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桂皮醛对大鼠根尖周炎根管中内毒素水平及根尖周炎症的影响
成熟度:-
技术类型:-
应用行业:科学研究和技术服务业
技术简介
根管治疗是目前公认的治疗牙髓病和根尖周病的首选方法,它一般由三大步骤组成:根管预备、根管消毒、根管充填。它的每一步是严格的也是相互联系的。化学和机械预备方法能去除根管内绝大部分的感染物质,但牙本质小管、侧枝根管、副根管等部位不可能在单纯机械预备过程中得到彻底地清理。国外多数研究也表明半数以上的感染根管在行预备后内仍能检出少量细菌。尽管这些余留细菌数量小,一旦缺乏根管消毒药物的抑制,很快就会增殖到接近原来的细菌数量水平。所以根管消毒不能忽视,它是为愈合创造条件。长期的临床追踪观察和基础研究的结果对根管消毒作用的认识现在也发生了一定的变化,强调根管消毒的程度更科学、更客观根管消毒的含义亦扩大。根管消毒方法包括:根管冲洗、根管封药、激光消毒、超声消毒等。但是临床上常用的根管消毒方法仍以根管封药为主。根管消毒剂是根管治疗术的三大研究方向之一。感染根管经过机械和化学预备后,根管内的细菌、坏死牙髓和根管内壁的感染物,大部分己被清除,但是侧壁牙本质小管深部,根管侧支等器械和冲洗液达不到的细微结构内还有残余的细菌、毒素,所以需要进一步进行根管消毒。目前在众多根管消毒方法中以药物消毒最常用。但实际上,现在没有一种根管消毒药能完全符合理想的根管消毒药所有条件。桂皮醛为天然药物肉桂挥发油的主要成分,具有抗肿瘤、抗血小板聚集、抗突变等作用,毒副作用低。体外实验研究证实,桂皮醛对122株包括了9属22种临床分离的常见厌氧菌,均有不同程度的抗菌作用。产黑色素类杆菌等革兰氏阴性杆菌对桂皮醛更敏感。桂皮醛还具有抗真菌及需氧菌的作用,且有一定的挥发性和渗透性,较符合根管消毒药的药物性能。本实验的目的是研究桂皮醛对感染根管中内毒素水平的影响及对根尖周组织炎症的影响,为开发桂皮醛作为根管消毒药提供实验依据。主要技术内容:一、材料(一)实验动物:Wistar大鼠250~350g,雌性,大连医科大学动物实验室提供。(二)实验药品与试剂:显色基质鲎试剂盒、前列腺素E2试剂盒、甲醛甲酚液、桂皮醛、0.9%氯化钠注射液、10%中性福尔马林固定液、10%EDTA溶液、30%过氧化氢溶液。(三)主要仪器设备:FJ48C型连体式牙科治疗设备、牙科X线机、721分光光度计、微量振荡器、XH-C旋涡混合器、恒温水浴箱、离心机、超薄切片机等。二、方法:(一)实验动物分组将80只Wistar大鼠随机分为4组:①甲醛甲酚组共25只,②桂皮醛组共25只,③生理盐水组共25只,④对照组5只。建立根尖周炎模型成功后处死对照组5只大鼠观察根尖周组织炎症程度,作为与封药后根尖周组织炎症程度的对照。前三组大鼠分别用于根管内毒素的检测和根尖周组织的组织病理学观察。根管内毒素和前列腺素E2的检测选用大鼠的双侧上、下颌第一磨牙,根尖周组织的组织病理学观察选用大鼠的上、下颌第一磨牙。(二)建立动物实验模型的方法1%戊巴比妥钠30mg/kg腹腔内注射麻药,麻醉后的大鼠取仰卧位,四肢及上颌固定于手术板上。用1/2号球钻将上、下颌第一磨牙开髓,开髓深度约为球钻直径的1~1.5倍并能探及穿髓点,将髓腔直接暴露于口腔环境中14天,参照X线片确定根尖周损害。(三)内毒素标准曲线的制定在净化工作台下,将内毒素工作品15EU加入1ml细菌内毒素检查用水溶解后用振荡器混匀15分钟以上使成15EU/ml,稀释成1EU/ml作为母液,再逐步稀释成0.1EU/ml,0.3EU/ml,0.6EU/ml标准内毒素溶液。各步稀释成的标准内毒素溶液都必须经漩涡混合器均匀30秒以上。然后,测出相应的吸光度值。为避免操作误差,每个样品均做2次,再求其平均值。设内毒素浓度值为X,平均吸光度值为Y,得直线回归方程Y=a+bx,用可以计算线性回归的计算器键入4个标准溶液平均吸光度和其对应的内毒素浓度,求标准曲线的线性相关系数│r│。注:相关系数│r│>0.980实验有效,│r│(四)根管内毒素检测1.根管内毒素采样。2.产色基质鲎试剂法检测根管内毒素浓度。(五)前列腺素E2检测1.根管内采样。2.酶联免疫法检测前列腺素E2。(六)根尖周组织的组织病理学观察:髓腔封药1天、3天、7天、14天、21天内毒素取样后,分别处死每组5只大鼠,切取含实验牙及其根尖周组织的上、下颌骨块,10%福尔马林液固定1周,10%EDTA脱钙30天,石蜡包埋,近远中向制作与牙长轴平行的4μm厚连续切片,尽可能通过根尖孔,HE染色,光镜观察,摄像。桂皮醛具有解热、扩张皮肤血管、促进血液循环、解表、发散(汗)、镇痛、抗真菌、抗肿瘤等药理作用,且毒副作用低,故临床应用前景广阔。桂皮醛是中药提取物,具有杀菌力强,尤其对厌氧菌有较好的抗菌作用。其挥发性大,渗透性强,操作简便,局部作为根管消毒药或盖髓剂未发现任何毒副作用。桂皮醛价格便宜,有作为一种根管消毒药物的开发价值。肉桂是我国著名经济树种之一,药材资源丰富。桂皮醛的提取工艺比较成熟,成本不高。肉桂油β-环糊精包合技术使得桂皮醛的稳定性显著提高,便于制成多种制剂应用于临床。气相色谱、气-质联用、高效液相色谱等技术能够实现对生药和各种制剂中桂皮醛的质量控制。因此,随着对桂皮醛研究的不断深入,其制剂的工艺和质量控制方法也将不断完善与提高。因此,我们认为桂皮醛或富含桂皮醛类药物制剂的研制将倍受开发者所重视,并造福于人类。
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急性肝衰竭大鼠内毒素血症及思密达的应用研究
成熟度:正在研发
技术类型:-
应用行业:制造业
技术简介
该研究用硫代乙酰胺诱导急性肝衰竭大鼠模型,测定急性肝衰竭大鼠门静脉内毒素水平、并对胃肠菌群、胃肠病理进行了研究,同时观察胃肠粘膜保护剂思密达对急性肝衰竭大鼠内毒素血症的防治作用。结果表明:急性肝衰竭大鼠门静脉内毒素水平明显升高,肠道菌群紊乱,且存在胃肠病理损伤,研究还发现思密达能明显降低急性肝衰竭大鼠门静脉内毒素水平。研究明确了急性肝功能衰竭大鼠内毒素血症的原因、较全面地揭示了急性肝功能衰竭大鼠肠道菌群变化的规律、证实胃肠粘膜保护剂思密达对急性肝功能衰竭大鼠内毒素血症有防治作用,为内毒素血症治疗提供了理论依据,为肝功能衰竭加强从肠论治提供了依据,具有很强的临床指导价值。处国内领先水平。
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壳寡糖在制备预防和治疗内毒素血症/菌血症药物中应用
成熟度:正在研发
技术类型:发明
应用行业:制造业
技术简介
本发明涉及生物医药,具体地说是壳寡糖在制备预防和治疗内毒素血症/菌血症药物中的应用;所述壳寡糖可抑制炎症因子的分泌来预防和治疗内毒素休克,即壳寡糖可进一步用于预防和治疗内毒素血症的药物中。本发明在细胞实验发现壳寡糖可抑制内毒素(Lipopolysaccharide,LPS)引发的炎性细胞因子的分泌。动物实验发现壳寡糖可以显著提高内毒素血症小鼠的存活率;抑制小鼠分泌炎症因子TNF-α;抑制小鼠巨噬细胞株RAW264.7分泌炎症因子IL-1β。
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一种检测内毒素的方法
成熟度:正在研发
技术类型:发明
应用行业:制造业
技术简介
本发明公开了一种检测内毒素的方法,包括:在鲎试剂中加入具有氧化还原活性的物质,再向鲎试剂中加入可能含有内毒素的待测样品,并对鲎试剂施加与所述具有氧化还原活性的物质相应的氧化还原电位,同时实时监测通过鲎试剂的电流大小,进而获知待测样品中内毒素的浓度;其中,加入所述鲎试剂中的内毒素浓度与通过鲎试剂的电流的骤降时间点之间存在对数线性关系。本发明通过电化学过程直接反应出鲎试剂凝固过程中粘度的改变,不受样品颜色的干扰,能快速、精确的实现对内毒素的检测,适于在药品质量控制、医疗器械热原监测等领域广泛应用。
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当归油成分的制药用途及含有它的药物组合物与制备方法
成熟度:正在研发
技术类型:发明
应用行业:农、林、牧、渔业
技术简介
一种稳定的当归油乳剂及其制备方法,含治疗有效量的藁本内酯或者含藁本内酯≥60%~99%的当归油,用于治疗和预防内毒素引发的疾病和抑制内毒素引起炎症因子,包括治疗和预防内毒素血症或内毒素休克,抑制肿瘤坏死因子、IL-1和IL-6。
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具有内毒素吸附能力的耶氏酵母和内毒素减毒大肠杆菌
成熟度:通过中试
技术类型:-
应用行业:制造业
技术简介
1成果简介 研发有效的内毒素LPS脱毒方法具有重要意义,本项目一方面通过KDO定量方法检测对LPS分子的吸附能力,从发酵食品中筛选到LPS吸附能力最强酵母菌株CSW。证实LPS与Y。 lipolytica细胞共存一段时间后,会产生LPS含量降低的现象。通过18s r DNA分析,菌株CSW1与1。0 mg/m L来源于E。 coil O111:B4的LPS共存后,可使LPS水平降低约70%,而S。 cerevisiae BY4742仅使 LPS含量近30%。 另外一方面,过敲除大肠杆菌E。 coli染色体基因上与LPS合成相关基因,构建了多株能够直接合成新型特殊结构Kdo2-lipid A的突变菌株,具有低内毒素,适合用于大肠杆菌表达宿主生产各种蛋白及氨基酸。 2关键技术 脂多糖LPS是存在于大多数革兰氏阴性菌外膜的主要组成部分,可通过激活宿主细胞内TLR4受体信号转导途径等,促进炎性细胞分泌多种细胞因子,进而引发强烈的免疫反应,造成疾病或者死亡,在食品和药品中是重要的毒力因子,因此研发有效的LPS脱毒方法具有重要意义。本成果获得了食品级的LPS脱毒菌株,具有应用前景。 工业发酵中大肠杆菌野生型菌株中内毒素释放,是导致热原污染的重要原因,这增加了分离纯化成本,本成果从源头改造获得低毒性的大肠杆菌平台菌株,避免了发酵工程中热原产生。 3知识产权 一株具有内毒素吸附特性的耶氏酵母及其吸附特性研究方法201410713700。5 ?一种低毒含五条脂肪酸链的Kdo2-单磷酸类脂A的制备与应用201510282822。8 4项目成熟度; 本成果对酵母菌株脱毒进行了系统验证,采用荧光示踪法分析了酵母菌株对 LPS 的吸附特性。通过不同LPS孵育浓度下的观察结果均表明,Y。 lipolytica细胞表面呈现出明显的LPS附着现象,结合LPS定量结果,可以推测解脂耶氏酵母反应体系中LPS含量明显降低(~70%)与其细胞表面的LPS吸附特性有关;最后分析了酵母对LPS脱毒机制,因此本成果具有重要理论基础。 通过基因工程改造获得五株E。 coli突变菌株,所合成的LPS缺失了多糖长链,变为结构特殊的Kdo2-lipid A结构,通过用活菌体直接刺激HEK-Blue hTLR4细胞,发现五株突变菌株的细胞激起TLR4信号通路的活性比野生型W3110均有所下降;细胞毒性大幅降低。 5投资期望及应用情况 LPS又称内毒素,是存在于革兰氏阴性菌细胞壁外膜表面的一种大分子物质,一般只有在细胞死亡或分解时自行释放到周围介质中,特殊条件下也可以从活细胞中直接泄漏出来。因此如何脱除LPS具有重要应用前景,将为食品和制药行业热原去除提供新的解决方法。本成果中的食品级酵母菌株,具有重要推广价值,减毒的大肠杆菌菌株也是工业发酵的良好宿主和底盘细胞。
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用于内毒素去除和生物制剂纯化的亲和膜分离器
成熟度:-
技术类型:-
应用行业:制造业
技术简介
成果内容、水平:所发明的亲和膜分离器(专利号:ZL94112925.7,ZL95110016.5,ZL96225317.0),采用新颖的膜亲和色谱技术,充分发挥了膜过程速度快、处理量大、亲和吸附选择性高的优势,可在不影响基质中其它组分的温和条件下对溶液中的微量内毒素加以清除。该膜分离器使用简便,采用注射器或小型蠕动泵即可实现溶液的净化。对于不同的使用环境和要求,可将膜分离器单独或串联使用,以实现所要求的去除效果。主要技术指标:1、使用微孔亲和膜装载于分离器中,大大降低了操作压力(由5-10Mpa降到0.1-0.2Mpa),避免使用高压传输泵;2、在亲和膜分离器的结构设计上,采用了特殊结构样品分配器,加快了样品在膜上的均匀分配和质量传递,提高分离效能10~50倍;3、亲和膜分离器可根据样品量装载不同张数的亲和膜,便于根据实际需要进行调节和控制。应用范围:主要可应用于化工、生物、医药领域、卫生,特别是基因工程中新药的研制和试验开发项目。内毒素吸附亲和膜分离器可用于水系溶液内毒素的吸附与清除。市场前景、经济效益:1994年起在军事医学科学院(北京)、沈阳军区总医院、丹东轻化工研究所进行推广,分离纯化了白蛋白、干扰素、碱性磷酸酯酶、溶菌酶、血纤溶酶原等生物大分子,取得了较好的经济效益。97年起研制的去除内毒素的亲和膜分离器推广到大连医科大学附属医院、丹东市卫生防疫站、上海医大附属中山医院、大连市卫生防疫站、鞍山第二制药厂、郑州135医院等单位,用于抗菌素、眼药水、氨基酸、白蛋白注射液、胶原蛋白等多种医药制剂中内毒素的去除,去除率均高于95%,有效成分损失小,取得了较大的经济和社会效益。
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急性肝衰竭大鼠内毒素血症及思密达的应用研究
成熟度:正在研发
技术类型:-
应用行业:制造业
技术简介
项目简介:该研究用硫代乙酰胺诱导急性肝衰竭大鼠模型,测定急性肝衰竭大鼠门静脉内毒素水平、并对胃肠菌群、胃肠病理进行了研究,同时观察胃肠粘膜保护剂思密达对急性肝衰竭大鼠内毒素血症的防治作用。结果表明:急性肝衰竭大鼠门静脉内毒素水平明显升高,肠道菌群紊乱,且存在胃肠病理损伤,研究还发现思密达能明显降低急性肝衰竭大鼠门静脉内毒素水平。研究明确了急性肝功能衰竭大鼠内毒素血症的原因、较全面地揭示了急性肝功能衰竭大鼠肠道菌群变化的规律、证实胃肠粘膜保护剂思密达对急性肝功能衰竭大鼠内毒素血症有防治作用,为内毒素血症治疗提供了理论依据,为肝功能衰竭加强从肠论治提供了依据,具有很强的临床指导价值。处国内领先水平。
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一种清除血液毒素、改善血液粘度的中药组合
成熟度:通过小试
技术类型:发明
应用行业:农、林、牧、渔业
技术简介
本发明公开了一种新的清楚血液内毒素、改善血液粘度的药物组合物及其制备方法。本发明药物组合物可按常规的中药制剂方法制备成任何一种常用的口服制剂。本发明可显著清除血液内毒素、改善血液粘度,疗效确切,显显效迅速,作用持久,此外还具有毒副作用极小、费用低廉等优点。据最新调查,中国有1.6亿成年人血脂异常,高血压高血脂者呈年轻化,原因与膳食结构及饮食习惯息息相关。为什么这么说?担任美国国家卫生研究院(NIH)营养合作委员会主席西莫普勒斯博士经研究发现:脂肪酸的不合理摄入,可引起高血压、高血脂、糖尿病、心脑血管病、肥胖、抑郁症、癌症生。目前我国市场尚缺乏清除血液内毒素为主要治疗机理的降低血粘稠度的药物。本发明提供给“三高”人群一种中草药物内服剂的解决手段,长期服用可清除血液内毒素,改善血液粘度,同时降低胆固醇,预防脑血栓等病证的发生,无毒副作用,成本相对低廉。本发明所要解决的技术问题是能够从根本上清除血液内残留毒素、改善血液成分,降低血脂、血粘度、胆固醇、甘油三酯等血液成分的异常改变,减少脂肪肝发病,预防肝硬化形成,预防和治疗高血压,以及预防和治疗心脑血管相关疾病的发生,还机体一个健康清洁的内环境,排解体内毒素残留,提供一种能够使机体轻松,神清气爽,脏腑功能调和,气血津液清新,并且具有疗效显著、成本较低、毒副作用极小的中药药物组合物。
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无内毒素的rLj-RGD3蛋白制备方法
成熟度:正在研发
技术类型:发明
应用行业:制造业
技术简介
摘要:本发明公开一种无内毒素的rLj‑RGD3蛋白制备方法,按如下步骤进行将转化有pET23b‑RGD3重组质粒的大肠杆菌BL21高密度发酵及IPTG诱导表达,收集菌体,采用高压均质机进行菌体细胞破碎,得破菌液;过滤破菌液得澄清液;将澄清液通过镍离子亲和层析进行目的蛋白的捕获;利用Superdex 75分子筛进行蛋白的第二步精细纯化;利用Q FF阴离子交换进行蛋白的第三步纯化;蛋白纯度达99%。
