
本发明属于基因工程和酶工程技术领域，具体涉及一种活性提高的亮氨酸?5?羟化酶突变体及其应用。 本发明通过分子生物学手段获得念珠藻(Nostoc punctiforme)NIES?2108来源的亮氨酸?5?羟化酶编码基因，采用反向PCR进行定点突变获得编码突变体的基因，而后将编码突变体的基因进行异源表达获得亮氨酸?5?羟化酶的突变体V77A。 该突变体以亮氨酸和蛋氨酸为底物时，其相对酶活性较野生型分别提高了69.53％、23.26％。 本发明筛选出的活性提高的变异体，可以更高效地使亮氨酸远端的5号碳位实现羟基化，并且可催化蛋氨酸生成蛋氨酸亚砜，为工业上药物中间体的酶法催化生产提供广阔的前景。
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磷脂酶D突变体及其在制备磷脂酸、磷脂酰丝氨酸中的应用
成熟度：正在研发
技术类型：发明
应用行业：制造业
技术简介
本发明属于酶的基因工程技术领域，具体涉及一种磷脂酶D突变体及其制备与应用。 其技术方案是利用重组DNA技术对野生型磷脂酶D基因进行定点突变，得到活力较高的磷脂酶D基因，然后将高活力磷脂酶D基因在枯草芽孢杆菌表达系统、毕赤酵母表达系统（包括毕赤酵母游离表达系统和毕赤酵母细胞表面展示系统）中表达，得到产高活力磷脂酶D的重组菌株。 表达后，检测高活力磷脂酶D的比酶活较野生型磷脂酶D提高38‑140％，高活力磷脂酶D在枯草芽孢杆菌表达系统、毕赤酵母表达系统、毕赤酵母表面展示系统内发酵酶活最高值分别为36.8U/ml、48.1U/ml、140.2U/（g·细胞干重）。
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一种磷脂酶D突变体及其应用
成熟度：正在研发
技术类型：发明
应用行业：制造业
技术简介
本发明属于酶的基因工程技术领域，具体涉及一种磷脂酶D突变体及其制备与应用。 其技术方案是利用重组DNA技术对野生型磷脂酶D基因进行定点突变，得到活力较高的磷脂酶D基因，然后将高活力磷脂酶D基因在枯草芽孢杆菌表达系统、毕赤酵母表达系统（包括毕赤酵母游离表达系统和毕赤酵母细胞表面展示系统）中表达，得到产高活力磷脂酶D的重组菌株。 表达后，检测高活力磷脂酶D的比酶活较野生型磷脂酶D提高38?140％，高活力磷脂酶D在枯草芽孢杆菌表达系统、毕赤酵母表达系统、毕赤酵母表面展示系统内发酵酶活最高值分别为36.8U/ml、48.1U/ml、140.2U/（g·细胞干重）。
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一种差向异构酶的突变体及其应用
成熟度：正在研发
技术类型：发明
应用行业：制造业
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本发明提供了一种D-阿洛酮糖-3-差向异构酶的突变体构建及其应用的方法，酶的突变体的构建方法为：以来自于球形节杆菌（Arthrobacter globiformis）的D-阿洛酮糖-3-差向异构酶基因为亲本，通过同源比对及定点突变技术将酶活性催化中心的（第105位氨基酸残基）缬氨酸变成异亮氨酸；之后构建表达载体，以E.coli BL21（DE3）为异源表达宿主获得酶的突变体。 活性测定表明得到的突变体酶温度稳定性显著提高。60℃和70℃下的t1/2值分别达到了12.5h和0.5h，70℃下的半衰期较野生型延长6倍。突变体酶的活性也得到提高。 本发明筛选获得的突变体酶可以在高温下更高效地催化D-果糖异构化为D-阿洛酮糖，为工业化生产D-阿洛酮糖提供了广阔的前景，具有重要的工业应用价值。
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观赏作物组织培养及其突变体的研究
成熟度：-
技术类型：-
应用行业：农、林、牧、渔业
技术简介
花叶芋为天南星科植物，原产南美洲，其叶面色彩斑斓，是一种美丽的室内观叶植物，园艺上常规采用分球繁殖，繁殖系数低，不能适应市场需要。该试验采用切割伤组织培养混合技术及液体浅层培养和溶液培养等技术，使试管苗生长整齐一致，生长速度加快，其繁殖系数和生长速度较常规组织培养方法成倍增加。试验结合开放培养技术，建立了一套行之有效的商品化生产花叶芋的快繁体系。通过对离体条件下遗传变异的研究，获得了多倍体类型和各种叶面色斑变异类型，并试验了其遗传递能力，从而为获得新的园艺种提供了可能性，在园艺生产上具有极大的应传用潜力。该技术属国内首创，在国内同类研究中处领先地位。
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基于空间环境诱变水稻基因组特征进行突变体筛选的技术研究与应用
成熟度：-
技术类型：-
应用行业：科学研究和技术服务业
技术简介