找到10项技术成果数据。
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桂皮醛对大鼠根尖周炎根管中内毒素水平及根尖周炎症的影响
成熟度:-
技术类型:-
应用行业:科学研究和技术服务业
技术简介
根管治疗是目前公认的治疗牙髓病和根尖周病的首选方法,它一般由三大步骤组成:根管预备、根管消毒、根管充填。它的每一步是严格的也是相互联系的。化学和机械预备方法能去除根管内绝大部分的感染物质,但牙本质小管、侧枝根管、副根管等部位不可能在单纯机械预备过程中得到彻底地清理。国外多数研究也表明半数以上的感染根管在行预备后内仍能检出少量细菌。尽管这些余留细菌数量小,一旦缺乏根管消毒药物的抑制,很快就会增殖到接近原来的细菌数量水平。所以根管消毒不能忽视,它是为愈合创造条件。长期的临床追踪观察和基础研究的结果对根管消毒作用的认识现在也发生了一定的变化,强调根管消毒的程度更科学、更客观根管消毒的含义亦扩大。根管消毒方法包括:根管冲洗、根管封药、激光消毒、超声消毒等。但是临床上常用的根管消毒方法仍以根管封药为主。根管消毒剂是根管治疗术的三大研究方向之一。感染根管经过机械和化学预备后,根管内的细菌、坏死牙髓和根管内壁的感染物,大部分己被清除,但是侧壁牙本质小管深部,根管侧支等器械和冲洗液达不到的细微结构内还有残余的细菌、毒素,所以需要进一步进行根管消毒。目前在众多根管消毒方法中以药物消毒最常用。但实际上,现在没有一种根管消毒药能完全符合理想的根管消毒药所有条件。桂皮醛为天然药物肉桂挥发油的主要成分,具有抗肿瘤、抗血小板聚集、抗突变等作用,毒副作用低。体外实验研究证实,桂皮醛对122株包括了9属22种临床分离的常见厌氧菌,均有不同程度的抗菌作用。产黑色素类杆菌等革兰氏阴性杆菌对桂皮醛更敏感。桂皮醛还具有抗真菌及需氧菌的作用,且有一定的挥发性和渗透性,较符合根管消毒药的药物性能。本实验的目的是研究桂皮醛对感染根管中内毒素水平的影响及对根尖周组织炎症的影响,为开发桂皮醛作为根管消毒药提供实验依据。主要技术内容:一、材料(一)实验动物:Wistar大鼠250~350g,雌性,大连医科大学动物实验室提供。(二)实验药品与试剂:显色基质鲎试剂盒、前列腺素E2试剂盒、甲醛甲酚液、桂皮醛、0.9%氯化钠注射液、10%中性福尔马林固定液、10%EDTA溶液、30%过氧化氢溶液。(三)主要仪器设备:FJ48C型连体式牙科治疗设备、牙科X线机、721分光光度计、微量振荡器、XH-C旋涡混合器、恒温水浴箱、离心机、超薄切片机等。二、方法:(一)实验动物分组将80只Wistar大鼠随机分为4组:①甲醛甲酚组共25只,②桂皮醛组共25只,③生理盐水组共25只,④对照组5只。建立根尖周炎模型成功后处死对照组5只大鼠观察根尖周组织炎症程度,作为与封药后根尖周组织炎症程度的对照。前三组大鼠分别用于根管内毒素的检测和根尖周组织的组织病理学观察。根管内毒素和前列腺素E2的检测选用大鼠的双侧上、下颌第一磨牙,根尖周组织的组织病理学观察选用大鼠的上、下颌第一磨牙。(二)建立动物实验模型的方法1%戊巴比妥钠30mg/kg腹腔内注射麻药,麻醉后的大鼠取仰卧位,四肢及上颌固定于手术板上。用1/2号球钻将上、下颌第一磨牙开髓,开髓深度约为球钻直径的1~1.5倍并能探及穿髓点,将髓腔直接暴露于口腔环境中14天,参照X线片确定根尖周损害。(三)内毒素标准曲线的制定在净化工作台下,将内毒素工作品15EU加入1ml细菌内毒素检查用水溶解后用振荡器混匀15分钟以上使成15EU/ml,稀释成1EU/ml作为母液,再逐步稀释成0.1EU/ml,0.3EU/ml,0.6EU/ml标准内毒素溶液。各步稀释成的标准内毒素溶液都必须经漩涡混合器均匀30秒以上。然后,测出相应的吸光度值。为避免操作误差,每个样品均做2次,再求其平均值。设内毒素浓度值为X,平均吸光度值为Y,得直线回归方程Y=a+bx,用可以计算线性回归的计算器键入4个标准溶液平均吸光度和其对应的内毒素浓度,求标准曲线的线性相关系数│r│。注:相关系数│r│>0.980实验有效,│r│(四)根管内毒素检测1.根管内毒素采样。2.产色基质鲎试剂法检测根管内毒素浓度。(五)前列腺素E2检测1.根管内采样。2.酶联免疫法检测前列腺素E2。(六)根尖周组织的组织病理学观察:髓腔封药1天、3天、7天、14天、21天内毒素取样后,分别处死每组5只大鼠,切取含实验牙及其根尖周组织的上、下颌骨块,10%福尔马林液固定1周,10%EDTA脱钙30天,石蜡包埋,近远中向制作与牙长轴平行的4μm厚连续切片,尽可能通过根尖孔,HE染色,光镜观察,摄像。桂皮醛具有解热、扩张皮肤血管、促进血液循环、解表、发散(汗)、镇痛、抗真菌、抗肿瘤等药理作用,且毒副作用低,故临床应用前景广阔。桂皮醛是中药提取物,具有杀菌力强,尤其对厌氧菌有较好的抗菌作用。其挥发性大,渗透性强,操作简便,局部作为根管消毒药或盖髓剂未发现任何毒副作用。桂皮醛价格便宜,有作为一种根管消毒药物的开发价值。肉桂是我国著名经济树种之一,药材资源丰富。桂皮醛的提取工艺比较成熟,成本不高。肉桂油β-环糊精包合技术使得桂皮醛的稳定性显著提高,便于制成多种制剂应用于临床。气相色谱、气-质联用、高效液相色谱等技术能够实现对生药和各种制剂中桂皮醛的质量控制。因此,随着对桂皮醛研究的不断深入,其制剂的工艺和质量控制方法也将不断完善与提高。因此,我们认为桂皮醛或富含桂皮醛类药物制剂的研制将倍受开发者所重视,并造福于人类。
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急性肝衰竭大鼠内毒素血症及思密达的应用研究
成熟度:正在研发
技术类型:-
应用行业:制造业
技术简介
该研究用硫代乙酰胺诱导急性肝衰竭大鼠模型,测定急性肝衰竭大鼠门静脉内毒素水平、并对胃肠菌群、胃肠病理进行了研究,同时观察胃肠粘膜保护剂思密达对急性肝衰竭大鼠内毒素血症的防治作用。结果表明:急性肝衰竭大鼠门静脉内毒素水平明显升高,肠道菌群紊乱,且存在胃肠病理损伤,研究还发现思密达能明显降低急性肝衰竭大鼠门静脉内毒素水平。研究明确了急性肝功能衰竭大鼠内毒素血症的原因、较全面地揭示了急性肝功能衰竭大鼠肠道菌群变化的规律、证实胃肠粘膜保护剂思密达对急性肝功能衰竭大鼠内毒素血症有防治作用,为内毒素血症治疗提供了理论依据,为肝功能衰竭加强从肠论治提供了依据,具有很强的临床指导价值。处国内领先水平。
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壳寡糖在制备预防和治疗内毒素血症/菌血症药物中应用
成熟度:正在研发
技术类型:发明
应用行业:制造业
技术简介
本发明涉及生物医药,具体地说是壳寡糖在制备预防和治疗内毒素血症/菌血症药物中的应用;所述壳寡糖可抑制炎症因子的分泌来预防和治疗内毒素休克,即壳寡糖可进一步用于预防和治疗内毒素血症的药物中。本发明在细胞实验发现壳寡糖可抑制内毒素(Lipopolysaccharide,LPS)引发的炎性细胞因子的分泌。动物实验发现壳寡糖可以显著提高内毒素血症小鼠的存活率;抑制小鼠分泌炎症因子TNF-α;抑制小鼠巨噬细胞株RAW264.7分泌炎症因子IL-1β。
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一种检测内毒素的方法
成熟度:正在研发
技术类型:发明
应用行业:制造业
技术简介
本发明公开了一种检测内毒素的方法,包括:在鲎试剂中加入具有氧化还原活性的物质,再向鲎试剂中加入可能含有内毒素的待测样品,并对鲎试剂施加与所述具有氧化还原活性的物质相应的氧化还原电位,同时实时监测通过鲎试剂的电流大小,进而获知待测样品中内毒素的浓度;其中,加入所述鲎试剂中的内毒素浓度与通过鲎试剂的电流的骤降时间点之间存在对数线性关系。本发明通过电化学过程直接反应出鲎试剂凝固过程中粘度的改变,不受样品颜色的干扰,能快速、精确的实现对内毒素的检测,适于在药品质量控制、医疗器械热原监测等领域广泛应用。
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当归油成分的制药用途及含有它的药物组合物与制备方法
成熟度:正在研发
技术类型:发明
应用行业:农、林、牧、渔业
技术简介
一种稳定的当归油乳剂及其制备方法,含治疗有效量的藁本内酯或者含藁本内酯≥60%~99%的当归油,用于治疗和预防内毒素引发的疾病和抑制内毒素引起炎症因子,包括治疗和预防内毒素血症或内毒素休克,抑制肿瘤坏死因子、IL-1和IL-6。
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具有内毒素吸附能力的耶氏酵母和内毒素减毒大肠杆菌
成熟度:通过中试
技术类型:-
应用行业:制造业
技术简介
1成果简介 研发有效的内毒素LPS脱毒方法具有重要意义,本项目一方面通过KDO定量方法检测对LPS分子的吸附能力,从发酵食品中筛选到LPS吸附能力最强酵母菌株CSW。证实LPS与Y。 lipolytica细胞共存一段时间后,会产生LPS含量降低的现象。通过18s r DNA分析,菌株CSW1与1。0 mg/m L来源于E。 coil O111:B4的LPS共存后,可使LPS水平降低约70%,而S。 cerevisiae BY4742仅使 LPS含量近30%。 另外一方面,过敲除大肠杆菌E。 coli染色体基因上与LPS合成相关基因,构建了多株能够直接合成新型特殊结构Kdo2-lipid A的突变菌株,具有低内毒素,适合用于大肠杆菌表达宿主生产各种蛋白及氨基酸。 2关键技术 脂多糖LPS是存在于大多数革兰氏阴性菌外膜的主要组成部分,可通过激活宿主细胞内TLR4受体信号转导途径等,促进炎性细胞分泌多种细胞因子,进而引发强烈的免疫反应,造成疾病或者死亡,在食品和药品中是重要的毒力因子,因此研发有效的LPS脱毒方法具有重要意义。本成果获得了食品级的LPS脱毒菌株,具有应用前景。 工业发酵中大肠杆菌野生型菌株中内毒素释放,是导致热原污染的重要原因,这增加了分离纯化成本,本成果从源头改造获得低毒性的大肠杆菌平台菌株,避免了发酵工程中热原产生。 3知识产权 一株具有内毒素吸附特性的耶氏酵母及其吸附特性研究方法201410713700。5 ?一种低毒含五条脂肪酸链的Kdo2-单磷酸类脂A的制备与应用201510282822。8 4项目成熟度; 本成果对酵母菌株脱毒进行了系统验证,采用荧光示踪法分析了酵母菌株对 LPS 的吸附特性。通过不同LPS孵育浓度下的观察结果均表明,Y。 lipolytica细胞表面呈现出明显的LPS附着现象,结合LPS定量结果,可以推测解脂耶氏酵母反应体系中LPS含量明显降低(~70%)与其细胞表面的LPS吸附特性有关;最后分析了酵母对LPS脱毒机制,因此本成果具有重要理论基础。 通过基因工程改造获得五株E。 coli突变菌株,所合成的LPS缺失了多糖长链,变为结构特殊的Kdo2-lipid A结构,通过用活菌体直接刺激HEK-Blue hTLR4细胞,发现五株突变菌株的细胞激起TLR4信号通路的活性比野生型W3110均有所下降;细胞毒性大幅降低。 5投资期望及应用情况 LPS又称内毒素,是存在于革兰氏阴性菌细胞壁外膜表面的一种大分子物质,一般只有在细胞死亡或分解时自行释放到周围介质中,特殊条件下也可以从活细胞中直接泄漏出来。因此如何脱除LPS具有重要应用前景,将为食品和制药行业热原去除提供新的解决方法。本成果中的食品级酵母菌株,具有重要推广价值,减毒的大肠杆菌菌株也是工业发酵的良好宿主和底盘细胞。
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用于内毒素去除和生物制剂纯化的亲和膜分离器
成熟度:-
技术类型:-
应用行业:制造业
技术简介
成果内容、水平:所发明的亲和膜分离器(专利号:ZL94112925.7,ZL95110016.5,ZL96225317.0),采用新颖的膜亲和色谱技术,充分发挥了膜过程速度快、处理量大、亲和吸附选择性高的优势,可在不影响基质中其它组分的温和条件下对溶液中的微量内毒素加以清除。该膜分离器使用简便,采用注射器或小型蠕动泵即可实现溶液的净化。对于不同的使用环境和要求,可将膜分离器单独或串联使用,以实现所要求的去除效果。主要技术指标:1、使用微孔亲和膜装载于分离器中,大大降低了操作压力(由5-10Mpa降到0.1-0.2Mpa),避免使用高压传输泵;2、在亲和膜分离器的结构设计上,采用了特殊结构样品分配器,加快了样品在膜上的均匀分配和质量传递,提高分离效能10~50倍;3、亲和膜分离器可根据样品量装载不同张数的亲和膜,便于根据实际需要进行调节和控制。应用范围:主要可应用于化工、生物、医药领域、卫生,特别是基因工程中新药的研制和试验开发项目。内毒素吸附亲和膜分离器可用于水系溶液内毒素的吸附与清除。市场前景、经济效益:1994年起在军事医学科学院(北京)、沈阳军区总医院、丹东轻化工研究所进行推广,分离纯化了白蛋白、干扰素、碱性磷酸酯酶、溶菌酶、血纤溶酶原等生物大分子,取得了较好的经济效益。97年起研制的去除内毒素的亲和膜分离器推广到大连医科大学附属医院、丹东市卫生防疫站、上海医大附属中山医院、大连市卫生防疫站、鞍山第二制药厂、郑州135医院等单位,用于抗菌素、眼药水、氨基酸、白蛋白注射液、胶原蛋白等多种医药制剂中内毒素的去除,去除率均高于95%,有效成分损失小,取得了较大的经济和社会效益。
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急性肝衰竭大鼠内毒素血症及思密达的应用研究
成熟度:正在研发
技术类型:-
应用行业:制造业
技术简介
项目简介:该研究用硫代乙酰胺诱导急性肝衰竭大鼠模型,测定急性肝衰竭大鼠门静脉内毒素水平、并对胃肠菌群、胃肠病理进行了研究,同时观察胃肠粘膜保护剂思密达对急性肝衰竭大鼠内毒素血症的防治作用。结果表明:急性肝衰竭大鼠门静脉内毒素水平明显升高,肠道菌群紊乱,且存在胃肠病理损伤,研究还发现思密达能明显降低急性肝衰竭大鼠门静脉内毒素水平。研究明确了急性肝功能衰竭大鼠内毒素血症的原因、较全面地揭示了急性肝功能衰竭大鼠肠道菌群变化的规律、证实胃肠粘膜保护剂思密达对急性肝功能衰竭大鼠内毒素血症有防治作用,为内毒素血症治疗提供了理论依据,为肝功能衰竭加强从肠论治提供了依据,具有很强的临床指导价值。处国内领先水平。
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一种清除血液毒素、改善血液粘度的中药组合
成熟度:通过小试
技术类型:发明
应用行业:农、林、牧、渔业
技术简介
本发明公开了一种新的清楚血液内毒素、改善血液粘度的药物组合物及其制备方法。本发明药物组合物可按常规的中药制剂方法制备成任何一种常用的口服制剂。本发明可显著清除血液内毒素、改善血液粘度,疗效确切,显显效迅速,作用持久,此外还具有毒副作用极小、费用低廉等优点。据最新调查,中国有1.6亿成年人血脂异常,高血压高血脂者呈年轻化,原因与膳食结构及饮食习惯息息相关。为什么这么说?担任美国国家卫生研究院(NIH)营养合作委员会主席西莫普勒斯博士经研究发现:脂肪酸的不合理摄入,可引起高血压、高血脂、糖尿病、心脑血管病、肥胖、抑郁症、癌症生。目前我国市场尚缺乏清除血液内毒素为主要治疗机理的降低血粘稠度的药物。本发明提供给“三高”人群一种中草药物内服剂的解决手段,长期服用可清除血液内毒素,改善血液粘度,同时降低胆固醇,预防脑血栓等病证的发生,无毒副作用,成本相对低廉。本发明所要解决的技术问题是能够从根本上清除血液内残留毒素、改善血液成分,降低血脂、血粘度、胆固醇、甘油三酯等血液成分的异常改变,减少脂肪肝发病,预防肝硬化形成,预防和治疗高血压,以及预防和治疗心脑血管相关疾病的发生,还机体一个健康清洁的内环境,排解体内毒素残留,提供一种能够使机体轻松,神清气爽,脏腑功能调和,气血津液清新,并且具有疗效显著、成本较低、毒副作用极小的中药药物组合物。
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无内毒素的rLj-RGD3蛋白制备方法
成熟度:正在研发
技术类型:发明
应用行业:制造业
技术简介
摘要:本发明公开一种无内毒素的rLj‑RGD3蛋白制备方法,按如下步骤进行将转化有pET23b‑RGD3重组质粒的大肠杆菌BL21高密度发酵及IPTG诱导表达,收集菌体,采用高压均质机进行菌体细胞破碎,得破菌液;过滤破菌液得澄清液;将澄清液通过镍离子亲和层析进行目的蛋白的捕获;利用Superdex 75分子筛进行蛋白的第二步精细纯化;利用Q FF阴离子交换进行蛋白的第三步纯化;蛋白纯度达99%。