为了进一步分析空间环境引起水稻遗传变异特征和变异位点的生物学意义，该项目需要进一步跟踪突变位点，分析这些突变位点序列特征和功能，研究这些位点在后代中的变化。分析基因组甲基化改变及蛋白质组改变特征。(1)对神舟六号飞行诱变的三个突变体进行了基因组突变率分析，对突变位点进行了克隆测序，有3个突变位点位于转座子区，而且有一个(Z-15)明显发生了转座或重组行为。发现5个突变基因，分别编码核糖体蛋白、未知蛋白(疑似核糖体蛋白)、TPR基序蛋白、MtN3/saliva家族跨膜蛋白及锌指蛋白，参与的生化过程包括：核糖体中蛋白质的合成(翻译)、蛋白质相互作用、基因调控、蛋白质核酸相互作用(转录因子)。(2)空间飞行能够导致水稻特定基因组序列DNA甲基化状态的变化，具体表现为甲基化多态性比例增加，多态性的变化既有甲基化的产生也有甲基化的去除。而且这种变化在空间飞行后当代的表型变化植株上更为明显。与基因组中的CG位点相比，CNG位点更容易发生DNA甲基化状态的改变。对变化位点进行测序发现空间飞行引起的DNA甲基化变化的位点主要分布在编码区和未知功能的区域上。(3)神舟6号飞船飞行可引起水稻种子氮元素代谢调节、核酸代谢、光合作用光反应、细胞氧化还原动态平衡、蛋白折叠、蛋白降解以及抗盐胁迫相关的蛋白分子发生较强烈的变化；空间飞行环境引起的当代蛋白表达谱变化特征对于越光和北京红两个品系延续到了第二代；而对于莲粳一号和珍珠红两个品系当代的蛋白表达变化特征在第二代有所回复。说明不同的遗传背景对于诱变的稳定性有一定的影响。(4)神舟六号飞行诱导的蛋白质表达谱，在第一代的变化较大的光合作用光反应类蛋白在第二代都有所降低；而氮元素代谢调节、细胞氧化还原动态平衡蛋白质在当代以及第二代中的差异表达一直稳定存在；而化学物胁迫应答、脂类合成、氧化还原以及光合作用暗反应蛋白，在第二代而非当代出现了显著的差异表达。说明与抗逆相关功能的蛋白质能在第二代中被激发出来。
找到14项技术成果数据。
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新型长效聚多肽与突变体FGF21融合蛋白
成熟度：正在研发
技术类型：-
应用行业：卫生和社会工作,制造业
技术简介
1.创新点 非酒精性脂肪性肝炎(NASH)现已成为肝硬化甚至肝癌的重要因素之一，其发病机制复杂，受其多重因素影响，目前临床上缺乏针对性的有效疗法。针对NASH 发病机制中的多重因素选择成纤维细胞生长因子21(FGF21)为目标蛋白，利用本课题组建立的聚多肽PsTag筛选库和分 泌型E.coli筛选平台，设计并研究了具有自主知识产权的PsTag-FGF21融合蛋白。2.主要技术指标 该融合蛋白可以针对NASH发病机制中的多重因素发挥对NASH的治疗作用，同时解决了FGF21 不稳定、易聚集、半衰期短等影响其成药性的问题，药效学研究表明PsTag-FGF21对于NASH的治疗效果显著优于原型FGF21。目前已完成PsTag-FGF21的药学研究、药效及作用机制研究、药代动力学研究和部分毒理学研究。3.技术特点与优势： (1)全新结构分子、具有自主知识产权：全新设计的聚多肽与突变体FGF21融合蛋白 (PsTag-FGF21),克服原型FGF21不稳定、易聚集、半衰期短等影响其成药性的问题，对于NASH的治疗效果显著优于原型FGF21, 半衰期比原性FGF21 显著提高了约40倍； (2)靶点新颖、药效显著:可针对NASH 发病机制中的多重因素发挥其治疗NASH的效果，在多种NASH相关模型中表现出了显著的改善糖脂代谢和缓解纤维化的作用； (3)表达量高、适合工业生产：建立分泌型E.coli菌株筛选平台，筛选获得一系列突变的菌株；获得高表达PsTag-FGF21的胞外分泌菌株，简化纯化工艺，降低生产成本。
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一种胰蛋白酶抗性改良的脂肪酶突变体及其基因和应用
成熟度：正在研发
技术类型：发明
应用行业：制造业
技术简介
本发明属于基因工程和酶工程技术领域，具体内容涉及一种对胰蛋白酶抗性改良的脂肪酶lipY2‑m突变体K36G/K39T、R63G和K36G/K39T/R63G及其基因和应用。 本发明的三个突变体的胰蛋白酶抗性均有明显提高，经相同浓度的胰蛋白酶处理后，lipY2‑m的抗胰蛋白酶半衰期为41.5min，K36G/K39T的抗胰蛋白酶半衰期为43.9min；R63G的抗胰蛋白酶半衰期为45.7min；组合突变体K36G/K39T/R63G的抗胰蛋白酶半衰期为46.8min，对胰蛋白酶抗性的半衰期分别提高了5.8％、10.1％和12％，显示出了在治疗胰腺功能不全等疾病方面的潜在应用价值。
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一种碱性蛋白酶突变体及其基因、工程菌、制备方法和应用
成熟度：正在研发
技术类型：发明
应用行业：制造业
技术简介
本发明属于生物工程技术领域，具体涉及一种碱性蛋白酶突变体及其基因、工程菌、制备方法和应用。 本发明通过提取克劳氏芽孢杆菌基因组DNA，经PCR扩增得到野生型碱性蛋白酶基因序列，将扩增得到的野生型碱性蛋白酶基因通过易错PCR进行随机突变，通过高通量筛选后获得了若干个高活力碱性蛋白酶基因，再将这些高活力碱性蛋白酶基因进行DNA改组，通过筛选后获得八个更高活力的碱性蛋白酶突变体基因。 将这八个突变体基因构建重组载体并在枯草芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、克劳氏芽孢杆菌中成功表达，得到产酶活力提高的重组菌株，进一步通过发酵工艺优化获得新型碱性蛋白酶。