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桂皮醛对大鼠根尖周炎根管中内毒素水平及根尖周炎症的影响
成熟度:-
技术类型:-
应用行业:科学研究和技术服务业
技术简介
根管治疗是目前公认的治疗牙髓病和根尖周病的首选方法,它一般由三大步骤组成:根管预备、根管消毒、根管充填。它的每一步是严格的也是相互联系的。化学和机械预备方法能去除根管内绝大部分的感染物质,但牙本质小管、侧枝根管、副根管等部位不可能在单纯机械预备过程中得到彻底地清理。国外多数研究也表明半数以上的感染根管在行预备后内仍能检出少量细菌。尽管这些余留细菌数量小,一旦缺乏根管消毒药物的抑制,很快就会增殖到接近原来的细菌数量水平。所以根管消毒不能忽视,它是为愈合创造条件。长期的临床追踪观察和基础研究的结果对根管消毒作用的认识现在也发生了一定的变化,强调根管消毒的程度更科学、更客观根管消毒的含义亦扩大。根管消毒方法包括:根管冲洗、根管封药、激光消毒、超声消毒等。但是临床上常用的根管消毒方法仍以根管封药为主。根管消毒剂是根管治疗术的三大研究方向之一。感染根管经过机械和化学预备后,根管内的细菌、坏死牙髓和根管内壁的感染物,大部分己被清除,但是侧壁牙本质小管深部,根管侧支等器械和冲洗液达不到的细微结构内还有残余的细菌、毒素,所以需要进一步进行根管消毒。目前在众多根管消毒方法中以药物消毒最常用。但实际上,现在没有一种根管消毒药能完全符合理想的根管消毒药所有条件。桂皮醛为天然药物肉桂挥发油的主要成分,具有抗肿瘤、抗血小板聚集、抗突变等作用,毒副作用低。体外实验研究证实,桂皮醛对122株包括了9属22种临床分离的常见厌氧菌,均有不同程度的抗菌作用。产黑色素类杆菌等革兰氏阴性杆菌对桂皮醛更敏感。桂皮醛还具有抗真菌及需氧菌的作用,且有一定的挥发性和渗透性,较符合根管消毒药的药物性能。本实验的目的是研究桂皮醛对感染根管中内毒素水平的影响及对根尖周组织炎症的影响,为开发桂皮醛作为根管消毒药提供实验依据。主要技术内容:一、材料(一)实验动物:Wistar大鼠250~350g,雌性,大连医科大学动物实验室提供。(二)实验药品与试剂:显色基质鲎试剂盒、前列腺素E2试剂盒、甲醛甲酚液、桂皮醛、0.9%氯化钠注射液、10%中性福尔马林固定液、10%EDTA溶液、30%过氧化氢溶液。(三)主要仪器设备:FJ48C型连体式牙科治疗设备、牙科X线机、721分光光度计、微量振荡器、XH-C旋涡混合器、恒温水浴箱、离心机、超薄切片机等。二、方法:(一)实验动物分组将80只Wistar大鼠随机分为4组:①甲醛甲酚组共25只,②桂皮醛组共25只,③生理盐水组共25只,④对照组5只。建立根尖周炎模型成功后处死对照组5只大鼠观察根尖周组织炎症程度,作为与封药后根尖周组织炎症程度的对照。前三组大鼠分别用于根管内毒素的检测和根尖周组织的组织病理学观察。根管内毒素和前列腺素E2的检测选用大鼠的双侧上、下颌第一磨牙,根尖周组织的组织病理学观察选用大鼠的上、下颌第一磨牙。(二)建立动物实验模型的方法1%戊巴比妥钠30mg/kg腹腔内注射麻药,麻醉后的大鼠取仰卧位,四肢及上颌固定于手术板上。用1/2号球钻将上、下颌第一磨牙开髓,开髓深度约为球钻直径的1~1.5倍并能探及穿髓点,将髓腔直接暴露于口腔环境中14天,参照X线片确定根尖周损害。(三)内毒素标准曲线的制定在净化工作台下,将内毒素工作品15EU加入1ml细菌内毒素检查用水溶解后用振荡器混匀15分钟以上使成15EU/ml,稀释成1EU/ml作为母液,再逐步稀释成0.1EU/ml,0.3EU/ml,0.6EU/ml标准内毒素溶液。各步稀释成的标准内毒素溶液都必须经漩涡混合器均匀30秒以上。然后,测出相应的吸光度值。为避免操作误差,每个样品均做2次,再求其平均值。设内毒素浓度值为X,平均吸光度值为Y,得直线回归方程Y=a+bx,用可以计算线性回归的计算器键入4个标准溶液平均吸光度和其对应的内毒素浓度,求标准曲线的线性相关系数│r│。注:相关系数│r│>0.980实验有效,│r│(四)根管内毒素检测1.根管内毒素采样。2.产色基质鲎试剂法检测根管内毒素浓度。(五)前列腺素E2检测1.根管内采样。2.酶联免疫法检测前列腺素E2。(六)根尖周组织的组织病理学观察:髓腔封药1天、3天、7天、14天、21天内毒素取样后,分别处死每组5只大鼠,切取含实验牙及其根尖周组织的上、下颌骨块,10%福尔马林液固定1周,10%EDTA脱钙30天,石蜡包埋,近远中向制作与牙长轴平行的4μm厚连续切片,尽可能通过根尖孔,HE染色,光镜观察,摄像。桂皮醛具有解热、扩张皮肤血管、促进血液循环、解表、发散(汗)、镇痛、抗真菌、抗肿瘤等药理作用,且毒副作用低,故临床应用前景广阔。桂皮醛是中药提取物,具有杀菌力强,尤其对厌氧菌有较好的抗菌作用。其挥发性大,渗透性强,操作简便,局部作为根管消毒药或盖髓剂未发现任何毒副作用。桂皮醛价格便宜,有作为一种根管消毒药物的开发价值。肉桂是我国著名经济树种之一,药材资源丰富。桂皮醛的提取工艺比较成熟,成本不高。肉桂油β-环糊精包合技术使得桂皮醛的稳定性显著提高,便于制成多种制剂应用于临床。气相色谱、气-质联用、高效液相色谱等技术能够实现对生药和各种制剂中桂皮醛的质量控制。因此,随着对桂皮醛研究的不断深入,其制剂的工艺和质量控制方法也将不断完善与提高。因此,我们认为桂皮醛或富含桂皮醛类药物制剂的研制将倍受开发者所重视,并造福于人类。
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急性肝衰竭大鼠内毒素血症及思密达的应用研究
成熟度:正在研发
技术类型:-
应用行业:制造业
技术简介
该研究用硫代乙酰胺诱导急性肝衰竭大鼠模型,测定急性肝衰竭大鼠门静脉内毒素水平、并对胃肠菌群、胃肠病理进行了研究,同时观察胃肠粘膜保护剂思密达对急性肝衰竭大鼠内毒素血症的防治作用。结果表明:急性肝衰竭大鼠门静脉内毒素水平明显升高,肠道菌群紊乱,且存在胃肠病理损伤,研究还发现思密达能明显降低急性肝衰竭大鼠门静脉内毒素水平。研究明确了急性肝功能衰竭大鼠内毒素血症的原因、较全面地揭示了急性肝功能衰竭大鼠肠道菌群变化的规律、证实胃肠粘膜保护剂思密达对急性肝功能衰竭大鼠内毒素血症有防治作用,为内毒素血症治疗提供了理论依据,为肝功能衰竭加强从肠论治提供了依据,具有很强的临床指导价值。处国内领先水平。
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壳寡糖在制备预防和治疗内毒素血症/菌血症药物中应用
成熟度:正在研发
技术类型:发明
应用行业:制造业
技术简介
本发明涉及生物医药,具体地说是壳寡糖在制备预防和治疗内毒素血症/菌血症药物中的应用;所述壳寡糖可抑制炎症因子的分泌来预防和治疗内毒素休克,即壳寡糖可进一步用于预防和治疗内毒素血症的药物中。本发明在细胞实验发现壳寡糖可抑制内毒素(Lipopolysaccharide,LPS)引发的炎性细胞因子的分泌。动物实验发现壳寡糖可以显著提高内毒素血症小鼠的存活率;抑制小鼠分泌炎症因子TNF-α;抑制小鼠巨噬细胞株RAW264.7分泌炎症因子IL-1β。
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一种检测内毒素的方法
成熟度:正在研发
技术类型:发明
应用行业:制造业
技术简介
本发明公开了一种检测内毒素的方法,包括:在鲎试剂中加入具有氧化还原活性的物质,再向鲎试剂中加入可能含有内毒素的待测样品,并对鲎试剂施加与所述具有氧化还原活性的物质相应的氧化还原电位,同时实时监测通过鲎试剂的电流大小,进而获知待测样品中内毒素的浓度;其中,加入所述鲎试剂中的内毒素浓度与通过鲎试剂的电流的骤降时间点之间存在对数线性关系。本发明通过电化学过程直接反应出鲎试剂凝固过程中粘度的改变,不受样品颜色的干扰,能快速、精确的实现对内毒素的检测,适于在药品质量控制、医疗器械热原监测等领域广泛应用。
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当归油成分的制药用途及含有它的药物组合物与制备方法
成熟度:正在研发
技术类型:发明
应用行业:农、林、牧、渔业
技术简介
一种稳定的当归油乳剂及其制备方法,含治疗有效量的藁本内酯或者含藁本内酯≥60%~99%的当归油,用于治疗和预防内毒素引发的疾病和抑制内毒素引起炎症因子,包括治疗和预防内毒素血症或内毒素休克,抑制肿瘤坏死因子、IL-1和IL-6。
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具有内毒素吸附能力的耶氏酵母和内毒素减毒大肠杆菌
成熟度:通过中试
技术类型:-
应用行业:制造业
技术简介
1成果简介 研发有效的内毒素LPS脱毒方法具有重要意义,本项目一方面通过KDO定量方法检测对LPS分子的吸附能力,从发酵食品中筛选到LPS吸附能力最强酵母菌株CSW。证实LPS与Y。 lipolytica细胞共存一段时间后,会产生LPS含量降低的现象。通过18s r DNA分析,菌株CSW1与1。0 mg/m L来源于E。 coil O111:B4的LPS共存后,可使LPS水平降低约70%,而S。 cerevisiae BY4742仅使 LPS含量近30%。 另外一方面,过敲除大肠杆菌E。 coli染色体基因上与LPS合成相关基因,构建了多株能够直接合成新型特殊结构Kdo2-lipid A的突变菌株,具有低内毒素,适合用于大肠杆菌表达宿主生产各种蛋白及氨基酸。 2关键技术 脂多糖LPS是存在于大多数革兰氏阴性菌外膜的主要组成部分,可通过激活宿主细胞内TLR4受体信号转导途径等,促进炎性细胞分泌多种细胞因子,进而引发强烈的免疫反应,造成疾病或者死亡,在食品和药品中是重要的毒力因子,因此研发有效的LPS脱毒方法具有重要意义。本成果获得了食品级的LPS脱毒菌株,具有应用前景。 工业发酵中大肠杆菌野生型菌株中内毒素释放,是导致热原污染的重要原因,这增加了分离纯化成本,本成果从源头改造获得低毒性的大肠杆菌平台菌株,避免了发酵工程中热原产生。 3知识产权 一株具有内毒素吸附特性的耶氏酵母及其吸附特性研究方法201410713700。5 ?一种低毒含五条脂肪酸链的Kdo2-单磷酸类脂A的制备与应用201510282822。8 4项目成熟度; 本成果对酵母菌株脱毒进行了系统验证,采用荧光示踪法分析了酵母菌株对 LPS 的吸附特性。通过不同LPS孵育浓度下的观察结果均表明,Y。 lipolytica细胞表面呈现出明显的LPS附着现象,结合LPS定量结果,可以推测解脂耶氏酵母反应体系中LPS含量明显降低(~70%)与其细胞表面的LPS吸附特性有关;最后分析了酵母对LPS脱毒机制,因此本成果具有重要理论基础。 通过基因工程改造获得五株E。 coli突变菌株,所合成的LPS缺失了多糖长链,变为结构特殊的Kdo2-lipid A结构,通过用活菌体直接刺激HEK-Blue hTLR4细胞,发现五株突变菌株的细胞激起TLR4信号通路的活性比野生型W3110均有所下降;细胞毒性大幅降低。 5投资期望及应用情况 LPS又称内毒素,是存在于革兰氏阴性菌细胞壁外膜表面的一种大分子物质,一般只有在细胞死亡或分解时自行释放到周围介质中,特殊条件下也可以从活细胞中直接泄漏出来。因此如何脱除LPS具有重要应用前景,将为食品和制药行业热原去除提供新的解决方法。本成果中的食品级酵母菌株,具有重要推广价值,减毒的大肠杆菌菌株也是工业发酵的良好宿主和底盘细胞。
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用于内毒素去除和生物制剂纯化的亲和膜分离器
成熟度:-
技术类型:-
应用行业:制造业
技术简介
成果内容、水平:所发明的亲和膜分离器(专利号:ZL94112925.7,ZL95110016.5,ZL96225317.0),采用新颖的膜亲和色谱技术,充分发挥了膜过程速度快、处理量大、亲和吸附选择性高的优势,可在不影响基质中其它组分的温和条件下对溶液中的微量内毒素加以清除。该膜分离器使用简便,采用注射器或小型蠕动泵即可实现溶液的净化。对于不同的使用环境和要求,可将膜分离器单独或串联使用,以实现所要求的去除效果。主要技术指标:1、使用微孔亲和膜装载于分离器中,大大降低了操作压力(由5-10Mpa降到0.1-0.2Mpa),避免使用高压传输泵;2、在亲和膜分离器的结构设计上,采用了特殊结构样品分配器,加快了样品在膜上的均匀分配和质量传递,提高分离效能10~50倍;3、亲和膜分离器可根据样品量装载不同张数的亲和膜,便于根据实际需要进行调节和控制。应用范围:主要可应用于化工、生物、医药领域、卫生,特别是基因工程中新药的研制和试验开发项目。内毒素吸附亲和膜分离器可用于水系溶液内毒素的吸附与清除。市场前景、经济效益:1994年起在军事医学科学院(北京)、沈阳军区总医院、丹东轻化工研究所进行推广,分离纯化了白蛋白、干扰素、碱性磷酸酯酶、溶菌酶、血纤溶酶原等生物大分子,取得了较好的经济效益。97年起研制的去除内毒素的亲和膜分离器推广到大连医科大学附属医院、丹东市卫生防疫站、上海医大附属中山医院、大连市卫生防疫站、鞍山第二制药厂、郑州135医院等单位,用于抗菌素、眼药水、氨基酸、白蛋白注射液、胶原蛋白等多种医药制剂中内毒素的去除,去除率均高于95%,有效成分损失小,取得了较大的经济和社会效益。
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急性肝衰竭大鼠内毒素血症及思密达的应用研究
成熟度:正在研发
技术类型:-
应用行业:制造业
技术简介
项目简介:该研究用硫代乙酰胺诱导急性肝衰竭大鼠模型,测定急性肝衰竭大鼠门静脉内毒素水平、并对胃肠菌群、胃肠病理进行了研究,同时观察胃肠粘膜保护剂思密达对急性肝衰竭大鼠内毒素血症的防治作用。结果表明:急性肝衰竭大鼠门静脉内毒素水平明显升高,肠道菌群紊乱,且存在胃肠病理损伤,研究还发现思密达能明显降低急性肝衰竭大鼠门静脉内毒素水平。研究明确了急性肝功能衰竭大鼠内毒素血症的原因、较全面地揭示了急性肝功能衰竭大鼠肠道菌群变化的规律、证实胃肠粘膜保护剂思密达对急性肝功能衰竭大鼠内毒素血症有防治作用,为内毒素血症治疗提供了理论依据,为肝功能衰竭加强从肠论治提供了依据,具有很强的临床指导价值。处国内领先水平。
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一种清除血液毒素、改善血液粘度的中药组合
成熟度:通过小试
技术类型:发明
应用行业:农、林、牧、渔业
技术简介
本发明公开了一种新的清楚血液内毒素、改善血液粘度的药物组合物及其制备方法。本发明药物组合物可按常规的中药制剂方法制备成任何一种常用的口服制剂。本发明可显著清除血液内毒素、改善血液粘度,疗效确切,显显效迅速,作用持久,此外还具有毒副作用极小、费用低廉等优点。据最新调查,中国有1.6亿成年人血脂异常,高血压高血脂者呈年轻化,原因与膳食结构及饮食习惯息息相关。为什么这么说?担任美国国家卫生研究院(NIH)营养合作委员会主席西莫普勒斯博士经研究发现:脂肪酸的不合理摄入,可引起高血压、高血脂、糖尿病、心脑血管病、肥胖、抑郁症、癌症生。目前我国市场尚缺乏清除血液内毒素为主要治疗机理的降低血粘稠度的药物。本发明提供给“三高”人群一种中草药物内服剂的解决手段,长期服用可清除血液内毒素,改善血液粘度,同时降低胆固醇,预防脑血栓等病证的发生,无毒副作用,成本相对低廉。本发明所要解决的技术问题是能够从根本上清除血液内残留毒素、改善血液成分,降低血脂、血粘度、胆固醇、甘油三酯等血液成分的异常改变,减少脂肪肝发病,预防肝硬化形成,预防和治疗高血压,以及预防和治疗心脑血管相关疾病的发生,还机体一个健康清洁的内环境,排解体内毒素残留,提供一种能够使机体轻松,神清气爽,脏腑功能调和,气血津液清新,并且具有疗效显著、成本较低、毒副作用极小的中药药物组合物。
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无内毒素的rLj-RGD3蛋白制备方法
成熟度:正在研发
技术类型:发明
应用行业:制造业
技术简介
摘要:本发明公开一种无内毒素的rLj‑RGD3蛋白制备方法,按如下步骤进行将转化有pET23b‑RGD3重组质粒的大肠杆菌BL21高密度发酵及IPTG诱导表达,收集菌体,采用高压均质机进行菌体细胞破碎,得破菌液;过滤破菌液得澄清液;将澄清液通过镍离子亲和层析进行目的蛋白的捕获;利用Superdex 75分子筛进行蛋白的第二步精细纯化;利用Q FF阴离子交换进行蛋白的第三步纯化;蛋白纯度达99%。