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一种D-阿洛酮糖-3-差向异构酶的突变体及其应用
成熟度：正在研发
技术类型：发明
应用行业：制造业
技术简介
本发明提供的D‑阿洛酮糖‑3‑差向异构酶突变体，其氨基酸序列是在如SEQ ID NO:1所示的D‑阿洛酮糖‑3‑差向异构酶氨基酸序列基础上，第124位的天冬酰胺替换为精氨酸以及第63位的丝氨酸替换为甘氨酸的氨基酸序列；或者，第105位的缬氨酸替换为丙氨酸、第124位的天冬酰胺替换为精氨酸以及第63位的丝氨酸替换为甘氨酸的氨基酸序列。 本发明所述突变体的催化活性得到显著提高，达到野生型的179％或223％，而且温度稳定性也得到了显著改善，突变体在60℃下的半衰期是野生型的1.7倍或3.7倍。 对于高温条件下生产D‑阿洛酮糖具有重要意义。
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一种亮氨酸-5-羟化酶突变体及其应用
成熟度：正在研发
技术类型：发明
应用行业：制造业
技术简介
本发明属于基因工程和酶工程技术领域，具体涉及一种活性提高的亮氨酸?5?羟化酶突变体及其应用。 本发明通过分子生物学手段获得念珠藻(Nostoc punctiforme)NIES?2108来源的亮氨酸?5?羟化酶编码基因，采用反向PCR进行定点突变获得编码突变体的基因，而后将编码突变体的基因进行异源表达获得亮氨酸?5?羟化酶的突变体V77A。 该突变体以亮氨酸和蛋氨酸为底物时，其相对酶活性较野生型分别提高了69.53％、23.26％。 本发明筛选出的活性提高的变异体，可以更高效地使亮氨酸远端的5号碳位实现羟基化，并且可催化蛋氨酸生成蛋氨酸亚砜，为工业上药物中间体的酶法催化生产提供广阔的前景。
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磷脂酶D突变体及其在制备磷脂酸、磷脂酰丝氨酸中的应用
成熟度：正在研发
技术类型：发明
应用行业：制造业
技术简介
本发明属于酶的基因工程技术领域，具体涉及一种磷脂酶D突变体及其制备与应用。 其技术方案是利用重组DNA技术对野生型磷脂酶D基因进行定点突变，得到活力较高的磷脂酶D基因，然后将高活力磷脂酶D基因在枯草芽孢杆菌表达系统、毕赤酵母表达系统（包括毕赤酵母游离表达系统和毕赤酵母细胞表面展示系统）中表达，得到产高活力磷脂酶D的重组菌株。 表达后，检测高活力磷脂酶D的比酶活较野生型磷脂酶D提高38‑140％，高活力磷脂酶D在枯草芽孢杆菌表达系统、毕赤酵母表达系统、毕赤酵母表面展示系统内发酵酶活最高值分别为36.8U/ml、48.1U/ml、140.2U/（g·细胞干重）。
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一种磷脂酶D突变体及其应用
成熟度：正在研发
技术类型：发明
应用行业：制造业
技术简介
本发明属于酶的基因工程技术领域，具体涉及一种磷脂酶D突变体及其制备与应用。 其技术方案是利用重组DNA技术对野生型磷脂酶D基因进行定点突变，得到活力较高的磷脂酶D基因，然后将高活力磷脂酶D基因在枯草芽孢杆菌表达系统、毕赤酵母表达系统（包括毕赤酵母游离表达系统和毕赤酵母细胞表面展示系统）中表达，得到产高活力磷脂酶D的重组菌株。 表达后，检测高活力磷脂酶D的比酶活较野生型磷脂酶D提高38?140％，高活力磷脂酶D在枯草芽孢杆菌表达系统、毕赤酵母表达系统、毕赤酵母表面展示系统内发酵酶活最高值分别为36.8U/ml、48.1U/ml、140.2U/（g·细胞干重）。
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一种差向异构酶的突变体及其应用
成熟度：正在研发
技术类型：发明
应用行业：制造业
技术简介
本发明提供了一种D-阿洛酮糖-3-差向异构酶的突变体构建及其应用的方法，酶的突变体的构建方法为：以来自于球形节杆菌（Arthrobacter globiformis）的D-阿洛酮糖-3-差向异构酶基因为亲本，通过同源比对及定点突变技术将酶活性催化中心的（第105位氨基酸残基）缬氨酸变成异亮氨酸；之后构建表达载体，以E.coli BL21（DE3）为异源表达宿主获得酶的突变体。 活性测定表明得到的突变体酶温度稳定性显著提高。60℃和70℃下的t1/2值分别达到了12.5h和0.5h，70℃下的半衰期较野生型延长6倍。突变体酶的活性也得到提高。 本发明筛选获得的突变体酶可以在高温下更高效地催化D-果糖异构化为D-阿洛酮糖，为工业化生产D-阿洛酮糖提供了广阔的前景，具有重要的工业应用价值。
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观赏作物组织培养及其突变体的研究
成熟度：-
技术类型：-
应用行业：农、林、牧、渔业
技术简介