找到10项技术成果数据。
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桂皮醛对大鼠根尖周炎根管中内毒素水平及根尖周炎症的影响
成熟度:-
技术类型:-
应用行业:科学研究和技术服务业
技术简介
根管治疗是目前公认的治疗牙髓病和根尖周病的首选方法,它一般由三大步骤组成:根管预备、根管消毒、根管充填。它的每一步是严格的也是相互联系的。化学和机械预备方法能去除根管内绝大部分的感染物质,但牙本质小管、侧枝根管、副根管等部位不可能在单纯机械预备过程中得到彻底地清理。国外多数研究也表明半数以上的感染根管在行预备后内仍能检出少量细菌。尽管这些余留细菌数量小,一旦缺乏根管消毒药物的抑制,很快就会增殖到接近原来的细菌数量水平。所以根管消毒不能忽视,它是为愈合创造条件。长期的临床追踪观察和基础研究的结果对根管消毒作用的认识现在也发生了一定的变化,强调根管消毒的程度更科学、更客观根管消毒的含义亦扩大。根管消毒方法包括:根管冲洗、根管封药、激光消毒、超声消毒等。但是临床上常用的根管消毒方法仍以根管封药为主。根管消毒剂是根管治疗术的三大研究方向之一。感染根管经过机械和化学预备后,根管内的细菌、坏死牙髓和根管内壁的感染物,大部分己被清除,但是侧壁牙本质小管深部,根管侧支等器械和冲洗液达不到的细微结构内还有残余的细菌、毒素,所以需要进一步进行根管消毒。目前在众多根管消毒方法中以药物消毒最常用。但实际上,现在没有一种根管消毒药能完全符合理想的根管消毒药所有条件。桂皮醛为天然药物肉桂挥发油的主要成分,具有抗肿瘤、抗血小板聚集、抗突变等作用,毒副作用低。体外实验研究证实,桂皮醛对122株包括了9属22种临床分离的常见厌氧菌,均有不同程度的抗菌作用。产黑色素类杆菌等革兰氏阴性杆菌对桂皮醛更敏感。桂皮醛还具有抗真菌及需氧菌的作用,且有一定的挥发性和渗透性,较符合根管消毒药的药物性能。本实验的目的是研究桂皮醛对感染根管中内毒素水平的影响及对根尖周组织炎症的影响,为开发桂皮醛作为根管消毒药提供实验依据。主要技术内容:一、材料(一)实验动物:Wistar大鼠250~350g,雌性,大连医科大学动物实验室提供。(二)实验药品与试剂:显色基质鲎试剂盒、前列腺素E2试剂盒、甲醛甲酚液、桂皮醛、0.9%氯化钠注射液、10%中性福尔马林固定液、10%EDTA溶液、30%过氧化氢溶液。(三)主要仪器设备:FJ48C型连体式牙科治疗设备、牙科X线机、721分光光度计、微量振荡器、XH-C旋涡混合器、恒温水浴箱、离心机、超薄切片机等。二、方法:(一)实验动物分组将80只Wistar大鼠随机分为4组:①甲醛甲酚组共25只,②桂皮醛组共25只,③生理盐水组共25只,④对照组5只。建立根尖周炎模型成功后处死对照组5只大鼠观察根尖周组织炎症程度,作为与封药后根尖周组织炎症程度的对照。前三组大鼠分别用于根管内毒素的检测和根尖周组织的组织病理学观察。根管内毒素和前列腺素E2的检测选用大鼠的双侧上、下颌第一磨牙,根尖周组织的组织病理学观察选用大鼠的上、下颌第一磨牙。(二)建立动物实验模型的方法1%戊巴比妥钠30mg/kg腹腔内注射麻药,麻醉后的大鼠取仰卧位,四肢及上颌固定于手术板上。用1/2号球钻将上、下颌第一磨牙开髓,开髓深度约为球钻直径的1~1.5倍并能探及穿髓点,将髓腔直接暴露于口腔环境中14天,参照X线片确定根尖周损害。(三)内毒素标准曲线的制定在净化工作台下,将内毒素工作品15EU加入1ml细菌内毒素检查用水溶解后用振荡器混匀15分钟以上使成15EU/ml,稀释成1EU/ml作为母液,再逐步稀释成0.1EU/ml,0.3EU/ml,0.6EU/ml标准内毒素溶液。各步稀释成的标准内毒素溶液都必须经漩涡混合器均匀30秒以上。然后,测出相应的吸光度值。为避免操作误差,每个样品均做2次,再求其平均值。设内毒素浓度值为X,平均吸光度值为Y,得直线回归方程Y=a+bx,用可以计算线性回归的计算器键入4个标准溶液平均吸光度和其对应的内毒素浓度,求标准曲线的线性相关系数│r│。注:相关系数│r│>0.980实验有效,│r│(四)根管内毒素检测1.根管内毒素采样。2.产色基质鲎试剂法检测根管内毒素浓度。(五)前列腺素E2检测1.根管内采样。2.酶联免疫法检测前列腺素E2。(六)根尖周组织的组织病理学观察:髓腔封药1天、3天、7天、14天、21天内毒素取样后,分别处死每组5只大鼠,切取含实验牙及其根尖周组织的上、下颌骨块,10%福尔马林液固定1周,10%EDTA脱钙30天,石蜡包埋,近远中向制作与牙长轴平行的4μm厚连续切片,尽可能通过根尖孔,HE染色,光镜观察,摄像。桂皮醛具有解热、扩张皮肤血管、促进血液循环、解表、发散(汗)、镇痛、抗真菌、抗肿瘤等药理作用,且毒副作用低,故临床应用前景广阔。桂皮醛是中药提取物,具有杀菌力强,尤其对厌氧菌有较好的抗菌作用。其挥发性大,渗透性强,操作简便,局部作为根管消毒药或盖髓剂未发现任何毒副作用。桂皮醛价格便宜,有作为一种根管消毒药物的开发价值。肉桂是我国著名经济树种之一,药材资源丰富。桂皮醛的提取工艺比较成熟,成本不高。肉桂油β-环糊精包合技术使得桂皮醛的稳定性显著提高,便于制成多种制剂应用于临床。气相色谱、气-质联用、高效液相色谱等技术能够实现对生药和各种制剂中桂皮醛的质量控制。因此,随着对桂皮醛研究的不断深入,其制剂的工艺和质量控制方法也将不断完善与提高。因此,我们认为桂皮醛或富含桂皮醛类药物制剂的研制将倍受开发者所重视,并造福于人类。
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急性肝衰竭大鼠内毒素血症及思密达的应用研究
成熟度:正在研发
技术类型:-
应用行业:制造业
技术简介
该研究用硫代乙酰胺诱导急性肝衰竭大鼠模型,测定急性肝衰竭大鼠门静脉内毒素水平、并对胃肠菌群、胃肠病理进行了研究,同时观察胃肠粘膜保护剂思密达对急性肝衰竭大鼠内毒素血症的防治作用。结果表明:急性肝衰竭大鼠门静脉内毒素水平明显升高,肠道菌群紊乱,且存在胃肠病理损伤,研究还发现思密达能明显降低急性肝衰竭大鼠门静脉内毒素水平。研究明确了急性肝功能衰竭大鼠内毒素血症的原因、较全面地揭示了急性肝功能衰竭大鼠肠道菌群变化的规律、证实胃肠粘膜保护剂思密达对急性肝功能衰竭大鼠内毒素血症有防治作用,为内毒素血症治疗提供了理论依据,为肝功能衰竭加强从肠论治提供了依据,具有很强的临床指导价值。处国内领先水平。
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壳寡糖在制备预防和治疗内毒素血症/菌血症药物中应用
成熟度:正在研发
技术类型:发明
应用行业:制造业
技术简介
本发明涉及生物医药,具体地说是壳寡糖在制备预防和治疗内毒素血症/菌血症药物中的应用;所述壳寡糖可抑制炎症因子的分泌来预防和治疗内毒素休克,即壳寡糖可进一步用于预防和治疗内毒素血症的药物中。本发明在细胞实验发现壳寡糖可抑制内毒素(Lipopolysaccharide,LPS)引发的炎性细胞因子的分泌。动物实验发现壳寡糖可以显著提高内毒素血症小鼠的存活率;抑制小鼠分泌炎症因子TNF-α;抑制小鼠巨噬细胞株RAW264.7分泌炎症因子IL-1β。
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一种检测内毒素的方法
成熟度:正在研发
技术类型:发明
应用行业:制造业
技术简介
本发明公开了一种检测内毒素的方法,包括:在鲎试剂中加入具有氧化还原活性的物质,再向鲎试剂中加入可能含有内毒素的待测样品,并对鲎试剂施加与所述具有氧化还原活性的物质相应的氧化还原电位,同时实时监测通过鲎试剂的电流大小,进而获知待测样品中内毒素的浓度;其中,加入所述鲎试剂中的内毒素浓度与通过鲎试剂的电流的骤降时间点之间存在对数线性关系。本发明通过电化学过程直接反应出鲎试剂凝固过程中粘度的改变,不受样品颜色的干扰,能快速、精确的实现对内毒素的检测,适于在药品质量控制、医疗器械热原监测等领域广泛应用。
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当归油成分的制药用途及含有它的药物组合物与制备方法
成熟度:正在研发
技术类型:发明
应用行业:农、林、牧、渔业
技术简介
一种稳定的当归油乳剂及其制备方法,含治疗有效量的藁本内酯或者含藁本内酯≥60%~99%的当归油,用于治疗和预防内毒素引发的疾病和抑制内毒素引起炎症因子,包括治疗和预防内毒素血症或内毒素休克,抑制肿瘤坏死因子、IL-1和IL-6。
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具有内毒素吸附能力的耶氏酵母和内毒素减毒大肠杆菌
成熟度:通过中试
技术类型:-
应用行业:制造业
技术简介
1成果简介 研发有效的内毒素LPS脱毒方法具有重要意义,本项目一方面通过KDO定量方法检测对LPS分子的吸附能力,从发酵食品中筛选到LPS吸附能力最强酵母菌株CSW。证实LPS与Y。 lipolytica细胞共存一段时间后,会产生LPS含量降低的现象。通过18s r DNA分析,菌株CSW1与1。0 mg/m L来源于E。 coil O111:B4的LPS共存后,可使LPS水平降低约70%,而S。 cerevisiae BY4742仅使 LPS含量近30%。 另外一方面,过敲除大肠杆菌E。 coli染色体基因上与LPS合成相关基因,构建了多株能够直接合成新型特殊结构Kdo2-lipid A的突变菌株,具有低内毒素,适合用于大肠杆菌表达宿主生产各种蛋白及氨基酸。 2关键技术 脂多糖LPS是存在于大多数革兰氏阴性菌外膜的主要组成部分,可通过激活宿主细胞内TLR4受体信号转导途径等,促进炎性细胞分泌多种细胞因子,进而引发强烈的免疫反应,造成疾病或者死亡,在食品和药品中是重要的毒力因子,因此研发有效的LPS脱毒方法具有重要意义。本成果获得了食品级的LPS脱毒菌株,具有应用前景。 工业发酵中大肠杆菌野生型菌株中内毒素释放,是导致热原污染的重要原因,这增加了分离纯化成本,本成果从源头改造获得低毒性的大肠杆菌平台菌株,避免了发酵工程中热原产生。 3知识产权 一株具有内毒素吸附特性的耶氏酵母及其吸附特性研究方法201410713700。5 ?一种低毒含五条脂肪酸链的Kdo2-单磷酸类脂A的制备与应用201510282822。8 4项目成熟度; 本成果对酵母菌株脱毒进行了系统验证,采用荧光示踪法分析了酵母菌株对 LPS 的吸附特性。通过不同LPS孵育浓度下的观察结果均表明,Y。 lipolytica细胞表面呈现出明显的LPS附着现象,结合LPS定量结果,可以推测解脂耶氏酵母反应体系中LPS含量明显降低(~70%)与其细胞表面的LPS吸附特性有关;最后分析了酵母对LPS脱毒机制,因此本成果具有重要理论基础。 通过基因工程改造获得五株E。 coli突变菌株,所合成的LPS缺失了多糖长链,变为结构特殊的Kdo2-lipid A结构,通过用活菌体直接刺激HEK-Blue hTLR4细胞,发现五株突变菌株的细胞激起TLR4信号通路的活性比野生型W3110均有所下降;细胞毒性大幅降低。 5投资期望及应用情况 LPS又称内毒素,是存在于革兰氏阴性菌细胞壁外膜表面的一种大分子物质,一般只有在细胞死亡或分解时自行释放到周围介质中,特殊条件下也可以从活细胞中直接泄漏出来。因此如何脱除LPS具有重要应用前景,将为食品和制药行业热原去除提供新的解决方法。本成果中的食品级酵母菌株,具有重要推广价值,减毒的大肠杆菌菌株也是工业发酵的良好宿主和底盘细胞。
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用于内毒素去除和生物制剂纯化的亲和膜分离器
成熟度:-
技术类型:-
应用行业:制造业
技术简介
成果内容、水平:所发明的亲和膜分离器(专利号:ZL94112925.7,ZL95110016.5,ZL96225317.0),采用新颖的膜亲和色谱技术,充分发挥了膜过程速度快、处理量大、亲和吸附选择性高的优势,可在不影响基质中其它组分的温和条件下对溶液中的微量内毒素加以清除。该膜分离器使用简便,采用注射器或小型蠕动泵即可实现溶液的净化。对于不同的使用环境和要求,可将膜分离器单独或串联使用,以实现所要求的去除效果。主要技术指标:1、使用微孔亲和膜装载于分离器中,大大降低了操作压力(由5-10Mpa降到0.1-0.2Mpa),避免使用高压传输泵;2、在亲和膜分离器的结构设计上,采用了特殊结构样品分配器,加快了样品在膜上的均匀分配和质量传递,提高分离效能10~50倍;3、亲和膜分离器可根据样品量装载不同张数的亲和膜,便于根据实际需要进行调节和控制。应用范围:主要可应用于化工、生物、医药领域、卫生,特别是基因工程中新药的研制和试验开发项目。内毒素吸附亲和膜分离器可用于水系溶液内毒素的吸附与清除。市场前景、经济效益:1994年起在军事医学科学院(北京)、沈阳军区总医院、丹东轻化工研究所进行推广,分离纯化了白蛋白、干扰素、碱性磷酸酯酶、溶菌酶、血纤溶酶原等生物大分子,取得了较好的经济效益。97年起研制的去除内毒素的亲和膜分离器推广到大连医科大学附属医院、丹东市卫生防疫站、上海医大附属中山医院、大连市卫生防疫站、鞍山第二制药厂、郑州135医院等单位,用于抗菌素、眼药水、氨基酸、白蛋白注射液、胶原蛋白等多种医药制剂中内毒素的去除,去除率均高于95%,有效成分损失小,取得了较大的经济和社会效益。
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急性肝衰竭大鼠内毒素血症及思密达的应用研究
成熟度:正在研发
技术类型:-
应用行业:制造业
技术简介
项目简介:该研究用硫代乙酰胺诱导急性肝衰竭大鼠模型,测定急性肝衰竭大鼠门静脉内毒素水平、并对胃肠菌群、胃肠病理进行了研究,同时观察胃肠粘膜保护剂思密达对急性肝衰竭大鼠内毒素血症的防治作用。结果表明:急性肝衰竭大鼠门静脉内毒素水平明显升高,肠道菌群紊乱,且存在胃肠病理损伤,研究还发现思密达能明显降低急性肝衰竭大鼠门静脉内毒素水平。研究明确了急性肝功能衰竭大鼠内毒素血症的原因、较全面地揭示了急性肝功能衰竭大鼠肠道菌群变化的规律、证实胃肠粘膜保护剂思密达对急性肝功能衰竭大鼠内毒素血症有防治作用,为内毒素血症治疗提供了理论依据,为肝功能衰竭加强从肠论治提供了依据,具有很强的临床指导价值。处国内领先水平。
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一种清除血液毒素、改善血液粘度的中药组合
成熟度:通过小试
技术类型:发明
应用行业:农、林、牧、渔业
技术简介
本发明公开了一种新的清楚血液内毒素、改善血液粘度的药物组合物及其制备方法。本发明药物组合物可按常规的中药制剂方法制备成任何一种常用的口服制剂。本发明可显著清除血液内毒素、改善血液粘度,疗效确切,显显效迅速,作用持久,此外还具有毒副作用极小、费用低廉等优点。据最新调查,中国有1.6亿成年人血脂异常,高血压高血脂者呈年轻化,原因与膳食结构及饮食习惯息息相关。为什么这么说?担任美国国家卫生研究院(NIH)营养合作委员会主席西莫普勒斯博士经研究发现:脂肪酸的不合理摄入,可引起高血压、高血脂、糖尿病、心脑血管病、肥胖、抑郁症、癌症生。目前我国市场尚缺乏清除血液内毒素为主要治疗机理的降低血粘稠度的药物。本发明提供给“三高”人群一种中草药物内服剂的解决手段,长期服用可清除血液内毒素,改善血液粘度,同时降低胆固醇,预防脑血栓等病证的发生,无毒副作用,成本相对低廉。本发明所要解决的技术问题是能够从根本上清除血液内残留毒素、改善血液成分,降低血脂、血粘度、胆固醇、甘油三酯等血液成分的异常改变,减少脂肪肝发病,预防肝硬化形成,预防和治疗高血压,以及预防和治疗心脑血管相关疾病的发生,还机体一个健康清洁的内环境,排解体内毒素残留,提供一种能够使机体轻松,神清气爽,脏腑功能调和,气血津液清新,并且具有疗效显著、成本较低、毒副作用极小的中药药物组合物。
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无内毒素的rLj-RGD3蛋白制备方法
成熟度:正在研发
技术类型:发明
应用行业:制造业
技术简介
摘要:本发明公开一种无内毒素的rLj‑RGD3蛋白制备方法,按如下步骤进行将转化有pET23b‑RGD3重组质粒的大肠杆菌BL21高密度发酵及IPTG诱导表达,收集菌体,采用高压均质机进行菌体细胞破碎,得破菌液;过滤破菌液得澄清液;将澄清液通过镍离子亲和层析进行目的蛋白的捕获;利用Superdex 75分子筛进行蛋白的第二步精细纯化;利用Q FF阴离子交换进行蛋白的第三步纯化;蛋白纯度达99%。
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桂皮醛对大鼠根尖周炎根管中内毒素水平及根尖周炎症的影响
成熟度:-
技术类型:-
应用行业:科学研究和技术服务业
技术简介
根管治疗是目前公认的治疗牙髓病和根尖周病的首选方法,它一般由三大步骤组成:根管预备、根管消毒、根管充填。它的每一步是严格的也是相互联系的。化学和机械预备方法能去除根管内绝大部分的感染物质,但牙本质小管、侧枝根管、副根管等部位不可能在单纯机械预备过程中得到彻底地清理。国外多数研究也表明半数以上的感染根管在行预备后内仍能检出少量细菌。尽管这些余留细菌数量小,一旦缺乏根管消毒药物的抑制,很快就会增殖到接近原来的细菌数量水平。所以根管消毒不能忽视,它是为愈合创造条件。长期的临床追踪观察和基础研究的结果对根管消毒作用的认识现在也发生了一定的变化,强调根管消毒的程度更科学、更客观根管消毒的含义亦扩大。根管消毒方法包括:根管冲洗、根管封药、激光消毒、超声消毒等。但是临床上常用的根管消毒方法仍以根管封药为主。根管消毒剂是根管治疗术的三大研究方向之一。感染根管经过机械和化学预备后,根管内的细菌、坏死牙髓和根管内壁的感染物,大部分己被清除,但是侧壁牙本质小管深部,根管侧支等器械和冲洗液达不到的细微结构内还有残余的细菌、毒素,所以需要进一步进行根管消毒。目前在众多根管消毒方法中以药物消毒最常用。但实际上,现在没有一种根管消毒药能完全符合理想的根管消毒药所有条件。桂皮醛为天然药物肉桂挥发油的主要成分,具有抗肿瘤、抗血小板聚集、抗突变等作用,毒副作用低。体外实验研究证实,桂皮醛对122株包括了9属22种临床分离的常见厌氧菌,均有不同程度的抗菌作用。产黑色素类杆菌等革兰氏阴性杆菌对桂皮醛更敏感。桂皮醛还具有抗真菌及需氧菌的作用,且有一定的挥发性和渗透性,较符合根管消毒药的药物性能。本实验的目的是研究桂皮醛对感染根管中内毒素水平的影响及对根尖周组织炎症的影响,为开发桂皮醛作为根管消毒药提供实验依据。主要技术内容:一、材料(一)实验动物:Wistar大鼠250~350g,雌性,大连医科大学动物实验室提供。(二)实验药品与试剂:显色基质鲎试剂盒、前列腺素E2试剂盒、甲醛甲酚液、桂皮醛、0.9%氯化钠注射液、10%中性福尔马林固定液、10%EDTA溶液、30%过氧化氢溶液。(三)主要仪器设备:FJ48C型连体式牙科治疗设备、牙科X线机、721分光光度计、微量振荡器、XH-C旋涡混合器、恒温水浴箱、离心机、超薄切片机等。二、方法:(一)实验动物分组将80只Wistar大鼠随机分为4组:①甲醛甲酚组共25只,②桂皮醛组共25只,③生理盐水组共25只,④对照组5只。建立根尖周炎模型成功后处死对照组5只大鼠观察根尖周组织炎症程度,作为与封药后根尖周组织炎症程度的对照。前三组大鼠分别用于根管内毒素的检测和根尖周组织的组织病理学观察。根管内毒素和前列腺素E2的检测选用大鼠的双侧上、下颌第一磨牙,根尖周组织的组织病理学观察选用大鼠的上、下颌第一磨牙。(二)建立动物实验模型的方法1%戊巴比妥钠30mg/kg腹腔内注射麻药,麻醉后的大鼠取仰卧位,四肢及上颌固定于手术板上。用1/2号球钻将上、下颌第一磨牙开髓,开髓深度约为球钻直径的1~1.5倍并能探及穿髓点,将髓腔直接暴露于口腔环境中14天,参照X线片确定根尖周损害。(三)内毒素标准曲线的制定在净化工作台下,将内毒素工作品15EU加入1ml细菌内毒素检查用水溶解后用振荡器混匀15分钟以上使成15EU/ml,稀释成1EU/ml作为母液,再逐步稀释成0.1EU/ml,0.3EU/ml,0.6EU/ml标准内毒素溶液。各步稀释成的标准内毒素溶液都必须经漩涡混合器均匀30秒以上。然后,测出相应的吸光度值。为避免操作误差,每个样品均做2次,再求其平均值。设内毒素浓度值为X,平均吸光度值为Y,得直线回归方程Y=a+bx,用可以计算线性回归的计算器键入4个标准溶液平均吸光度和其对应的内毒素浓度,求标准曲线的线性相关系数│r│。注:相关系数│r│>0.980实验有效,│r│(四)根管内毒素检测1.根管内毒素采样。2.产色基质鲎试剂法检测根管内毒素浓度。(五)前列腺素E2检测1.根管内采样。2.酶联免疫法检测前列腺素E2。(六)根尖周组织的组织病理学观察:髓腔封药1天、3天、7天、14天、21天内毒素取样后,分别处死每组5只大鼠,切取含实验牙及其根尖周组织的上、下颌骨块,10%福尔马林液固定1周,10%EDTA脱钙30天,石蜡包埋,近远中向制作与牙长轴平行的4μm厚连续切片,尽可能通过根尖孔,HE染色,光镜观察,摄像。桂皮醛具有解热、扩张皮肤血管、促进血液循环、解表、发散(汗)、镇痛、抗真菌、抗肿瘤等药理作用,且毒副作用低,故临床应用前景广阔。桂皮醛是中药提取物,具有杀菌力强,尤其对厌氧菌有较好的抗菌作用。其挥发性大,渗透性强,操作简便,局部作为根管消毒药或盖髓剂未发现任何毒副作用。桂皮醛价格便宜,有作为一种根管消毒药物的开发价值。肉桂是我国著名经济树种之一,药材资源丰富。桂皮醛的提取工艺比较成熟,成本不高。肉桂油β-环糊精包合技术使得桂皮醛的稳定性显著提高,便于制成多种制剂应用于临床。气相色谱、气-质联用、高效液相色谱等技术能够实现对生药和各种制剂中桂皮醛的质量控制。因此,随着对桂皮醛研究的不断深入,其制剂的工艺和质量控制方法也将不断完善与提高。因此,我们认为桂皮醛或富含桂皮醛类药物制剂的研制将倍受开发者所重视,并造福于人类。
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急性肝衰竭大鼠内毒素血症及思密达的应用研究
成熟度:正在研发
技术类型:-
应用行业:制造业
技术简介
该研究用硫代乙酰胺诱导急性肝衰竭大鼠模型,测定急性肝衰竭大鼠门静脉内毒素水平、并对胃肠菌群、胃肠病理进行了研究,同时观察胃肠粘膜保护剂思密达对急性肝衰竭大鼠内毒素血症的防治作用。结果表明:急性肝衰竭大鼠门静脉内毒素水平明显升高,肠道菌群紊乱,且存在胃肠病理损伤,研究还发现思密达能明显降低急性肝衰竭大鼠门静脉内毒素水平。研究明确了急性肝功能衰竭大鼠内毒素血症的原因、较全面地揭示了急性肝功能衰竭大鼠肠道菌群变化的规律、证实胃肠粘膜保护剂思密达对急性肝功能衰竭大鼠内毒素血症有防治作用,为内毒素血症治疗提供了理论依据,为肝功能衰竭加强从肠论治提供了依据,具有很强的临床指导价值。处国内领先水平。
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壳寡糖在制备预防和治疗内毒素血症/菌血症药物中应用
成熟度:正在研发
技术类型:发明
应用行业:制造业
技术简介
本发明涉及生物医药,具体地说是壳寡糖在制备预防和治疗内毒素血症/菌血症药物中的应用;所述壳寡糖可抑制炎症因子的分泌来预防和治疗内毒素休克,即壳寡糖可进一步用于预防和治疗内毒素血症的药物中。本发明在细胞实验发现壳寡糖可抑制内毒素(Lipopolysaccharide,LPS)引发的炎性细胞因子的分泌。动物实验发现壳寡糖可以显著提高内毒素血症小鼠的存活率;抑制小鼠分泌炎症因子TNF-α;抑制小鼠巨噬细胞株RAW264.7分泌炎症因子IL-1β。
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一种检测内毒素的方法
成熟度:正在研发
技术类型:发明
应用行业:制造业
技术简介
本发明公开了一种检测内毒素的方法,包括:在鲎试剂中加入具有氧化还原活性的物质,再向鲎试剂中加入可能含有内毒素的待测样品,并对鲎试剂施加与所述具有氧化还原活性的物质相应的氧化还原电位,同时实时监测通过鲎试剂的电流大小,进而获知待测样品中内毒素的浓度;其中,加入所述鲎试剂中的内毒素浓度与通过鲎试剂的电流的骤降时间点之间存在对数线性关系。本发明通过电化学过程直接反应出鲎试剂凝固过程中粘度的改变,不受样品颜色的干扰,能快速、精确的实现对内毒素的检测,适于在药品质量控制、医疗器械热原监测等领域广泛应用。
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当归油成分的制药用途及含有它的药物组合物与制备方法
成熟度:正在研发
技术类型:发明
应用行业:农、林、牧、渔业
技术简介
一种稳定的当归油乳剂及其制备方法,含治疗有效量的藁本内酯或者含藁本内酯≥60%~99%的当归油,用于治疗和预防内毒素引发的疾病和抑制内毒素引起炎症因子,包括治疗和预防内毒素血症或内毒素休克,抑制肿瘤坏死因子、IL-1和IL-6。
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具有内毒素吸附能力的耶氏酵母和内毒素减毒大肠杆菌
成熟度:通过中试
技术类型:-
应用行业:制造业
技术简介
1成果简介 研发有效的内毒素LPS脱毒方法具有重要意义,本项目一方面通过KDO定量方法检测对LPS分子的吸附能力,从发酵食品中筛选到LPS吸附能力最强酵母菌株CSW。证实LPS与Y。 lipolytica细胞共存一段时间后,会产生LPS含量降低的现象。通过18s r DNA分析,菌株CSW1与1。0 mg/m L来源于E。 coil O111:B4的LPS共存后,可使LPS水平降低约70%,而S。 cerevisiae BY4742仅使 LPS含量近30%。 另外一方面,过敲除大肠杆菌E。 coli染色体基因上与LPS合成相关基因,构建了多株能够直接合成新型特殊结构Kdo2-lipid A的突变菌株,具有低内毒素,适合用于大肠杆菌表达宿主生产各种蛋白及氨基酸。 2关键技术 脂多糖LPS是存在于大多数革兰氏阴性菌外膜的主要组成部分,可通过激活宿主细胞内TLR4受体信号转导途径等,促进炎性细胞分泌多种细胞因子,进而引发强烈的免疫反应,造成疾病或者死亡,在食品和药品中是重要的毒力因子,因此研发有效的LPS脱毒方法具有重要意义。本成果获得了食品级的LPS脱毒菌株,具有应用前景。 工业发酵中大肠杆菌野生型菌株中内毒素释放,是导致热原污染的重要原因,这增加了分离纯化成本,本成果从源头改造获得低毒性的大肠杆菌平台菌株,避免了发酵工程中热原产生。 3知识产权 一株具有内毒素吸附特性的耶氏酵母及其吸附特性研究方法201410713700。5 ?一种低毒含五条脂肪酸链的Kdo2-单磷酸类脂A的制备与应用201510282822。8 4项目成熟度; 本成果对酵母菌株脱毒进行了系统验证,采用荧光示踪法分析了酵母菌株对 LPS 的吸附特性。通过不同LPS孵育浓度下的观察结果均表明,Y。 lipolytica细胞表面呈现出明显的LPS附着现象,结合LPS定量结果,可以推测解脂耶氏酵母反应体系中LPS含量明显降低(~70%)与其细胞表面的LPS吸附特性有关;最后分析了酵母对LPS脱毒机制,因此本成果具有重要理论基础。 通过基因工程改造获得五株E。 coli突变菌株,所合成的LPS缺失了多糖长链,变为结构特殊的Kdo2-lipid A结构,通过用活菌体直接刺激HEK-Blue hTLR4细胞,发现五株突变菌株的细胞激起TLR4信号通路的活性比野生型W3110均有所下降;细胞毒性大幅降低。 5投资期望及应用情况 LPS又称内毒素,是存在于革兰氏阴性菌细胞壁外膜表面的一种大分子物质,一般只有在细胞死亡或分解时自行释放到周围介质中,特殊条件下也可以从活细胞中直接泄漏出来。因此如何脱除LPS具有重要应用前景,将为食品和制药行业热原去除提供新的解决方法。本成果中的食品级酵母菌株,具有重要推广价值,减毒的大肠杆菌菌株也是工业发酵的良好宿主和底盘细胞。
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用于内毒素去除和生物制剂纯化的亲和膜分离器
成熟度:-
技术类型:-
应用行业:制造业
技术简介
成果内容、水平:所发明的亲和膜分离器(专利号:ZL94112925.7,ZL95110016.5,ZL96225317.0),采用新颖的膜亲和色谱技术,充分发挥了膜过程速度快、处理量大、亲和吸附选择性高的优势,可在不影响基质中其它组分的温和条件下对溶液中的微量内毒素加以清除。该膜分离器使用简便,采用注射器或小型蠕动泵即可实现溶液的净化。对于不同的使用环境和要求,可将膜分离器单独或串联使用,以实现所要求的去除效果。主要技术指标:1、使用微孔亲和膜装载于分离器中,大大降低了操作压力(由5-10Mpa降到0.1-0.2Mpa),避免使用高压传输泵;2、在亲和膜分离器的结构设计上,采用了特殊结构样品分配器,加快了样品在膜上的均匀分配和质量传递,提高分离效能10~50倍;3、亲和膜分离器可根据样品量装载不同张数的亲和膜,便于根据实际需要进行调节和控制。应用范围:主要可应用于化工、生物、医药领域、卫生,特别是基因工程中新药的研制和试验开发项目。内毒素吸附亲和膜分离器可用于水系溶液内毒素的吸附与清除。市场前景、经济效益:1994年起在军事医学科学院(北京)、沈阳军区总医院、丹东轻化工研究所进行推广,分离纯化了白蛋白、干扰素、碱性磷酸酯酶、溶菌酶、血纤溶酶原等生物大分子,取得了较好的经济效益。97年起研制的去除内毒素的亲和膜分离器推广到大连医科大学附属医院、丹东市卫生防疫站、上海医大附属中山医院、大连市卫生防疫站、鞍山第二制药厂、郑州135医院等单位,用于抗菌素、眼药水、氨基酸、白蛋白注射液、胶原蛋白等多种医药制剂中内毒素的去除,去除率均高于95%,有效成分损失小,取得了较大的经济和社会效益。
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急性肝衰竭大鼠内毒素血症及思密达的应用研究
成熟度:正在研发
技术类型:-
应用行业:制造业
技术简介
项目简介:该研究用硫代乙酰胺诱导急性肝衰竭大鼠模型,测定急性肝衰竭大鼠门静脉内毒素水平、并对胃肠菌群、胃肠病理进行了研究,同时观察胃肠粘膜保护剂思密达对急性肝衰竭大鼠内毒素血症的防治作用。结果表明:急性肝衰竭大鼠门静脉内毒素水平明显升高,肠道菌群紊乱,且存在胃肠病理损伤,研究还发现思密达能明显降低急性肝衰竭大鼠门静脉内毒素水平。研究明确了急性肝功能衰竭大鼠内毒素血症的原因、较全面地揭示了急性肝功能衰竭大鼠肠道菌群变化的规律、证实胃肠粘膜保护剂思密达对急性肝功能衰竭大鼠内毒素血症有防治作用,为内毒素血症治疗提供了理论依据,为肝功能衰竭加强从肠论治提供了依据,具有很强的临床指导价值。处国内领先水平。
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一种清除血液毒素、改善血液粘度的中药组合
成熟度:通过小试
技术类型:发明
应用行业:农、林、牧、渔业
技术简介
本发明公开了一种新的清楚血液内毒素、改善血液粘度的药物组合物及其制备方法。本发明药物组合物可按常规的中药制剂方法制备成任何一种常用的口服制剂。本发明可显著清除血液内毒素、改善血液粘度,疗效确切,显显效迅速,作用持久,此外还具有毒副作用极小、费用低廉等优点。据最新调查,中国有1.6亿成年人血脂异常,高血压高血脂者呈年轻化,原因与膳食结构及饮食习惯息息相关。为什么这么说?担任美国国家卫生研究院(NIH)营养合作委员会主席西莫普勒斯博士经研究发现:脂肪酸的不合理摄入,可引起高血压、高血脂、糖尿病、心脑血管病、肥胖、抑郁症、癌症生。目前我国市场尚缺乏清除血液内毒素为主要治疗机理的降低血粘稠度的药物。本发明提供给“三高”人群一种中草药物内服剂的解决手段,长期服用可清除血液内毒素,改善血液粘度,同时降低胆固醇,预防脑血栓等病证的发生,无毒副作用,成本相对低廉。本发明所要解决的技术问题是能够从根本上清除血液内残留毒素、改善血液成分,降低血脂、血粘度、胆固醇、甘油三酯等血液成分的异常改变,减少脂肪肝发病,预防肝硬化形成,预防和治疗高血压,以及预防和治疗心脑血管相关疾病的发生,还机体一个健康清洁的内环境,排解体内毒素残留,提供一种能够使机体轻松,神清气爽,脏腑功能调和,气血津液清新,并且具有疗效显著、成本较低、毒副作用极小的中药药物组合物。
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无内毒素的rLj-RGD3蛋白制备方法
成熟度:正在研发
技术类型:发明
应用行业:制造业
技术简介
摘要:本发明公开一种无内毒素的rLj‑RGD3蛋白制备方法,按如下步骤进行将转化有pET23b‑RGD3重组质粒的大肠杆菌BL21高密度发酵及IPTG诱导表达,收集菌体,采用高压均质机进行菌体细胞破碎,得破菌液;过滤破菌液得澄清液;将澄清液通过镍离子亲和层析进行目的蛋白的捕获;利用Superdex 75分子筛进行蛋白的第二步精细纯化;利用Q FF阴离子交换进行蛋白的第三步纯化;蛋白纯度达99%。