花叶芋为天南星科植物，原产南美洲，其叶面色彩斑斓，是一种美丽的室内观叶植物，园艺上常规采用分球繁殖，繁殖系数低，不能适应市场需要。该试验采用切割伤组织培养混合技术及液体浅层培养和溶液培养等技术，使试管苗生长整齐一致，生长速度加快，其繁殖系数和生长速度较常规组织培养方法成倍增加。试验结合开放培养技术，建立了一套行之有效的商品化生产花叶芋的快繁体系。通过对离体条件下遗传变异的研究，获得了多倍体类型和各种叶面色斑变异类型，并试验了其遗传递能力，从而为获得新的园艺种提供了可能性，在园艺生产上具有极大的应传用潜力。该技术属国内首创，在国内同类研究中处领先地位。
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基于空间环境诱变水稻基因组特征进行突变体筛选的技术研究与应用
成熟度：-
技术类型：-
应用行业：科学研究和技术服务业
技术简介
为了进一步分析空间环境引起水稻遗传变异特征和变异位点的生物学意义，该项目需要进一步跟踪突变位点，分析这些突变位点序列特征和功能，研究这些位点在后代中的变化。分析基因组甲基化改变及蛋白质组改变特征。(1)对神舟六号飞行诱变的三个突变体进行了基因组突变率分析，对突变位点进行了克隆测序，有3个突变位点位于转座子区，而且有一个(Z-15)明显发生了转座或重组行为。发现5个突变基因，分别编码核糖体蛋白、未知蛋白(疑似核糖体蛋白)、TPR基序蛋白、MtN3/saliva家族跨膜蛋白及锌指蛋白，参与的生化过程包括：核糖体中蛋白质的合成(翻译)、蛋白质相互作用、基因调控、蛋白质核酸相互作用(转录因子)。(2)空间飞行能够导致水稻特定基因组序列DNA甲基化状态的变化，具体表现为甲基化多态性比例增加，多态性的变化既有甲基化的产生也有甲基化的去除。而且这种变化在空间飞行后当代的表型变化植株上更为明显。与基因组中的CG位点相比，CNG位点更容易发生DNA甲基化状态的改变。对变化位点进行测序发现空间飞行引起的DNA甲基化变化的位点主要分布在编码区和未知功能的区域上。(3)神舟6号飞船飞行可引起水稻种子氮元素代谢调节、核酸代谢、光合作用光反应、细胞氧化还原动态平衡、蛋白折叠、蛋白降解以及抗盐胁迫相关的蛋白分子发生较强烈的变化；空间飞行环境引起的当代蛋白表达谱变化特征对于越光和北京红两个品系延续到了第二代；而对于莲粳一号和珍珠红两个品系当代的蛋白表达变化特征在第二代有所回复。说明不同的遗传背景对于诱变的稳定性有一定的影响。(4)神舟六号飞行诱导的蛋白质表达谱，在第一代的变化较大的光合作用光反应类蛋白在第二代都有所降低；而氮元素代谢调节、细胞氧化还原动态平衡蛋白质在当代以及第二代中的差异表达一直稳定存在；而化学物胁迫应答、脂类合成、氧化还原以及光合作用暗反应蛋白，在第二代而非当代出现了显著的差异表达。说明与抗逆相关功能的蛋白质能在第二代中被激发出来。
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新型长效聚多肽与突变体FGF21融合蛋白
成熟度：正在研发
技术类型：-
应用行业：卫生和社会工作,制造业
技术简介
1.创新点 非酒精性脂肪性肝炎(NASH)现已成为肝硬化甚至肝癌的重要因素之一，其发病机制复杂，受其多重因素影响，目前临床上缺乏针对性的有效疗法。针对NASH 发病机制中的多重因素选择成纤维细胞生长因子21(FGF21)为目标蛋白，利用本课题组建立的聚多肽PsTag筛选库和分 泌型E.coli筛选平台，设计并研究了具有自主知识产权的PsTag-FGF21融合蛋白。2.主要技术指标 该融合蛋白可以针对NASH发病机制中的多重因素发挥对NASH的治疗作用，同时解决了FGF21 不稳定、易聚集、半衰期短等影响其成药性的问题，药效学研究表明PsTag-FGF21对于NASH的治疗效果显著优于原型FGF21。目前已完成PsTag-FGF21的药学研究、药效及作用机制研究、药代动力学研究和部分毒理学研究。3.技术特点与优势： (1)全新结构分子、具有自主知识产权：全新设计的聚多肽与突变体FGF21融合蛋白 (PsTag-FGF21),克服原型FGF21不稳定、易聚集、半衰期短等影响其成药性的问题，对于NASH的治疗效果显著优于原型FGF21, 半衰期比原性FGF21 显著提高了约40倍； (2)靶点新颖、药效显著:可针对NASH 发病机制中的多重因素发挥其治疗NASH的效果，在多种NASH相关模型中表现出了显著的改善糖脂代谢和缓解纤维化的作用； (3)表达量高、适合工业生产：建立分泌型E.coli菌株筛选平台，筛选获得一系列突变的菌株；获得高表达PsTag-FGF21的胞外分泌菌株，简化纯化工艺，降低生产成本。
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一种胰蛋白酶抗性改良的脂肪酶突变体及其基因和应用
成熟度：正在研发
技术类型：发明
应用行业：制造业
技术简介
本发明属于基因工程和酶工程技术领域，具体内容涉及一种对胰蛋白酶抗性改良的脂肪酶lipY2‑m突变体K36G/K39T、R63G和K36G/K39T/R63G及其基因和应用。 本发明的三个突变体的胰蛋白酶抗性均有明显提高，经相同浓度的胰蛋白酶处理后，lipY2‑m的抗胰蛋白酶半衰期为41.5min，K36G/K39T的抗胰蛋白酶半衰期为43.9min；R63G的抗胰蛋白酶半衰期为45.7min；组合突变体K36G/K39T/R63G的抗胰蛋白酶半衰期为46.8min，对胰蛋白酶抗性的半衰期分别提高了5.8％、10.1％和12％，显示出了在治疗胰腺功能不全等疾病方面的潜在应用价值。
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一种碱性蛋白酶突变体及其基因、工程菌、制备方法和应用
成熟度：正在研发
技术类型：发明
应用行业：制造业
技术简介
本发明属于生物工程技术领域，具体涉及一种碱性蛋白酶突变体及其基因、工程菌、制备方法和应用。 本发明通过提取克劳氏芽孢杆菌基因组DNA，经PCR扩增得到野生型碱性蛋白酶基因序列，将扩增得到的野生型碱性蛋白酶基因通过易错PCR进行随机突变，通过高通量筛选后获得了若干个高活力碱性蛋白酶基因，再将这些高活力碱性蛋白酶基因进行DNA改组，通过筛选后获得八个更高活力的碱性蛋白酶突变体基因。 将这八个突变体基因构建重组载体并在枯草芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、克劳氏芽孢杆菌中成功表达，得到产酶活力提高的重组菌株，进一步通过发酵工艺优化获得新型碱性蛋白酶。
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一种D-阿洛酮糖-3-差向异构酶的突变体及其应用
成熟度：正在研发
技术类型：发明
应用行业：制造业
技术简介
本发明提供的D‑阿洛酮糖‑3‑差向异构酶突变体，其氨基酸序列是在如SEQ ID NO:1所示的D‑阿洛酮糖‑3‑差向异构酶氨基酸序列基础上，第124位的天冬酰胺替换为精氨酸以及第63位的丝氨酸替换为甘氨酸的氨基酸序列；或者，第105位的缬氨酸替换为丙氨酸、第124位的天冬酰胺替换为精氨酸以及第63位的丝氨酸替换为甘氨酸的氨基酸序列。 本发明所述突变体的催化活性得到显著提高，达到野生型的179％或223％，而且温度稳定性也得到了显著改善，突变体在60℃下的半衰期是野生型的1.7倍或3.7倍。 对于高温条件下生产D‑阿洛酮糖具有重要意义。
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一种亮氨酸-5-羟化酶突变体及其应用
成熟度：正在研发
技术类型：发明
应用行业：制造业
技术简介
本发明属于基因工程和酶工程技术领域，具体涉及一种活性提高的亮氨酸?5?羟化酶突变体及其应用。 本发明通过分子生物学手段获得念珠藻(Nostoc punctiforme)NIES?2108来源的亮氨酸?5?羟化酶编码基因，采用反向PCR进行定点突变获得编码突变体的基因，而后将编码突变体的基因进行异源表达获得亮氨酸?5?羟化酶的突变体V77A。 该突变体以亮氨酸和蛋氨酸为底物时，其相对酶活性较野生型分别提高了69.53％、23.26％。 本发明筛选出的活性提高的变异体，可以更高效地使亮氨酸远端的5号碳位实现羟基化，并且可催化蛋氨酸生成蛋氨酸亚砜，为工业上药物中间体的酶法催化生产提供广阔的前景。
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磷脂酶D突变体及其在制备磷脂酸、磷脂酰丝氨酸中的应用
成熟度：正在研发
技术类型：发明
应用行业：制造业
技术简介
本发明属于酶的基因工程技术领域，具体涉及一种磷脂酶D突变体及其制备与应用。 其技术方案是利用重组DNA技术对野生型磷脂酶D基因进行定点突变，得到活力较高的磷脂酶D基因，然后将高活力磷脂酶D基因在枯草芽孢杆菌表达系统、毕赤酵母表达系统（包括毕赤酵母游离表达系统和毕赤酵母细胞表面展示系统）中表达，得到产高活力磷脂酶D的重组菌株。 表达后，检测高活力磷脂酶D的比酶活较野生型磷脂酶D提高38‑140％，高活力磷脂酶D在枯草芽孢杆菌表达系统、毕赤酵母表达系统、毕赤酵母表面展示系统内发酵酶活最高值分别为36.8U/ml、48.1U/ml、140.2U/（g·细胞干重）。
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一种磷脂酶D突变体及其应用
成熟度：正在研发
技术类型：发明
应用行业：制造业
技术简介
本发明属于酶的基因工程技术领域，具体涉及一种磷脂酶D突变体及其制备与应用。 其技术方案是利用重组DNA技术对野生型磷脂酶D基因进行定点突变，得到活力较高的磷脂酶D基因，然后将高活力磷脂酶D基因在枯草芽孢杆菌表达系统、毕赤酵母表达系统（包括毕赤酵母游离表达系统和毕赤酵母细胞表面展示系统）中表达，得到产高活力磷脂酶D的重组菌株。 表达后，检测高活力磷脂酶D的比酶活较野生型磷脂酶D提高38?140％，高活力磷脂酶D在枯草芽孢杆菌表达系统、毕赤酵母表达系统、毕赤酵母表面展示系统内发酵酶活最高值分别为36.8U/ml、48.1U/ml、140.2U/（g·细胞干重）。
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一种差向异构酶的突变体及其应用
成熟度：正在研发
技术类型：发明