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桂皮醛对大鼠根尖周炎根管中内毒素水平及根尖周炎症的影响
成熟度:-
技术类型:-
应用行业:科学研究和技术服务业
技术简介
根管治疗是目前公认的治疗牙髓病和根尖周病的首选方法,它一般由三大步骤组成:根管预备、根管消毒、根管充填。它的每一步是严格的也是相互联系的。化学和机械预备方法能去除根管内绝大部分的感染物质,但牙本质小管、侧枝根管、副根管等部位不可能在单纯机械预备过程中得到彻底地清理。国外多数研究也表明半数以上的感染根管在行预备后内仍能检出少量细菌。尽管这些余留细菌数量小,一旦缺乏根管消毒药物的抑制,很快就会增殖到接近原来的细菌数量水平。所以根管消毒不能忽视,它是为愈合创造条件。长期的临床追踪观察和基础研究的结果对根管消毒作用的认识现在也发生了一定的变化,强调根管消毒的程度更科学、更客观根管消毒的含义亦扩大。根管消毒方法包括:根管冲洗、根管封药、激光消毒、超声消毒等。但是临床上常用的根管消毒方法仍以根管封药为主。根管消毒剂是根管治疗术的三大研究方向之一。感染根管经过机械和化学预备后,根管内的细菌、坏死牙髓和根管内壁的感染物,大部分己被清除,但是侧壁牙本质小管深部,根管侧支等器械和冲洗液达不到的细微结构内还有残余的细菌、毒素,所以需要进一步进行根管消毒。目前在众多根管消毒方法中以药物消毒最常用。但实际上,现在没有一种根管消毒药能完全符合理想的根管消毒药所有条件。桂皮醛为天然药物肉桂挥发油的主要成分,具有抗肿瘤、抗血小板聚集、抗突变等作用,毒副作用低。体外实验研究证实,桂皮醛对122株包括了9属22种临床分离的常见厌氧菌,均有不同程度的抗菌作用。产黑色素类杆菌等革兰氏阴性杆菌对桂皮醛更敏感。桂皮醛还具有抗真菌及需氧菌的作用,且有一定的挥发性和渗透性,较符合根管消毒药的药物性能。本实验的目的是研究桂皮醛对感染根管中内毒素水平的影响及对根尖周组织炎症的影响,为开发桂皮醛作为根管消毒药提供实验依据。主要技术内容:一、材料(一)实验动物:Wistar大鼠250~350g,雌性,大连医科大学动物实验室提供。(二)实验药品与试剂:显色基质鲎试剂盒、前列腺素E2试剂盒、甲醛甲酚液、桂皮醛、0.9%氯化钠注射液、10%中性福尔马林固定液、10%EDTA溶液、30%过氧化氢溶液。(三)主要仪器设备:FJ48C型连体式牙科治疗设备、牙科X线机、721分光光度计、微量振荡器、XH-C旋涡混合器、恒温水浴箱、离心机、超薄切片机等。二、方法:(一)实验动物分组将80只Wistar大鼠随机分为4组:①甲醛甲酚组共25只,②桂皮醛组共25只,③生理盐水组共25只,④对照组5只。建立根尖周炎模型成功后处死对照组5只大鼠观察根尖周组织炎症程度,作为与封药后根尖周组织炎症程度的对照。前三组大鼠分别用于根管内毒素的检测和根尖周组织的组织病理学观察。根管内毒素和前列腺素E2的检测选用大鼠的双侧上、下颌第一磨牙,根尖周组织的组织病理学观察选用大鼠的上、下颌第一磨牙。(二)建立动物实验模型的方法1%戊巴比妥钠30mg/kg腹腔内注射麻药,麻醉后的大鼠取仰卧位,四肢及上颌固定于手术板上。用1/2号球钻将上、下颌第一磨牙开髓,开髓深度约为球钻直径的1~1.5倍并能探及穿髓点,将髓腔直接暴露于口腔环境中14天,参照X线片确定根尖周损害。(三)内毒素标准曲线的制定在净化工作台下,将内毒素工作品15EU加入1ml细菌内毒素检查用水溶解后用振荡器混匀15分钟以上使成15EU/ml,稀释成1EU/ml作为母液,再逐步稀释成0.1EU/ml,0.3EU/ml,0.6EU/ml标准内毒素溶液。各步稀释成的标准内毒素溶液都必须经漩涡混合器均匀30秒以上。然后,测出相应的吸光度值。为避免操作误差,每个样品均做2次,再求其平均值。设内毒素浓度值为X,平均吸光度值为Y,得直线回归方程Y=a+bx,用可以计算线性回归的计算器键入4个标准溶液平均吸光度和其对应的内毒素浓度,求标准曲线的线性相关系数│r│。注:相关系数│r│>0.980实验有效,│r│(四)根管内毒素检测1.根管内毒素采样。2.产色基质鲎试剂法检测根管内毒素浓度。(五)前列腺素E2检测1.根管内采样。2.酶联免疫法检测前列腺素E2。(六)根尖周组织的组织病理学观察:髓腔封药1天、3天、7天、14天、21天内毒素取样后,分别处死每组5只大鼠,切取含实验牙及其根尖周组织的上、下颌骨块,10%福尔马林液固定1周,10%EDTA脱钙30天,石蜡包埋,近远中向制作与牙长轴平行的4μm厚连续切片,尽可能通过根尖孔,HE染色,光镜观察,摄像。桂皮醛具有解热、扩张皮肤血管、促进血液循环、解表、发散(汗)、镇痛、抗真菌、抗肿瘤等药理作用,且毒副作用低,故临床应用前景广阔。桂皮醛是中药提取物,具有杀菌力强,尤其对厌氧菌有较好的抗菌作用。其挥发性大,渗透性强,操作简便,局部作为根管消毒药或盖髓剂未发现任何毒副作用。桂皮醛价格便宜,有作为一种根管消毒药物的开发价值。肉桂是我国著名经济树种之一,药材资源丰富。桂皮醛的提取工艺比较成熟,成本不高。肉桂油β-环糊精包合技术使得桂皮醛的稳定性显著提高,便于制成多种制剂应用于临床。气相色谱、气-质联用、高效液相色谱等技术能够实现对生药和各种制剂中桂皮醛的质量控制。因此,随着对桂皮醛研究的不断深入,其制剂的工艺和质量控制方法也将不断完善与提高。因此,我们认为桂皮醛或富含桂皮醛类药物制剂的研制将倍受开发者所重视,并造福于人类。
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急性肝衰竭大鼠内毒素血症及思密达的应用研究
成熟度:正在研发
技术类型:-
应用行业:制造业
技术简介
该研究用硫代乙酰胺诱导急性肝衰竭大鼠模型,测定急性肝衰竭大鼠门静脉内毒素水平、并对胃肠菌群、胃肠病理进行了研究,同时观察胃肠粘膜保护剂思密达对急性肝衰竭大鼠内毒素血症的防治作用。结果表明:急性肝衰竭大鼠门静脉内毒素水平明显升高,肠道菌群紊乱,且存在胃肠病理损伤,研究还发现思密达能明显降低急性肝衰竭大鼠门静脉内毒素水平。研究明确了急性肝功能衰竭大鼠内毒素血症的原因、较全面地揭示了急性肝功能衰竭大鼠肠道菌群变化的规律、证实胃肠粘膜保护剂思密达对急性肝功能衰竭大鼠内毒素血症有防治作用,为内毒素血症治疗提供了理论依据,为肝功能衰竭加强从肠论治提供了依据,具有很强的临床指导价值。处国内领先水平。
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壳寡糖在制备预防和治疗内毒素血症/菌血症药物中应用
成熟度:正在研发
技术类型:发明
应用行业:制造业
技术简介
本发明涉及生物医药,具体地说是壳寡糖在制备预防和治疗内毒素血症/菌血症药物中的应用;所述壳寡糖可抑制炎症因子的分泌来预防和治疗内毒素休克,即壳寡糖可进一步用于预防和治疗内毒素血症的药物中。本发明在细胞实验发现壳寡糖可抑制内毒素(Lipopolysaccharide,LPS)引发的炎性细胞因子的分泌。动物实验发现壳寡糖可以显著提高内毒素血症小鼠的存活率;抑制小鼠分泌炎症因子TNF-α;抑制小鼠巨噬细胞株RAW264.7分泌炎症因子IL-1β。
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一种检测内毒素的方法
成熟度:正在研发
技术类型:发明
应用行业:制造业
技术简介
本发明公开了一种检测内毒素的方法,包括:在鲎试剂中加入具有氧化还原活性的物质,再向鲎试剂中加入可能含有内毒素的待测样品,并对鲎试剂施加与所述具有氧化还原活性的物质相应的氧化还原电位,同时实时监测通过鲎试剂的电流大小,进而获知待测样品中内毒素的浓度;其中,加入所述鲎试剂中的内毒素浓度与通过鲎试剂的电流的骤降时间点之间存在对数线性关系。本发明通过电化学过程直接反应出鲎试剂凝固过程中粘度的改变,不受样品颜色的干扰,能快速、精确的实现对内毒素的检测,适于在药品质量控制、医疗器械热原监测等领域广泛应用。
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当归油成分的制药用途及含有它的药物组合物与制备方法
成熟度:正在研发
技术类型:发明
应用行业:农、林、牧、渔业
技术简介
一种稳定的当归油乳剂及其制备方法,含治疗有效量的藁本内酯或者含藁本内酯≥60%~99%的当归油,用于治疗和预防内毒素引发的疾病和抑制内毒素引起炎症因子,包括治疗和预防内毒素血症或内毒素休克,抑制肿瘤坏死因子、IL-1和IL-6。
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具有内毒素吸附能力的耶氏酵母和内毒素减毒大肠杆菌
成熟度:通过中试
技术类型:-
应用行业:制造业
技术简介
1成果简介 研发有效的内毒素LPS脱毒方法具有重要意义,本项目一方面通过KDO定量方法检测对LPS分子的吸附能力,从发酵食品中筛选到LPS吸附能力最强酵母菌株CSW。证实LPS与Y。 lipolytica细胞共存一段时间后,会产生LPS含量降低的现象。通过18s r DNA分析,菌株CSW1与1。0 mg/m L来源于E。 coil O111:B4的LPS共存后,可使LPS水平降低约70%,而S。 cerevisiae BY4742仅使 LPS含量近30%。 另外一方面,过敲除大肠杆菌E。 coli染色体基因上与LPS合成相关基因,构建了多株能够直接合成新型特殊结构Kdo2-lipid A的突变菌株,具有低内毒素,适合用于大肠杆菌表达宿主生产各种蛋白及氨基酸。 2关键技术 脂多糖LPS是存在于大多数革兰氏阴性菌外膜的主要组成部分,可通过激活宿主细胞内TLR4受体信号转导途径等,促进炎性细胞分泌多种细胞因子,进而引发强烈的免疫反应,造成疾病或者死亡,在食品和药品中是重要的毒力因子,因此研发有效的LPS脱毒方法具有重要意义。本成果获得了食品级的LPS脱毒菌株,具有应用前景。 工业发酵中大肠杆菌野生型菌株中内毒素释放,是导致热原污染的重要原因,这增加了分离纯化成本,本成果从源头改造获得低毒性的大肠杆菌平台菌株,避免了发酵工程中热原产生。 3知识产权 一株具有内毒素吸附特性的耶氏酵母及其吸附特性研究方法201410713700。5 ?一种低毒含五条脂肪酸链的Kdo2-单磷酸类脂A的制备与应用201510282822。8 4项目成熟度; 本成果对酵母菌株脱毒进行了系统验证,采用荧光示踪法分析了酵母菌株对 LPS 的吸附特性。通过不同LPS孵育浓度下的观察结果均表明,Y。 lipolytica细胞表面呈现出明显的LPS附着现象,结合LPS定量结果,可以推测解脂耶氏酵母反应体系中LPS含量明显降低(~70%)与其细胞表面的LPS吸附特性有关;最后分析了酵母对LPS脱毒机制,因此本成果具有重要理论基础。 通过基因工程改造获得五株E。 coli突变菌株,所合成的LPS缺失了多糖长链,变为结构特殊的Kdo2-lipid A结构,通过用活菌体直接刺激HEK-Blue hTLR4细胞,发现五株突变菌株的细胞激起TLR4信号通路的活性比野生型W3110均有所下降;细胞毒性大幅降低。 5投资期望及应用情况 LPS又称内毒素,是存在于革兰氏阴性菌细胞壁外膜表面的一种大分子物质,一般只有在细胞死亡或分解时自行释放到周围介质中,特殊条件下也可以从活细胞中直接泄漏出来。因此如何脱除LPS具有重要应用前景,将为食品和制药行业热原去除提供新的解决方法。本成果中的食品级酵母菌株,具有重要推广价值,减毒的大肠杆菌菌株也是工业发酵的良好宿主和底盘细胞。
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用于内毒素去除和生物制剂纯化的亲和膜分离器
成熟度:-
技术类型:-
应用行业:制造业
技术简介
成果内容、水平:所发明的亲和膜分离器(专利号:ZL94112925.7,ZL95110016.5,ZL96225317.0),采用新颖的膜亲和色谱技术,充分发挥了膜过程速度快、处理量大、亲和吸附选择性高的优势,可在不影响基质中其它组分的温和条件下对溶液中的微量内毒素加以清除。该膜分离器使用简便,采用注射器或小型蠕动泵即可实现溶液的净化。对于不同的使用环境和要求,可将膜分离器单独或串联使用,以实现所要求的去除效果。主要技术指标:1、使用微孔亲和膜装载于分离器中,大大降低了操作压力(由5-10Mpa降到0.1-0.2Mpa),避免使用高压传输泵;2、在亲和膜分离器的结构设计上,采用了特殊结构样品分配器,加快了样品在膜上的均匀分配和质量传递,提高分离效能10~50倍;3、亲和膜分离器可根据样品量装载不同张数的亲和膜,便于根据实际需要进行调节和控制。应用范围:主要可应用于化工、生物、医药领域、卫生,特别是基因工程中新药的研制和试验开发项目。内毒素吸附亲和膜分离器可用于水系溶液内毒素的吸附与清除。市场前景、经济效益:1994年起在军事医学科学院(北京)、沈阳军区总医院、丹东轻化工研究所进行推广,分离纯化了白蛋白、干扰素、碱性磷酸酯酶、溶菌酶、血纤溶酶原等生物大分子,取得了较好的经济效益。97年起研制的去除内毒素的亲和膜分离器推广到大连医科大学附属医院、丹东市卫生防疫站、上海医大附属中山医院、大连市卫生防疫站、鞍山第二制药厂、郑州135医院等单位,用于抗菌素、眼药水、氨基酸、白蛋白注射液、胶原蛋白等多种医药制剂中内毒素的去除,去除率均高于95%,有效成分损失小,取得了较大的经济和社会效益。
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急性肝衰竭大鼠内毒素血症及思密达的应用研究
成熟度:正在研发
技术类型:-
应用行业:制造业
技术简介
项目简介:该研究用硫代乙酰胺诱导急性肝衰竭大鼠模型,测定急性肝衰竭大鼠门静脉内毒素水平、并对胃肠菌群、胃肠病理进行了研究,同时观察胃肠粘膜保护剂思密达对急性肝衰竭大鼠内毒素血症的防治作用。结果表明:急性肝衰竭大鼠门静脉内毒素水平明显升高,肠道菌群紊乱,且存在胃肠病理损伤,研究还发现思密达能明显降低急性肝衰竭大鼠门静脉内毒素水平。研究明确了急性肝功能衰竭大鼠内毒素血症的原因、较全面地揭示了急性肝功能衰竭大鼠肠道菌群变化的规律、证实胃肠粘膜保护剂思密达对急性肝功能衰竭大鼠内毒素血症有防治作用,为内毒素血症治疗提供了理论依据,为肝功能衰竭加强从肠论治提供了依据,具有很强的临床指导价值。处国内领先水平。
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一种清除血液毒素、改善血液粘度的中药组合
成熟度:通过小试
技术类型:发明
应用行业:农、林、牧、渔业
技术简介
本发明公开了一种新的清楚血液内毒素、改善血液粘度的药物组合物及其制备方法。本发明药物组合物可按常规的中药制剂方法制备成任何一种常用的口服制剂。本发明可显著清除血液内毒素、改善血液粘度,疗效确切,显显效迅速,作用持久,此外还具有毒副作用极小、费用低廉等优点。据最新调查,中国有1.6亿成年人血脂异常,高血压高血脂者呈年轻化,原因与膳食结构及饮食习惯息息相关。为什么这么说?担任美国国家卫生研究院(NIH)营养合作委员会主席西莫普勒斯博士经研究发现:脂肪酸的不合理摄入,可引起高血压、高血脂、糖尿病、心脑血管病、肥胖、抑郁症、癌症生。目前我国市场尚缺乏清除血液内毒素为主要治疗机理的降低血粘稠度的药物。本发明提供给“三高”人群一种中草药物内服剂的解决手段,长期服用可清除血液内毒素,改善血液粘度,同时降低胆固醇,预防脑血栓等病证的发生,无毒副作用,成本相对低廉。本发明所要解决的技术问题是能够从根本上清除血液内残留毒素、改善血液成分,降低血脂、血粘度、胆固醇、甘油三酯等血液成分的异常改变,减少脂肪肝发病,预防肝硬化形成,预防和治疗高血压,以及预防和治疗心脑血管相关疾病的发生,还机体一个健康清洁的内环境,排解体内毒素残留,提供一种能够使机体轻松,神清气爽,脏腑功能调和,气血津液清新,并且具有疗效显著、成本较低、毒副作用极小的中药药物组合物。
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无内毒素的rLj-RGD3蛋白制备方法
成熟度:正在研发
技术类型:发明
应用行业:制造业
技术简介
摘要:本发明公开一种无内毒素的rLj‑RGD3蛋白制备方法,按如下步骤进行将转化有pET23b‑RGD3重组质粒的大肠杆菌BL21高密度发酵及IPTG诱导表达,收集菌体,采用高压均质机进行菌体细胞破碎,得破菌液;过滤破菌液得澄清液;将澄清液通过镍离子亲和层析进行目的蛋白的捕获;利用Superdex 75分子筛进行蛋白的第二步精细纯化;利用Q FF阴离子交换进行蛋白的第三步纯化;蛋白纯度达99%。
找到10项技术成果数据。
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桂皮醛对大鼠根尖周炎根管中内毒素水平及根尖周炎症的影响
成熟度:-
技术类型:-
应用行业:科学研究和技术服务业
技术简介
根管治疗是目前公认的治疗牙髓病和根尖周病的首选方法,它一般由三大步骤组成:根管预备、根管消毒、根管充填。它的每一步是严格的也是相互联系的。化学和机械预备方法能去除根管内绝大部分的感染物质,但牙本质小管、侧枝根管、副根管等部位不可能在单纯机械预备过程中得到彻底地清理。国外多数研究也表明半数以上的感染根管在行预备后内仍能检出少量细菌。尽管这些余留细菌数量小,一旦缺乏根管消毒药物的抑制,很快就会增殖到接近原来的细菌数量水平。所以根管消毒不能忽视,它是为愈合创造条件。长期的临床追踪观察和基础研究的结果对根管消毒作用的认识现在也发生了一定的变化,强调根管消毒的程度更科学、更客观根管消毒的含义亦扩大。根管消毒方法包括:根管冲洗、根管封药、激光消毒、超声消毒等。但是临床上常用的根管消毒方法仍以根管封药为主。根管消毒剂是根管治疗术的三大研究方向之一。感染根管经过机械和化学预备后,根管内的细菌、坏死牙髓和根管内壁的感染物,大部分己被清除,但是侧壁牙本质小管深部,根管侧支等器械和冲洗液达不到的细微结构内还有残余的细菌、毒素,所以需要进一步进行根管消毒。目前在众多根管消毒方法中以药物消毒最常用。但实际上,现在没有一种根管消毒药能完全符合理想的根管消毒药所有条件。桂皮醛为天然药物肉桂挥发油的主要成分,具有抗肿瘤、抗血小板聚集、抗突变等作用,毒副作用低。体外实验研究证实,桂皮醛对122株包括了9属22种临床分离的常见厌氧菌,均有不同程度的抗菌作用。产黑色素类杆菌等革兰氏阴性杆菌对桂皮醛更敏感。桂皮醛还具有抗真菌及需氧菌的作用,且有一定的挥发性和渗透性,较符合根管消毒药的药物性能。本实验的目的是研究桂皮醛对感染根管中内毒素水平的影响及对根尖周组织炎症的影响,为开发桂皮醛作为根管消毒药提供实验依据。主要技术内容:一、材料(一)实验动物:Wistar大鼠250~350g,雌性,大连医科大学动物实验室提供。(二)实验药品与试剂:显色基质鲎试剂盒、前列腺素E2试剂盒、甲醛甲酚液、桂皮醛、0.9%氯化钠注射液、10%中性福尔马林固定液、10%EDTA溶液、30%过氧化氢溶液。(三)主要仪器设备:FJ48C型连体式牙科治疗设备、牙科X线机、721分光光度计、微量振荡器、XH-C旋涡混合器、恒温水浴箱、离心机、超薄切片机等。二、方法:(一)实验动物分组将80只Wistar大鼠随机分为4组:①甲醛甲酚组共25只,②桂皮醛组共25只,③生理盐水组共25只,④对照组5只。建立根尖周炎模型成功后处死对照组5只大鼠观察根尖周组织炎症程度,作为与封药后根尖周组织炎症程度的对照。前三组大鼠分别用于根管内毒素的检测和根尖周组织的组织病理学观察。根管内毒素和前列腺素E2的检测选用大鼠的双侧上、下颌第一磨牙,根尖周组织的组织病理学观察选用大鼠的上、下颌第一磨牙。(二)建立动物实验模型的方法1%戊巴比妥钠30mg/kg腹腔内注射麻药,麻醉后的大鼠取仰卧位,四肢及上颌固定于手术板上。用1/2号球钻将上、下颌第一磨牙开髓,开髓深度约为球钻直径的1~1.5倍并能探及穿髓点,将髓腔直接暴露于口腔环境中14天,参照X线片确定根尖周损害。(三)内毒素标准曲线的制定在净化工作台下,将内毒素工作品15EU加入1ml细菌内毒素检查用水溶解后用振荡器混匀15分钟以上使成15EU/ml,稀释成1EU/ml作为母液,再逐步稀释成0.1EU/ml,0.3EU/ml,0.6EU/ml标准内毒素溶液。各步稀释成的标准内毒素溶液都必须经漩涡混合器均匀30秒以上。然后,测出相应的吸光度值。为避免操作误差,每个样品均做2次,再求其平均值。设内毒素浓度值为X,平均吸光度值为Y,得直线回归方程Y=a+bx,用可以计算线性回归的计算器键入4个标准溶液平均吸光度和其对应的内毒素浓度,求标准曲线的线性相关系数│r│。注:相关系数│r│>0.980实验有效,│r│(四)根管内毒素检测1.根管内毒素采样。2.产色基质鲎试剂法检测根管内毒素浓度。(五)前列腺素E2检测1.根管内采样。2.酶联免疫法检测前列腺素E2。(六)根尖周组织的组织病理学观察:髓腔封药1天、3天、7天、14天、21天内毒素取样后,分别处死每组5只大鼠,切取含实验牙及其根尖周组织的上、下颌骨块,10%福尔马林液固定1周,10%EDTA脱钙30天,石蜡包埋,近远中向制作与牙长轴平行的4μm厚连续切片,尽可能通过根尖孔,HE染色,光镜观察,摄像。桂皮醛具有解热、扩张皮肤血管、促进血液循环、解表、发散(汗)、镇痛、抗真菌、抗肿瘤等药理作用,且毒副作用低,故临床应用前景广阔。桂皮醛是中药提取物,具有杀菌力强,尤其对厌氧菌有较好的抗菌作用。其挥发性大,渗透性强,操作简便,局部作为根管消毒药或盖髓剂未发现任何毒副作用。桂皮醛价格便宜,有作为一种根管消毒药物的开发价值。肉桂是我国著名经济树种之一,药材资源丰富。桂皮醛的提取工艺比较成熟,成本不高。肉桂油β-环糊精包合技术使得桂皮醛的稳定性显著提高,便于制成多种制剂应用于临床。气相色谱、气-质联用、高效液相色谱等技术能够实现对生药和各种制剂中桂皮醛的质量控制。因此,随着对桂皮醛研究的不断深入,其制剂的工艺和质量控制方法也将不断完善与提高。因此,我们认为桂皮醛或富含桂皮醛类药物制剂的研制将倍受开发者所重视,并造福于人类。
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急性肝衰竭大鼠内毒素血症及思密达的应用研究
成熟度:正在研发
技术类型:-
应用行业:制造业
技术简介
该研究用硫代乙酰胺诱导急性肝衰竭大鼠模型,测定急性肝衰竭大鼠门静脉内毒素水平、并对胃肠菌群、胃肠病理进行了研究,同时观察胃肠粘膜保护剂思密达对急性肝衰竭大鼠内毒素血症的防治作用。结果表明:急性肝衰竭大鼠门静脉内毒素水平明显升高,肠道菌群紊乱,且存在胃肠病理损伤,研究还发现思密达能明显降低急性肝衰竭大鼠门静脉内毒素水平。研究明确了急性肝功能衰竭大鼠内毒素血症的原因、较全面地揭示了急性肝功能衰竭大鼠肠道菌群变化的规律、证实胃肠粘膜保护剂思密达对急性肝功能衰竭大鼠内毒素血症有防治作用,为内毒素血症治疗提供了理论依据,为肝功能衰竭加强从肠论治提供了依据,具有很强的临床指导价值。处国内领先水平。
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壳寡糖在制备预防和治疗内毒素血症/菌血症药物中应用
成熟度:正在研发
技术类型:发明
应用行业:制造业
技术简介
本发明涉及生物医药,具体地说是壳寡糖在制备预防和治疗内毒素血症/菌血症药物中的应用;所述壳寡糖可抑制炎症因子的分泌来预防和治疗内毒素休克,即壳寡糖可进一步用于预防和治疗内毒素血症的药物中。本发明在细胞实验发现壳寡糖可抑制内毒素(Lipopolysaccharide,LPS)引发的炎性细胞因子的分泌。动物实验发现壳寡糖可以显著提高内毒素血症小鼠的存活率;抑制小鼠分泌炎症因子TNF-α;抑制小鼠巨噬细胞株RAW264.7分泌炎症因子IL-1β。
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一种检测内毒素的方法
成熟度:正在研发
技术类型:发明
应用行业:制造业
技术简介
本发明公开了一种检测内毒素的方法,包括:在鲎试剂中加入具有氧化还原活性的物质,再向鲎试剂中加入可能含有内毒素的待测样品,并对鲎试剂施加与所述具有氧化还原活性的物质相应的氧化还原电位,同时实时监测通过鲎试剂的电流大小,进而获知待测样品中内毒素的浓度;其中,加入所述鲎试剂中的内毒素浓度与通过鲎试剂的电流的骤降时间点之间存在对数线性关系。本发明通过电化学过程直接反应出鲎试剂凝固过程中粘度的改变,不受样品颜色的干扰,能快速、精确的实现对内毒素的检测,适于在药品质量控制、医疗器械热原监测等领域广泛应用。
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当归油成分的制药用途及含有它的药物组合物与制备方法
成熟度:正在研发
技术类型:发明
应用行业:农、林、牧、渔业
技术简介
一种稳定的当归油乳剂及其制备方法,含治疗有效量的藁本内酯或者含藁本内酯≥60%~99%的当归油,用于治疗和预防内毒素引发的疾病和抑制内毒素引起炎症因子,包括治疗和预防内毒素血症或内毒素休克,抑制肿瘤坏死因子、IL-1和IL-6。
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具有内毒素吸附能力的耶氏酵母和内毒素减毒大肠杆菌
成熟度:通过中试
技术类型:-
应用行业:制造业
技术简介
1成果简介 研发有效的内毒素LPS脱毒方法具有重要意义,本项目一方面通过KDO定量方法检测对LPS分子的吸附能力,从发酵食品中筛选到LPS吸附能力最强酵母菌株CSW。证实LPS与Y。 lipolytica细胞共存一段时间后,会产生LPS含量降低的现象。通过18s r DNA分析,菌株CSW1与1。0 mg/m L来源于E。 coil O111:B4的LPS共存后,可使LPS水平降低约70%,而S。 cerevisiae BY4742仅使 LPS含量近30%。 另外一方面,过敲除大肠杆菌E。 coli染色体基因上与LPS合成相关基因,构建了多株能够直接合成新型特殊结构Kdo2-lipid A的突变菌株,具有低内毒素,适合用于大肠杆菌表达宿主生产各种蛋白及氨基酸。 2关键技术 脂多糖LPS是存在于大多数革兰氏阴性菌外膜的主要组成部分,可通过激活宿主细胞内TLR4受体信号转导途径等,促进炎性细胞分泌多种细胞因子,进而引发强烈的免疫反应,造成疾病或者死亡,在食品和药品中是重要的毒力因子,因此研发有效的LPS脱毒方法具有重要意义。本成果获得了食品级的LPS脱毒菌株,具有应用前景。 工业发酵中大肠杆菌野生型菌株中内毒素释放,是导致热原污染的重要原因,这增加了分离纯化成本,本成果从源头改造获得低毒性的大肠杆菌平台菌株,避免了发酵工程中热原产生。 3知识产权 一株具有内毒素吸附特性的耶氏酵母及其吸附特性研究方法201410713700。5 ?一种低毒含五条脂肪酸链的Kdo2-单磷酸类脂A的制备与应用201510282822。8 4项目成熟度; 本成果对酵母菌株脱毒进行了系统验证,采用荧光示踪法分析了酵母菌株对 LPS 的吸附特性。通过不同LPS孵育浓度下的观察结果均表明,Y。 lipolytica细胞表面呈现出明显的LPS附着现象,结合LPS定量结果,可以推测解脂耶氏酵母反应体系中LPS含量明显降低(~70%)与其细胞表面的LPS吸附特性有关;最后分析了酵母对LPS脱毒机制,因此本成果具有重要理论基础。 通过基因工程改造获得五株E。 coli突变菌株,所合成的LPS缺失了多糖长链,变为结构特殊的Kdo2-lipid A结构,通过用活菌体直接刺激HEK-Blue hTLR4细胞,发现五株突变菌株的细胞激起TLR4信号通路的活性比野生型W3110均有所下降;细胞毒性大幅降低。 5投资期望及应用情况 LPS又称内毒素,是存在于革兰氏阴性菌细胞壁外膜表面的一种大分子物质,一般只有在细胞死亡或分解时自行释放到周围介质中,特殊条件下也可以从活细胞中直接泄漏出来。因此如何脱除LPS具有重要应用前景,将为食品和制药行业热原去除提供新的解决方法。本成果中的食品级酵母菌株,具有重要推广价值,减毒的大肠杆菌菌株也是工业发酵的良好宿主和底盘细胞。
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用于内毒素去除和生物制剂纯化的亲和膜分离器
成熟度:-
技术类型:-
应用行业:制造业
技术简介
成果内容、水平:所发明的亲和膜分离器(专利号:ZL94112925.7,ZL95110016.5,ZL96225317.0),采用新颖的膜亲和色谱技术,充分发挥了膜过程速度快、处理量大、亲和吸附选择性高的优势,可在不影响基质中其它组分的温和条件下对溶液中的微量内毒素加以清除。该膜分离器使用简便,采用注射器或小型蠕动泵即可实现溶液的净化。对于不同的使用环境和要求,可将膜分离器单独或串联使用,以实现所要求的去除效果。主要技术指标:1、使用微孔亲和膜装载于分离器中,大大降低了操作压力(由5-10Mpa降到0.1-0.2Mpa),避免使用高压传输泵;2、在亲和膜分离器的结构设计上,采用了特殊结构样品分配器,加快了样品在膜上的均匀分配和质量传递,提高分离效能10~50倍;3、亲和膜分离器可根据样品量装载不同张数的亲和膜,便于根据实际需要进行调节和控制。应用范围:主要可应用于化工、生物、医药领域、卫生,特别是基因工程中新药的研制和试验开发项目。内毒素吸附亲和膜分离器可用于水系溶液内毒素的吸附与清除。市场前景、经济效益:1994年起在军事医学科学院(北京)、沈阳军区总医院、丹东轻化工研究所进行推广,分离纯化了白蛋白、干扰素、碱性磷酸酯酶、溶菌酶、血纤溶酶原等生物大分子,取得了较好的经济效益。97年起研制的去除内毒素的亲和膜分离器推广到大连医科大学附属医院、丹东市卫生防疫站、上海医大附属中山医院、大连市卫生防疫站、鞍山第二制药厂、郑州135医院等单位,用于抗菌素、眼药水、氨基酸、白蛋白注射液、胶原蛋白等多种医药制剂中内毒素的去除,去除率均高于95%,有效成分损失小,取得了较大的经济和社会效益。
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急性肝衰竭大鼠内毒素血症及思密达的应用研究
成熟度:正在研发
技术类型:-
应用行业:制造业
技术简介
项目简介:该研究用硫代乙酰胺诱导急性肝衰竭大鼠模型,测定急性肝衰竭大鼠门静脉内毒素水平、并对胃肠菌群、胃肠病理进行了研究,同时观察胃肠粘膜保护剂思密达对急性肝衰竭大鼠内毒素血症的防治作用。结果表明:急性肝衰竭大鼠门静脉内毒素水平明显升高,肠道菌群紊乱,且存在胃肠病理损伤,研究还发现思密达能明显降低急性肝衰竭大鼠门静脉内毒素水平。研究明确了急性肝功能衰竭大鼠内毒素血症的原因、较全面地揭示了急性肝功能衰竭大鼠肠道菌群变化的规律、证实胃肠粘膜保护剂思密达对急性肝功能衰竭大鼠内毒素血症有防治作用,为内毒素血症治疗提供了理论依据,为肝功能衰竭加强从肠论治提供了依据,具有很强的临床指导价值。处国内领先水平。
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一种清除血液毒素、改善血液粘度的中药组合
成熟度:通过小试
技术类型:发明
应用行业:农、林、牧、渔业
技术简介
本发明公开了一种新的清楚血液内毒素、改善血液粘度的药物组合物及其制备方法。本发明药物组合物可按常规的中药制剂方法制备成任何一种常用的口服制剂。本发明可显著清除血液内毒素、改善血液粘度,疗效确切,显显效迅速,作用持久,此外还具有毒副作用极小、费用低廉等优点。据最新调查,中国有1.6亿成年人血脂异常,高血压高血脂者呈年轻化,原因与膳食结构及饮食习惯息息相关。为什么这么说?担任美国国家卫生研究院(NIH)营养合作委员会主席西莫普勒斯博士经研究发现:脂肪酸的不合理摄入,可引起高血压、高血脂、糖尿病、心脑血管病、肥胖、抑郁症、癌症生。目前我国市场尚缺乏清除血液内毒素为主要治疗机理的降低血粘稠度的药物。本发明提供给“三高”人群一种中草药物内服剂的解决手段,长期服用可清除血液内毒素,改善血液粘度,同时降低胆固醇,预防脑血栓等病证的发生,无毒副作用,成本相对低廉。本发明所要解决的技术问题是能够从根本上清除血液内残留毒素、改善血液成分,降低血脂、血粘度、胆固醇、甘油三酯等血液成分的异常改变,减少脂肪肝发病,预防肝硬化形成,预防和治疗高血压,以及预防和治疗心脑血管相关疾病的发生,还机体一个健康清洁的内环境,排解体内毒素残留,提供一种能够使机体轻松,神清气爽,脏腑功能调和,气血津液清新,并且具有疗效显著、成本较低、毒副作用极小的中药药物组合物。
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无内毒素的rLj-RGD3蛋白制备方法
成熟度:正在研发
技术类型:发明
应用行业:制造业
技术简介
摘要:本发明公开一种无内毒素的rLj‑RGD3蛋白制备方法,按如下步骤进行将转化有pET23b‑RGD3重组质粒的大肠杆菌BL21高密度发酵及IPTG诱导表达,收集菌体,采用高压均质机进行菌体细胞破碎,得破菌液;过滤破菌液得澄清液;将澄清液通过镍离子亲和层析进行目的蛋白的捕获;利用Superdex 75分子筛进行蛋白的第二步精细纯化;利用Q FF阴离子交换进行蛋白的第三步纯化;蛋白纯度达99%。