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本发明提供了一种D-阿洛酮糖-3-差向异构酶的突变体构建及其应用的方法，酶的突变体的构建方法为：以来自于球形节杆菌（Arthrobacter globiformis）的D-阿洛酮糖-3-差向异构酶基因为亲本，通过同源比对及定点突变技术将酶活性催化中心的（第105位氨基酸残基）缬氨酸变成异亮氨酸；之后构建表达载体，以E.coli BL21（DE3）为异源表达宿主获得酶的突变体。 活性测定表明得到的突变体酶温度稳定性显著提高。60℃和70℃下的t1/2值分别达到了12.5h和0.5h，70℃下的半衰期较野生型延长6倍。突变体酶的活性也得到提高。 本发明筛选获得的突变体酶可以在高温下更高效地催化D-果糖异构化为D-阿洛酮糖，为工业化生产D-阿洛酮糖提供了广阔的前景，具有重要的工业应用价值。
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观赏作物组织培养及其突变体的研究
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花叶芋为天南星科植物，原产南美洲，其叶面色彩斑斓，是一种美丽的室内观叶植物，园艺上常规采用分球繁殖，繁殖系数低，不能适应市场需要。该试验采用切割伤组织培养混合技术及液体浅层培养和溶液培养等技术，使试管苗生长整齐一致，生长速度加快，其繁殖系数和生长速度较常规组织培养方法成倍增加。试验结合开放培养技术，建立了一套行之有效的商品化生产花叶芋的快繁体系。通过对离体条件下遗传变异的研究，获得了多倍体类型和各种叶面色斑变异类型，并试验了其遗传递能力，从而为获得新的园艺种提供了可能性，在园艺生产上具有极大的应传用潜力。该技术属国内首创，在国内同类研究中处领先地位。
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基于空间环境诱变水稻基因组特征进行突变体筛选的技术研究与应用
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为了进一步分析空间环境引起水稻遗传变异特征和变异位点的生物学意义，该项目需要进一步跟踪突变位点，分析这些突变位点序列特征和功能，研究这些位点在后代中的变化。分析基因组甲基化改变及蛋白质组改变特征。(1)对神舟六号飞行诱变的三个突变体进行了基因组突变率分析，对突变位点进行了克隆测序，有3个突变位点位于转座子区，而且有一个(Z-15)明显发生了转座或重组行为。发现5个突变基因，分别编码核糖体蛋白、未知蛋白(疑似核糖体蛋白)、TPR基序蛋白、MtN3/saliva家族跨膜蛋白及锌指蛋白，参与的生化过程包括：核糖体中蛋白质的合成(翻译)、蛋白质相互作用、基因调控、蛋白质核酸相互作用(转录因子)。(2)空间飞行能够导致水稻特定基因组序列DNA甲基化状态的变化，具体表现为甲基化多态性比例增加，多态性的变化既有甲基化的产生也有甲基化的去除。而且这种变化在空间飞行后当代的表型变化植株上更为明显。与基因组中的CG位点相比，CNG位点更容易发生DNA甲基化状态的改变。对变化位点进行测序发现空间飞行引起的DNA甲基化变化的位点主要分布在编码区和未知功能的区域上。(3)神舟6号飞船飞行可引起水稻种子氮元素代谢调节、核酸代谢、光合作用光反应、细胞氧化还原动态平衡、蛋白折叠、蛋白降解以及抗盐胁迫相关的蛋白分子发生较强烈的变化；空间飞行环境引起的当代蛋白表达谱变化特征对于越光和北京红两个品系延续到了第二代；而对于莲粳一号和珍珠红两个品系当代的蛋白表达变化特征在第二代有所回复。说明不同的遗传背景对于诱变的稳定性有一定的影响。(4)神舟六号飞行诱导的蛋白质表达谱，在第一代的变化较大的光合作用光反应类蛋白在第二代都有所降低；而氮元素代谢调节、细胞氧化还原动态平衡蛋白质在当代以及第二代中的差异表达一直稳定存在；而化学物胁迫应答、脂类合成、氧化还原以及光合作用暗反应蛋白，在第二代而非当代出现了显著的差异表达。说明与抗逆相关功能的蛋白质能在第二代中被激发出来。
找到14项技术成果数据。
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新型长效聚多肽与突变体FGF21融合蛋白
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技术简介
1.创新点 非酒精性脂肪性肝炎(NASH)现已成为肝硬化甚至肝癌的重要因素之一，其发病机制复杂，受其多重因素影响，目前临床上缺乏针对性的有效疗法。针对NASH 发病机制中的多重因素选择成纤维细胞生长因子21(FGF21)为目标蛋白，利用本课题组建立的聚多肽PsTag筛选库和分 泌型E.coli筛选平台，设计并研究了具有自主知识产权的PsTag-FGF21融合蛋白。2.主要技术指标 该融合蛋白可以针对NASH发病机制中的多重因素发挥对NASH的治疗作用，同时解决了FGF21 不稳定、易聚集、半衰期短等影响其成药性的问题，药效学研究表明PsTag-FGF21对于NASH的治疗效果显著优于原型FGF21。目前已完成PsTag-FGF21的药学研究、药效及作用机制研究、药代动力学研究和部分毒理学研究。3.技术特点与优势： (1)全新结构分子、具有自主知识产权：全新设计的聚多肽与突变体FGF21融合蛋白 (PsTag-FGF21),克服原型FGF21不稳定、易聚集、半衰期短等影响其成药性的问题，对于NASH的治疗效果显著优于原型FGF21, 半衰期比原性FGF21 显著提高了约40倍； (2)靶点新颖、药效显著:可针对NASH 发病机制中的多重因素发挥其治疗NASH的效果，在多种NASH相关模型中表现出了显著的改善糖脂代谢和缓解纤维化的作用； (3)表达量高、适合工业生产：建立分泌型E.coli菌株筛选平台，筛选获得一系列突变的菌株；获得高表达PsTag-FGF21的胞外分泌菌株，简化纯化工艺，降低生产成本。