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桂皮醛对大鼠根尖周炎根管中内毒素水平及根尖周炎症的影响
成熟度:-
技术类型:-
应用行业:科学研究和技术服务业
技术简介
根管治疗是目前公认的治疗牙髓病和根尖周病的首选方法,它一般由三大步骤组成:根管预备、根管消毒、根管充填。它的每一步是严格的也是相互联系的。化学和机械预备方法能去除根管内绝大部分的感染物质,但牙本质小管、侧枝根管、副根管等部位不可能在单纯机械预备过程中得到彻底地清理。国外多数研究也表明半数以上的感染根管在行预备后内仍能检出少量细菌。尽管这些余留细菌数量小,一旦缺乏根管消毒药物的抑制,很快就会增殖到接近原来的细菌数量水平。所以根管消毒不能忽视,它是为愈合创造条件。长期的临床追踪观察和基础研究的结果对根管消毒作用的认识现在也发生了一定的变化,强调根管消毒的程度更科学、更客观根管消毒的含义亦扩大。根管消毒方法包括:根管冲洗、根管封药、激光消毒、超声消毒等。但是临床上常用的根管消毒方法仍以根管封药为主。根管消毒剂是根管治疗术的三大研究方向之一。感染根管经过机械和化学预备后,根管内的细菌、坏死牙髓和根管内壁的感染物,大部分己被清除,但是侧壁牙本质小管深部,根管侧支等器械和冲洗液达不到的细微结构内还有残余的细菌、毒素,所以需要进一步进行根管消毒。目前在众多根管消毒方法中以药物消毒最常用。但实际上,现在没有一种根管消毒药能完全符合理想的根管消毒药所有条件。桂皮醛为天然药物肉桂挥发油的主要成分,具有抗肿瘤、抗血小板聚集、抗突变等作用,毒副作用低。体外实验研究证实,桂皮醛对122株包括了9属22种临床分离的常见厌氧菌,均有不同程度的抗菌作用。产黑色素类杆菌等革兰氏阴性杆菌对桂皮醛更敏感。桂皮醛还具有抗真菌及需氧菌的作用,且有一定的挥发性和渗透性,较符合根管消毒药的药物性能。本实验的目的是研究桂皮醛对感染根管中内毒素水平的影响及对根尖周组织炎症的影响,为开发桂皮醛作为根管消毒药提供实验依据。主要技术内容:一、材料(一)实验动物:Wistar大鼠250~350g,雌性,大连医科大学动物实验室提供。(二)实验药品与试剂:显色基质鲎试剂盒、前列腺素E2试剂盒、甲醛甲酚液、桂皮醛、0.9%氯化钠注射液、10%中性福尔马林固定液、10%EDTA溶液、30%过氧化氢溶液。(三)主要仪器设备:FJ48C型连体式牙科治疗设备、牙科X线机、721分光光度计、微量振荡器、XH-C旋涡混合器、恒温水浴箱、离心机、超薄切片机等。二、方法:(一)实验动物分组将80只Wistar大鼠随机分为4组:①甲醛甲酚组共25只,②桂皮醛组共25只,③生理盐水组共25只,④对照组5只。建立根尖周炎模型成功后处死对照组5只大鼠观察根尖周组织炎症程度,作为与封药后根尖周组织炎症程度的对照。前三组大鼠分别用于根管内毒素的检测和根尖周组织的组织病理学观察。根管内毒素和前列腺素E2的检测选用大鼠的双侧上、下颌第一磨牙,根尖周组织的组织病理学观察选用大鼠的上、下颌第一磨牙。(二)建立动物实验模型的方法1%戊巴比妥钠30mg/kg腹腔内注射麻药,麻醉后的大鼠取仰卧位,四肢及上颌固定于手术板上。用1/2号球钻将上、下颌第一磨牙开髓,开髓深度约为球钻直径的1~1.5倍并能探及穿髓点,将髓腔直接暴露于口腔环境中14天,参照X线片确定根尖周损害。(三)内毒素标准曲线的制定在净化工作台下,将内毒素工作品15EU加入1ml细菌内毒素检查用水溶解后用振荡器混匀15分钟以上使成15EU/ml,稀释成1EU/ml作为母液,再逐步稀释成0.1EU/ml,0.3EU/ml,0.6EU/ml标准内毒素溶液。各步稀释成的标准内毒素溶液都必须经漩涡混合器均匀30秒以上。然后,测出相应的吸光度值。为避免操作误差,每个样品均做2次,再求其平均值。设内毒素浓度值为X,平均吸光度值为Y,得直线回归方程Y=a+bx,用可以计算线性回归的计算器键入4个标准溶液平均吸光度和其对应的内毒素浓度,求标准曲线的线性相关系数│r│。注:相关系数│r│>0.980实验有效,│r│(四)根管内毒素检测1.根管内毒素采样。2.产色基质鲎试剂法检测根管内毒素浓度。(五)前列腺素E2检测1.根管内采样。2.酶联免疫法检测前列腺素E2。(六)根尖周组织的组织病理学观察:髓腔封药1天、3天、7天、14天、21天内毒素取样后,分别处死每组5只大鼠,切取含实验牙及其根尖周组织的上、下颌骨块,10%福尔马林液固定1周,10%EDTA脱钙30天,石蜡包埋,近远中向制作与牙长轴平行的4μm厚连续切片,尽可能通过根尖孔,HE染色,光镜观察,摄像。桂皮醛具有解热、扩张皮肤血管、促进血液循环、解表、发散(汗)、镇痛、抗真菌、抗肿瘤等药理作用,且毒副作用低,故临床应用前景广阔。桂皮醛是中药提取物,具有杀菌力强,尤其对厌氧菌有较好的抗菌作用。其挥发性大,渗透性强,操作简便,局部作为根管消毒药或盖髓剂未发现任何毒副作用。桂皮醛价格便宜,有作为一种根管消毒药物的开发价值。肉桂是我国著名经济树种之一,药材资源丰富。桂皮醛的提取工艺比较成熟,成本不高。肉桂油β-环糊精包合技术使得桂皮醛的稳定性显著提高,便于制成多种制剂应用于临床。气相色谱、气-质联用、高效液相色谱等技术能够实现对生药和各种制剂中桂皮醛的质量控制。因此,随着对桂皮醛研究的不断深入,其制剂的工艺和质量控制方法也将不断完善与提高。因此,我们认为桂皮醛或富含桂皮醛类药物制剂的研制将倍受开发者所重视,并造福于人类。
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急性肝衰竭大鼠内毒素血症及思密达的应用研究
成熟度:正在研发
技术类型:-
应用行业:制造业
技术简介
该研究用硫代乙酰胺诱导急性肝衰竭大鼠模型,测定急性肝衰竭大鼠门静脉内毒素水平、并对胃肠菌群、胃肠病理进行了研究,同时观察胃肠粘膜保护剂思密达对急性肝衰竭大鼠内毒素血症的防治作用。结果表明:急性肝衰竭大鼠门静脉内毒素水平明显升高,肠道菌群紊乱,且存在胃肠病理损伤,研究还发现思密达能明显降低急性肝衰竭大鼠门静脉内毒素水平。研究明确了急性肝功能衰竭大鼠内毒素血症的原因、较全面地揭示了急性肝功能衰竭大鼠肠道菌群变化的规律、证实胃肠粘膜保护剂思密达对急性肝功能衰竭大鼠内毒素血症有防治作用,为内毒素血症治疗提供了理论依据,为肝功能衰竭加强从肠论治提供了依据,具有很强的临床指导价值。处国内领先水平。
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壳寡糖在制备预防和治疗内毒素血症/菌血症药物中应用
成熟度:正在研发
技术类型:发明
应用行业:制造业
技术简介
本发明涉及生物医药,具体地说是壳寡糖在制备预防和治疗内毒素血症/菌血症药物中的应用;所述壳寡糖可抑制炎症因子的分泌来预防和治疗内毒素休克,即壳寡糖可进一步用于预防和治疗内毒素血症的药物中。本发明在细胞实验发现壳寡糖可抑制内毒素(Lipopolysaccharide,LPS)引发的炎性细胞因子的分泌。动物实验发现壳寡糖可以显著提高内毒素血症小鼠的存活率;抑制小鼠分泌炎症因子TNF-α;抑制小鼠巨噬细胞株RAW264.7分泌炎症因子IL-1β。
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一种检测内毒素的方法
成熟度:正在研发
技术类型:发明
应用行业:制造业
技术简介
本发明公开了一种检测内毒素的方法,包括:在鲎试剂中加入具有氧化还原活性的物质,再向鲎试剂中加入可能含有内毒素的待测样品,并对鲎试剂施加与所述具有氧化还原活性的物质相应的氧化还原电位,同时实时监测通过鲎试剂的电流大小,进而获知待测样品中内毒素的浓度;其中,加入所述鲎试剂中的内毒素浓度与通过鲎试剂的电流的骤降时间点之间存在对数线性关系。本发明通过电化学过程直接反应出鲎试剂凝固过程中粘度的改变,不受样品颜色的干扰,能快速、精确的实现对内毒素的检测,适于在药品质量控制、医疗器械热原监测等领域广泛应用。
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当归油成分的制药用途及含有它的药物组合物与制备方法
成熟度:正在研发
技术类型:发明
应用行业:农、林、牧、渔业
技术简介
一种稳定的当归油乳剂及其制备方法,含治疗有效量的藁本内酯或者含藁本内酯≥60%~99%的当归油,用于治疗和预防内毒素引发的疾病和抑制内毒素引起炎症因子,包括治疗和预防内毒素血症或内毒素休克,抑制肿瘤坏死因子、IL-1和IL-6。
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具有内毒素吸附能力的耶氏酵母和内毒素减毒大肠杆菌
成熟度:通过中试
技术类型:-
应用行业:制造业
技术简介
1成果简介 研发有效的内毒素LPS脱毒方法具有重要意义,本项目一方面通过KDO定量方法检测对LPS分子的吸附能力,从发酵食品中筛选到LPS吸附能力最强酵母菌株CSW。证实LPS与Y。 lipolytica细胞共存一段时间后,会产生LPS含量降低的现象。通过18s r DNA分析,菌株CSW1与1。0 mg/m L来源于E。 coil O111:B4的LPS共存后,可使LPS水平降低约70%,而S。 cerevisiae BY4742仅使 LPS含量近30%。 另外一方面,过敲除大肠杆菌E。 coli染色体基因上与LPS合成相关基因,构建了多株能够直接合成新型特殊结构Kdo2-lipid A的突变菌株,具有低内毒素,适合用于大肠杆菌表达宿主生产各种蛋白及氨基酸。 2关键技术 脂多糖LPS是存在于大多数革兰氏阴性菌外膜的主要组成部分,可通过激活宿主细胞内TLR4受体信号转导途径等,促进炎性细胞分泌多种细胞因子,进而引发强烈的免疫反应,造成疾病或者死亡,在食品和药品中是重要的毒力因子,因此研发有效的LPS脱毒方法具有重要意义。本成果获得了食品级的LPS脱毒菌株,具有应用前景。 工业发酵中大肠杆菌野生型菌株中内毒素释放,是导致热原污染的重要原因,这增加了分离纯化成本,本成果从源头改造获得低毒性的大肠杆菌平台菌株,避免了发酵工程中热原产生。 3知识产权 一株具有内毒素吸附特性的耶氏酵母及其吸附特性研究方法201410713700。5 ?一种低毒含五条脂肪酸链的Kdo2-单磷酸类脂A的制备与应用201510282822。8 4项目成熟度; 本成果对酵母菌株脱毒进行了系统验证,采用荧光示踪法分析了酵母菌株对 LPS 的吸附特性。通过不同LPS孵育浓度下的观察结果均表明,Y。 lipolytica细胞表面呈现出明显的LPS附着现象,结合LPS定量结果,可以推测解脂耶氏酵母反应体系中LPS含量明显降低(~70%)与其细胞表面的LPS吸附特性有关;最后分析了酵母对LPS脱毒机制,因此本成果具有重要理论基础。 通过基因工程改造获得五株E。 coli突变菌株,所合成的LPS缺失了多糖长链,变为结构特殊的Kdo2-lipid A结构,通过用活菌体直接刺激HEK-Blue hTLR4细胞,发现五株突变菌株的细胞激起TLR4信号通路的活性比野生型W3110均有所下降;细胞毒性大幅降低。 5投资期望及应用情况 LPS又称内毒素,是存在于革兰氏阴性菌细胞壁外膜表面的一种大分子物质,一般只有在细胞死亡或分解时自行释放到周围介质中,特殊条件下也可以从活细胞中直接泄漏出来。因此如何脱除LPS具有重要应用前景,将为食品和制药行业热原去除提供新的解决方法。本成果中的食品级酵母菌株,具有重要推广价值,减毒的大肠杆菌菌株也是工业发酵的良好宿主和底盘细胞。
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用于内毒素去除和生物制剂纯化的亲和膜分离器
成熟度:-
技术类型:-
应用行业:制造业
技术简介
成果内容、水平:所发明的亲和膜分离器(专利号:ZL94112925.7,ZL95110016.5,ZL96225317.0),采用新颖的膜亲和色谱技术,充分发挥了膜过程速度快、处理量大、亲和吸附选择性高的优势,可在不影响基质中其它组分的温和条件下对溶液中的微量内毒素加以清除。该膜分离器使用简便,采用注射器或小型蠕动泵即可实现溶液的净化。对于不同的使用环境和要求,可将膜分离器单独或串联使用,以实现所要求的去除效果。主要技术指标:1、使用微孔亲和膜装载于分离器中,大大降低了操作压力(由5-10Mpa降到0.1-0.2Mpa),避免使用高压传输泵;2、在亲和膜分离器的结构设计上,采用了特殊结构样品分配器,加快了样品在膜上的均匀分配和质量传递,提高分离效能10~50倍;3、亲和膜分离器可根据样品量装载不同张数的亲和膜,便于根据实际需要进行调节和控制。应用范围:主要可应用于化工、生物、医药领域、卫生,特别是基因工程中新药的研制和试验开发项目。内毒素吸附亲和膜分离器可用于水系溶液内毒素的吸附与清除。市场前景、经济效益:1994年起在军事医学科学院(北京)、沈阳军区总医院、丹东轻化工研究所进行推广,分离纯化了白蛋白、干扰素、碱性磷酸酯酶、溶菌酶、血纤溶酶原等生物大分子,取得了较好的经济效益。97年起研制的去除内毒素的亲和膜分离器推广到大连医科大学附属医院、丹东市卫生防疫站、上海医大附属中山医院、大连市卫生防疫站、鞍山第二制药厂、郑州135医院等单位,用于抗菌素、眼药水、氨基酸、白蛋白注射液、胶原蛋白等多种医药制剂中内毒素的去除,去除率均高于95%,有效成分损失小,取得了较大的经济和社会效益。
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急性肝衰竭大鼠内毒素血症及思密达的应用研究
成熟度:正在研发
技术类型:-
应用行业:制造业
技术简介
项目简介:该研究用硫代乙酰胺诱导急性肝衰竭大鼠模型,测定急性肝衰竭大鼠门静脉内毒素水平、并对胃肠菌群、胃肠病理进行了研究,同时观察胃肠粘膜保护剂思密达对急性肝衰竭大鼠内毒素血症的防治作用。结果表明:急性肝衰竭大鼠门静脉内毒素水平明显升高,肠道菌群紊乱,且存在胃肠病理损伤,研究还发现思密达能明显降低急性肝衰竭大鼠门静脉内毒素水平。研究明确了急性肝功能衰竭大鼠内毒素血症的原因、较全面地揭示了急性肝功能衰竭大鼠肠道菌群变化的规律、证实胃肠粘膜保护剂思密达对急性肝功能衰竭大鼠内毒素血症有防治作用,为内毒素血症治疗提供了理论依据,为肝功能衰竭加强从肠论治提供了依据,具有很强的临床指导价值。处国内领先水平。
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一种清除血液毒素、改善血液粘度的中药组合
成熟度:通过小试
技术类型:发明
应用行业:农、林、牧、渔业
技术简介
本发明公开了一种新的清楚血液内毒素、改善血液粘度的药物组合物及其制备方法。本发明药物组合物可按常规的中药制剂方法制备成任何一种常用的口服制剂。本发明可显著清除血液内毒素、改善血液粘度,疗效确切,显显效迅速,作用持久,此外还具有毒副作用极小、费用低廉等优点。据最新调查,中国有1.6亿成年人血脂异常,高血压高血脂者呈年轻化,原因与膳食结构及饮食习惯息息相关。为什么这么说?担任美国国家卫生研究院(NIH)营养合作委员会主席西莫普勒斯博士经研究发现:脂肪酸的不合理摄入,可引起高血压、高血脂、糖尿病、心脑血管病、肥胖、抑郁症、癌症生。目前我国市场尚缺乏清除血液内毒素为主要治疗机理的降低血粘稠度的药物。本发明提供给“三高”人群一种中草药物内服剂的解决手段,长期服用可清除血液内毒素,改善血液粘度,同时降低胆固醇,预防脑血栓等病证的发生,无毒副作用,成本相对低廉。本发明所要解决的技术问题是能够从根本上清除血液内残留毒素、改善血液成分,降低血脂、血粘度、胆固醇、甘油三酯等血液成分的异常改变,减少脂肪肝发病,预防肝硬化形成,预防和治疗高血压,以及预防和治疗心脑血管相关疾病的发生,还机体一个健康清洁的内环境,排解体内毒素残留,提供一种能够使机体轻松,神清气爽,脏腑功能调和,气血津液清新,并且具有疗效显著、成本较低、毒副作用极小的中药药物组合物。
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无内毒素的rLj-RGD3蛋白制备方法
成熟度:正在研发
技术类型:发明
应用行业:制造业
技术简介
摘要:本发明公开一种无内毒素的rLj‑RGD3蛋白制备方法,按如下步骤进行将转化有pET23b‑RGD3重组质粒的大肠杆菌BL21高密度发酵及IPTG诱导表达,收集菌体,采用高压均质机进行菌体细胞破碎,得破菌液;过滤破菌液得澄清液;将澄清液通过镍离子亲和层析进行目的蛋白的捕获;利用Superdex 75分子筛进行蛋白的第二步精细纯化;利用Q FF阴离子交换进行蛋白的第三步纯化;蛋白纯度达99%。