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一种胰蛋白酶抗性改良的脂肪酶突变体及其基因和应用
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应用行业：制造业
技术简介
本发明属于基因工程和酶工程技术领域，具体内容涉及一种对胰蛋白酶抗性改良的脂肪酶lipY2‑m突变体K36G/K39T、R63G和K36G/K39T/R63G及其基因和应用。 本发明的三个突变体的胰蛋白酶抗性均有明显提高，经相同浓度的胰蛋白酶处理后，lipY2‑m的抗胰蛋白酶半衰期为41.5min，K36G/K39T的抗胰蛋白酶半衰期为43.9min；R63G的抗胰蛋白酶半衰期为45.7min；组合突变体K36G/K39T/R63G的抗胰蛋白酶半衰期为46.8min，对胰蛋白酶抗性的半衰期分别提高了5.8％、10.1％和12％，显示出了在治疗胰腺功能不全等疾病方面的潜在应用价值。
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一种碱性蛋白酶突变体及其基因、工程菌、制备方法和应用
成熟度：正在研发
技术类型：发明
应用行业：制造业
技术简介
本发明属于生物工程技术领域，具体涉及一种碱性蛋白酶突变体及其基因、工程菌、制备方法和应用。 本发明通过提取克劳氏芽孢杆菌基因组DNA，经PCR扩增得到野生型碱性蛋白酶基因序列，将扩增得到的野生型碱性蛋白酶基因通过易错PCR进行随机突变，通过高通量筛选后获得了若干个高活力碱性蛋白酶基因，再将这些高活力碱性蛋白酶基因进行DNA改组，通过筛选后获得八个更高活力的碱性蛋白酶突变体基因。 将这八个突变体基因构建重组载体并在枯草芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、克劳氏芽孢杆菌中成功表达，得到产酶活力提高的重组菌株，进一步通过发酵工艺优化获得新型碱性蛋白酶。
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一种D-阿洛酮糖-3-差向异构酶的突变体及其应用
成熟度：正在研发
技术类型：发明
应用行业：制造业
技术简介
本发明提供的D‑阿洛酮糖‑3‑差向异构酶突变体，其氨基酸序列是在如SEQ ID NO:1所示的D‑阿洛酮糖‑3‑差向异构酶氨基酸序列基础上，第124位的天冬酰胺替换为精氨酸以及第63位的丝氨酸替换为甘氨酸的氨基酸序列；或者，第105位的缬氨酸替换为丙氨酸、第124位的天冬酰胺替换为精氨酸以及第63位的丝氨酸替换为甘氨酸的氨基酸序列。 本发明所述突变体的催化活性得到显著提高，达到野生型的179％或223％，而且温度稳定性也得到了显著改善，突变体在60℃下的半衰期是野生型的1.7倍或3.7倍。 对于高温条件下生产D‑阿洛酮糖具有重要意义。
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一种亮氨酸-5-羟化酶突变体及其应用
成熟度：正在研发
技术类型：发明
应用行业：制造业
技术简介
本发明属于基因工程和酶工程技术领域，具体涉及一种活性提高的亮氨酸?5?羟化酶突变体及其应用。 本发明通过分子生物学手段获得念珠藻(Nostoc punctiforme)NIES?2108来源的亮氨酸?5?羟化酶编码基因，采用反向PCR进行定点突变获得编码突变体的基因，而后将编码突变体的基因进行异源表达获得亮氨酸?5?羟化酶的突变体V77A。 该突变体以亮氨酸和蛋氨酸为底物时，其相对酶活性较野生型分别提高了69.53％、23.26％。 本发明筛选出的活性提高的变异体，可以更高效地使亮氨酸远端的5号碳位实现羟基化，并且可催化蛋氨酸生成蛋氨酸亚砜，为工业上药物中间体的酶法催化生产提供广阔的前景。
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磷脂酶D突变体及其在制备磷脂酸、磷脂酰丝氨酸中的应用
成熟度：正在研发
技术类型：发明
应用行业：制造业
技术简介
本发明属于酶的基因工程技术领域，具体涉及一种磷脂酶D突变体及其制备与应用。 其技术方案是利用重组DNA技术对野生型磷脂酶D基因进行定点突变，得到活力较高的磷脂酶D基因，然后将高活力磷脂酶D基因在枯草芽孢杆菌表达系统、毕赤酵母表达系统（包括毕赤酵母游离表达系统和毕赤酵母细胞表面展示系统）中表达，得到产高活力磷脂酶D的重组菌株。 表达后，检测高活力磷脂酶D的比酶活较野生型磷脂酶D提高38‑140％，高活力磷脂酶D在枯草芽孢杆菌表达系统、毕赤酵母表达系统、毕赤酵母表面展示系统内发酵酶活最高值分别为36.8U/ml、48.1U/ml、140.2U/（g·细胞干重）。
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一种磷脂酶D突变体及其应用
成熟度：正在研发
技术类型：发明
应用行业：制造业
技术简介
本发明属于酶的基因工程技术领域，具体涉及一种磷脂酶D突变体及其制备与应用。 其技术方案是利用重组DNA技术对野生型磷脂酶D基因进行定点突变，得到活力较高的磷脂酶D基因，然后将高活力磷脂酶D基因在枯草芽孢杆菌表达系统、毕赤酵母表达系统（包括毕赤酵母游离表达系统和毕赤酵母细胞表面展示系统）中表达，得到产高活力磷脂酶D的重组菌株。 表达后，检测高活力磷脂酶D的比酶活较野生型磷脂酶D提高38?140％，高活力磷脂酶D在枯草芽孢杆菌表达系统、毕赤酵母表达系统、毕赤酵母表面展示系统内发酵酶活最高值分别为36.8U/ml、48.1U/ml、140.2U/（g·细胞干重）。
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一种差向异构酶的突变体及其应用
成熟度：正在研发
技术类型：发明
应用行业：制造业
技术简介
本发明提供了一种D-阿洛酮糖-3-差向异构酶的突变体构建及其应用的方法，酶的突变体的构建方法为：以来自于球形节杆菌（Arthrobacter globiformis）的D-阿洛酮糖-3-差向异构酶基因为亲本，通过同源比对及定点突变技术将酶活性催化中心的（第105位氨基酸残基）缬氨酸变成异亮氨酸；之后构建表达载体，以E.coli BL21（DE3）为异源表达宿主获得酶的突变体。 活性测定表明得到的突变体酶温度稳定性显著提高。60℃和70℃下的t1/2值分别达到了12.5h和0.5h，70℃下的半衰期较野生型延长6倍。突变体酶的活性也得到提高。 本发明筛选获得的突变体酶可以在高温下更高效地催化D-果糖异构化为D-阿洛酮糖，为工业化生产D-阿洛酮糖提供了广阔的前景，具有重要的工业应用价值。
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观赏作物组织培养及其突变体的研究
成熟度：-
技术类型：-
应用行业：农、林、牧、渔业
技术简介
花叶芋为天南星科植物，原产南美洲，其叶面色彩斑斓，是一种美丽的室内观叶植物，园艺上常规采用分球繁殖，繁殖系数低，不能适应市场需要。该试验采用切割伤组织培养混合技术及液体浅层培养和溶液培养等技术，使试管苗生长整齐一致，生长速度加快，其繁殖系数和生长速度较常规组织培养方法成倍增加。试验结合开放培养技术，建立了一套行之有效的商品化生产花叶芋的快繁体系。通过对离体条件下遗传变异的研究，获得了多倍体类型和各种叶面色斑变异类型，并试验了其遗传递能力，从而为获得新的园艺种提供了可能性，在园艺生产上具有极大的应传用潜力。该技术属国内首创，在国内同类研究中处领先地位。
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基于空间环境诱变水稻基因组特征进行突变体筛选的技术研究与应用
成熟度：-
技术类型：-
应用行业：科学研究和技术服务业
技术简介
为了进一步分析空间环境引起水稻遗传变异特征和变异位点的生物学意义，该项目需要进一步跟踪突变位点，分析这些突变位点序列特征和功能，研究这些位点在后代中的变化。分析基因组甲基化改变及蛋白质组改变特征。(1)对神舟六号飞行诱变的三个突变体进行了基因组突变率分析，对突变位点进行了克隆测序，有3个突变位点位于转座子区，而且有一个(Z-15)明显发生了转座或重组行为。发现5个突变基因，分别编码核糖体蛋白、未知蛋白(疑似核糖体蛋白)、TPR基序蛋白、MtN3/saliva家族跨膜蛋白及锌指蛋白，参与的生化过程包括：核糖体中蛋白质的合成(翻译)、蛋白质相互作用、基因调控、蛋白质核酸相互作用(转录因子)。(2)空间飞行能够导致水稻特定基因组序列DNA甲基化状态的变化，具体表现为甲基化多态性比例增加，多态性的变化既有甲基化的产生也有甲基化的去除。而且这种变化在空间飞行后当代的表型变化植株上更为明显。与基因组中的CG位点相比，CNG位点更容易发生DNA甲基化状态的改变。对变化位点进行测序发现空间飞行引起的DNA甲基化变化的位点主要分布在编码区和未知功能的区域上。(3)神舟6号飞船飞行可引起水稻种子氮元素代谢调节、核酸代谢、光合作用光反应、细胞氧化还原动态平衡、蛋白折叠、蛋白降解以及抗盐胁迫相关的蛋白分子发生较强烈的变化；空间飞行环境引起的当代蛋白表达谱变化特征对于越光和北京红两个品系延续到了第二代；而对于莲粳一号和珍珠红两个品系当代的蛋白表达变化特征在第二代有所回复。说明不同的遗传背景对于诱变的稳定性有一定的影响。(4)神舟六号飞行诱导的蛋白质表达谱，在第一代的变化较大的光合作用光反应类蛋白在第二代都有所降低；而氮元素代谢调节、细胞氧化还原动态平衡蛋白质在当代以及第二代中的差异表达一直稳定存在；而化学物胁迫应答、脂类合成、氧化还原以及光合作用暗反应蛋白，在第二代而非当代出现了显著的差异表达。说明与抗逆相关功能的蛋白质能在第二代中被激发出来。